A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas
Ano de defesa: | 2011 |
---|---|
Autor(a) principal: | |
Orientador(a): | |
Banca de defesa: | |
Tipo de documento: | Dissertação |
Tipo de acesso: | Acesso aberto |
Idioma: | por |
Instituição de defesa: |
Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul
|
Programa de Pós-Graduação: |
Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de
|
Departamento: |
Faculdade de Medicina
|
País: |
BR
|
Palavras-chave em Português: | |
Área do conhecimento CNPq: | |
Link de acesso: | http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/1611 |
Resumo: | A tuberculose prevalece como uma das principais causas de morte no mundo ocasionadas por um ?nico agente infeccioso, o Mycobacterium tuberculosis. A enzima Chiquimato Quinase (MtSK) codificada pelo gene aroK de M. tuberculosis, quinta enzima da via do chiquimato. catalisa a transfer?ncia de um grupo fosfato do ATP para o carbono 3 do grupo hidroxila do chiquimato, formando chiquimato-3-fosfato e ADP. A interrup??o do gene aroK demonstrou que a enzima MfSK ? essencial para a viabilidade do M. tuberculosis. Neste trabalho, apresentamos a purifica??o da enzima MtSK at? a homogeneidade, an?lise por espectrometria de massa, sequenciamento de amino?cidos da por??o N-Terminal, determina??o do estado oligom?rico da enzima em solu??o, cin?tica em estado estacion?rio, espectroscopia de fluoresc?ncia e calorimetria de titula??o isot?rmica. Os resultados encontrados sugerem que a rea??o catalisada pela enzima monom?rica MtSK segue um mecanismo em equil?brio-r?pido aleat?rio para a adi??o dos substratos e uma libera??o ordenada dos produtos, onde a libera??o do chiquimato-3-fosfato ? seguida pela libera??o do ADP, resultando na enzima na sua forma livre. Os resultados de calorimetria demonstraram uma grande diferen?a de calor gerada na associa??o da enzima livre aos seus ligantes, revelando assinaturas termodin?micas de intera??es n?o-covalentes para cada processo de liga??o. Estes resultados ajudaram a compreender melhor o modo de a??o da enzima MtSK e podem subsequentemente serem ?teis para guiar o desenho racional de inibidores relacionados a esta enzima e que possam ser avaliados posteriormente como anti-TB. |
id |
P_RS_eff6014e4b07086fe9db49f2f1b4854c |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:tede2.pucrs.br:tede/1611 |
network_acronym_str |
P_RS |
network_name_str |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS |
repository_id_str |
|
spelling |
Santos, Di?genes SantiagoCPF:18729258804http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4721461Z7CPF:00808464086http://lattes.cnpq.br/1805307635564032Rosado, Leonardo Astolfi2015-04-14T13:35:08Z2011-03-292011-02-23ROSADO, Leonardo Astolfi. A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas. 2011. 181 f. Disserta??o (Mestrado em Medicina e Ci?ncias da Sa?de) - Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, 2011.http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/1611Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 430225.pdf: 4266902 bytes, checksum: 4436e37d2d21598e8ed023afd34398a2 (MD5) Previous issue date: 2011-02-23A tuberculose prevalece como uma das principais causas de morte no mundo ocasionadas por um ?nico agente infeccioso, o Mycobacterium tuberculosis. A enzima Chiquimato Quinase (MtSK) codificada pelo gene aroK de M. tuberculosis, quinta enzima da via do chiquimato. catalisa a transfer?ncia de um grupo fosfato do ATP para o carbono 3 do grupo hidroxila do chiquimato, formando chiquimato-3-fosfato e ADP. A interrup??o do gene aroK demonstrou que a enzima MfSK ? essencial para a viabilidade do M. tuberculosis. Neste trabalho, apresentamos a purifica??o da enzima MtSK at? a homogeneidade, an?lise por espectrometria de massa, sequenciamento de amino?cidos da por??o N-Terminal, determina??o do estado oligom?rico da enzima em solu??o, cin?tica em estado estacion?rio, espectroscopia de fluoresc?ncia e calorimetria de titula??o isot?rmica. Os resultados encontrados sugerem que a rea??o catalisada pela enzima monom?rica MtSK segue um mecanismo em equil?brio-r?pido aleat?rio para a adi??o dos substratos e uma libera??o ordenada dos produtos, onde a libera??o do chiquimato-3-fosfato ? seguida pela libera??o do ADP, resultando na enzima na sua forma livre. Os resultados de calorimetria demonstraram uma grande diferen?a de calor gerada na associa??o da enzima livre aos seus ligantes, revelando assinaturas termodin?micas de intera??es n?o-covalentes para cada processo de liga??o. Estes