Identificação de moléculas reativas com anticorpos associados a dengue

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Oliveira, Ana Sofia Lima Estevão de
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul; Escola de Ciências da Saúde; Brasil; PUCRS; Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia Farmacêutica
• Palavras-chave em Português: Dengue; Peptóid; Biomarcadores; Diagnóstico; CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA
• Link de acesso: http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/7784

A dengue é uma arbovirose de alta incidência no Brasil, e corresponde a um grande problema de saúde pública. Ela possui uma incidência anual de mais de 50.000.000 e resulta num elevado número de casos de óbito, cerca de 25.000. Devido a isso, é de grande urgência que possamos identificar esta doença enquanto ela ainda se encontra em um estado inicial, para que, deste modo, possamos evitar a progressão da doença para casos mais severos. Um grande problema relacionado a dengue é que o vírus é representado por quatro subtipos, os quais são filogenéticamente distintos (DENV1, DENV2, DENV3 e DENV4). Isso quer dizer que, por mais que as manifestações e formas de disseminação sejam iguais, a contaminação por um dos sorotipos não irá proteger contra as demais. Ao contrário do que muitos acreditam, a infecção por um sorotipo pode até assentuar uma infecção secundária pelos demais. Uma hipótese para explicar casos mais severos da doença devido a infecções heterotípicas é a hipótese de ADE (antibody-dependent enhancement), a qual sugere que a reação cruzada resulta na falta da inativação viral, aumentando assim a produção de mediadores inflamatórios e permeabilidade vascular devido a uma estimulação da replicação do vírus. Devido a isso, é de grande necessidade a identificação da doença antes das manifestações severas, e, porque essa identificação clínica, principalmente no estágio inicial da doença, é difícil, um marcardor sorológico seria muito valioso. Marcadores sorológicos para diagnóstico de doenças vêm se tornando um tópico de recente interesse. Esses biomarcadores têm a vantagem de não serem invasivos para o paciente e baratos de produzir e analizar. Sendo assim, aqui, apresentamos uma nova tecnologia para a busca desses marcadores, os peptóids. Peptóids são oligômeros sintéticos, compostos por unidades de glicina N-substituída e possuem uma variada utilidade biológica que proporcionam uma tecnologia alternativa para a investigação e elucidação da resposta imune. O mesmo, vêm se destacando para busca de biomarcadores sorológicos devido a sua estabilidade química em fluídos onde enzimas degradativas podem estar presentes e devido a resultados promissores sem a necessidade de um conhecimento prévio sobre o antígeno natural e o seu anticorpo correspondente. Neste projeto, foi realizado a triagem de uma biblioteca combinatorial com cerca de um milhão de peptóids, os quais passaram por etapas de triagens em soros de pacientes positivos para dengue, bem como para pacientes negativos. Aqui provamos o potencial dessas moléculas sintéticas na identificação de anticorpos com relevância clínica presente no soro dos pacientes. Os resultados obtidos foram gerados através de 3 etapas de triagem consecutivas, onde 33 peptóids reativos foram identificados. Devido a imparcialidade desta técnica, acreditamos que pelo menos um desses 33 peptóids seja extremamente específico para a doença estudada. Os mesmos foram enviados para sequenciamento e re-síntese para que novos experimentos sejam feitos e para que os estudos continuem. Espera-se resultados muito promissores na área de diagnóstico para dengue.