Avaliação do efeito da frutose-1,6-bisfosfato na prevenção da fibrose pulmonar experimental

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Dias, Henrique Bregolin
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul; Escola de Ciências; Brasil; PUCRS; Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular
• Palavras-chave em Português: Fibrose Pulmonar; Bleomicina; Frutose-1,6-Bisfosfato; Matriz Extracelular; Fibroblasto; CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERAL
• Link de acesso: http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/8950

Fibrose pulmonar (FP) é o resultado de um processo de lesão crônica no qual fibroblastos se tornam ativados e passam a secretar e depositar grandes quantidades de matriz extracelular (ECM). Este fato leva uma dificuldade na degradação da ECM, seguido por rigidez tecidual, perda de função tecidual e morte. A frutose-1,6-bisfosfato é um metabólito intermediário da rota glicolítica que vem sendo estudada há vários anos e tem demonstrado ações protetoras em diferentes tipos celulares e tecidos. Há evidências de que a FBP é capaz de prevenir o desenvolvimento da FP induzida por bleomicina (BLM) em camundongos, mas o mecanismo pelo qual isso acontece ainda é desconhecido. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da FBP sobre a prevenção e/ou regulação do processo fibrótico em um modelo experimental de FP in vivo e em células pulmonares in vitro. Para isso, tratamos animais que receberam BLM intratraqueal com FBP por 14 dias. Ainda, utilizamos culturas primárias de fibroblastos e miofibroblastos pulmonares extraídos de camundongos saudáveis e fibróticos, respectivamente. Analisamos, a função pulmonar, a expressão gênica de subtipos de colágenos e outros componentes importantes no processo fibrotico, assim como as taxas de proliferação, contração e migração celular, além das proteínas envolvidas na degradação da ECM. No modelo de FP, a FBP foi capaz de melhorar significativamente a função pulmonar, como demonstrado pela redução do depósito de colágeno e diminuição da expressão de genes relacionados à ECM, como colágeno e fibronectina. In vitro, miofibroblastos tratados com FBP por 3 dias demonstraram uma menor taxa de proliferação, contração e migração, o que são indícios de desativação e reversão fenotípica. Além disso, a FBP também diminui a expressão de genes e proteínas relacionados à ECM, como colágeno, fibronectina e actina de músculo liso α em cultura primária de miofibroblastos. MMP1, uma colagenase responsável pela degradação da ECM, teve sua expressão aumentada, enquanto a TIMP-1, um inibidor da MMP1, diminuiu. MMP2, que está associada ao aumento da invasão do tecido por miofibroblastos, também teve sua expressão diminuída. Nossos resultados demonstram que a FBP pode prevenir o desenvolvimento de FP induzida por BLM através da redução da produção e depósito de colágeno e outros componentes de ECM e isso pode ser mediado através do aumento da produção de MMP1 e diminuição da TIMP-1, o que promoveria uma degradação efetiva da ECM depositada no tecido.