Análise in vivo da aplicação de ácido hialurônico e hidroxiapatita/ β -tricálcio fosfato (bone ceramic®) em células mesenquimais diferenciadas em osteoblastos para regeneração óssea alveolar

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Fulginiti, Roberta Limeira
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul; Escola de Ciências Saúde e da Vida; Brasil; PUCRS; Programa de Pós-Graduação em Odontologia
• Palavras-chave em Português: Engenharia Tecidual; Regeneração Óssea; Medicina Regenerativa; Hyaluronic acid; Regenerative Medicine; Tissue Engineering; CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIA
• Link de acesso: https://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/10421

A presente pesquisa teve por objetivo avaliar in vivo a influência de compostos utilizando células-tronco mesenquimais de origem adiposa diferenciadas em osteoblastos (mASCs) e seus fatores parácrinos (SP) combinados com matriz de ácido hialurônico de alto e baixo peso molecular (AH-HLW) e enxerto ósseo sintético de hidroxiapatita 60% e beta-fosfato tricálcico 40% (HP/β-TCP) na regeneração óssea. Foram realizados 144 defeitos ósseos críticos (DOC) na região femoral de 36 ratos Lewis medindo 2 mm de diâmetro (dois defeitos por fêmur). Os compostos para enxertia realizados foram divididos em grupos: I- controle (negativo), tendo apenas o defeito (CT); II- concentrado de meio de cultura (SP); III- Células mesenquimais adipogênicas (mASCs) diferenciadas em osteoblastos (OST); IV- mASCs + ácido hialurônico (AH) (AC); V- (HP/β-TCP) (H); VI- HA-HLW + mASCs + (HP/β-TCP) (ACH). Após 15 e 30 dias os ratos sofreram eutanásia e os defeitos foram analisados por microtomografia computadorizada (micro-CT), histomorfometria, RT-PCR (Reação em cadeia da Polimerase em tempo Real) e ELISA (ensaio de imunoabsorção enzimática). Os resultados para o teste de micro-CT do percentual de volume de tecido ósseo neoformado sugeriram maior volume para o grupo (ACH) e (H), diferindo dos demais (p<0,05). Na histomorfometria o grupo (CT) apresentou maiores valores diferindo estatisticamente do grupo (ACH) (p<0,05) para 15 dias e não houve diferenças entre os grupos no percentual de área de tecido ósseo regenerado no período de 30 dias. No RT-PCR, para o tempo de 15 dias, o grupo (SP) teve valores mais expressivos de colagenase I (Col1A) e osteopontina (OP). Para 30 dias o grupo H teve maior expressão de BMP-4, o grupo (OST) de OP e BMP-2 em relação aos outros grupos. No ELISA foram encontradas as maiores expressões dos fatores de crescimento nos grupos (ACH) e (H) em comparação aos outros. Os fatores de crescimento IGF-1, VEGF e FGF apresentaram maior expressão no grupo (ACH) para 30 dias. A aplicação de técnicas de enxertia utilizando tanto compostos acelulares derivados do meio de cultura das mASCs, quanto compostos com a presença de células associados a substitutos ósseos ou matrizes osteocondutoras apresentou resultados promissores na neoformação óssea.