resultados ajudaram a compreender melhor o modo de a??o da enzima MtSK e podem subsequentemente serem ?teis para guiar o desenho racional de inibidores relacionados a esta enzima e que possam ser avaliados posteriormente como anti-TB.application/pdfhttp://tede2.pucrs.br:80/tede2/retrieve/9113/430225.pdf.jpgporPontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do SulPrograma de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?dePUCRSBRFaculdade de MedicinaFARMACOLOGIABIOQU?MICABIOLOGIA MOLECULARENZIMASTUBERCULOSECNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINAA enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogasinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis7620745074616285884500600-8624664729441623247info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RSinstname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul (PUCRS)instacron:PUC_RSTHUMBNAIL430225.pdf.jpg430225.pdf.jpgimage/jpeg3583http://tede2.pucrs.br/tede2/bitstream/tede/1611/3/430225.pdf.jpg221fbf76c0d12a1d0f96a26fb915fcadMD53TEXT430225.pdf.txt430225.pdf.txttext/plain324177http://tede2.pucrs.br/tede2/bitstream/tede/1611/2/430225.pdf.txt77751f6aeed5fa70c51953f94be77b60MD52ORIGINAL430225.pdfapplication/pdf4266902http://tede2.pucrs.br/tede2/bitstream/tede/1611/1/430225.pdf4436e37d2d21598e8ed023afd34398a2MD51tede/16112015-04-17 17:04:42.438oai:tede2.pucrs.br:tede/1611Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://tede2.pucrs.br/tede2/PRIhttps://tede2.pucrs.br/oai/requestbiblioteca.central@pucrs.br||opendoar:2015-04-17T20:04:42Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS - Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul (PUCRS)false |
dc.title.por.fl_str_mv |
A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas |
title |
A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas |
spellingShingle |
A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas Rosado, Leonardo Astolfi FARMACOLOGIA BIOQU?MICA BIOLOGIA MOLECULAR ENZIMAS TUBERCULOSE CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA |
title_short |
A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas |
title_full |
A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas |
title_fullStr |
A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas |
title_full_unstemmed |
A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas |
title_sort |
A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas |
author |
Rosado, Leonardo Astolfi |
author_facet |
Rosado, Leonardo Astolfi |
author_role |
author |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Santos, Di?genes Santiago |
dc.contributor.advisor1ID.fl_str_mv |
CPF:18729258804 |
dc.contributor.advisor1Lattes.fl_str_mv |
http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4721461Z7 |
dc.contributor.authorID.fl_str_mv |
CPF:00808464086 |
dc.contributor.authorLattes.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/1805307635564032 |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Rosado, Leonardo Astolfi |
contributor_str_mv |
Santos, Di?genes Santiago |
dc.subject.por.fl_str_mv |
FARMACOLOGIA BIOQU?MICA BIOLOGIA MOLECULAR ENZIMAS TUBERCULOSE |
topic |
FARMACOLOGIA BIOQU?MICA BIOLOGIA MOLECULAR ENZIMAS TUBERCULOSE CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA |
dc.subject.cnpq.fl_str_mv |
CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA |
description |
A tuberculose prevalece como uma das principais causas de morte no mundo ocasionadas por um ?nico agente infeccioso, o Mycobacterium tuberculosis. A enzima Chiquimato Quinase (MtSK) codificada pelo gene aroK de M. tuberculosis, quinta enzima da via do chiquimato. catalisa a transfer?ncia de um grupo fosfato do ATP para o carbono 3 do grupo hidroxila do chiquimato, formando chiquimato-3-fosfato e ADP. A interrup??o do gene aroK demonstrou que a enzima MfSK ? essencial para a viabilidade do M. tuberculosis. Neste trabalho, apresentamos a purifica??o da enzima MtSK at? a homogeneidade, an?lise por espectrometria de massa, sequenciamento de amino?cidos da por??o N-Terminal, determina??o do estado oligom?rico da enzima em solu??o, cin?tica em estado estacion?rio, espectroscopia de fluoresc?ncia e calorimetria de titula??o isot?rmica. Os resultados encontrados sugerem que a rea??o catalisada pela enzima monom?rica MtSK segue um mecanismo em equil?brio-r?pido aleat?rio para a adi??o dos substratos e uma libera??o ordenada dos produtos, onde a libera??o do chiquimato-3-fosfato ? seguida pela libera??o do ADP, resultando na enzima na sua forma livre. Os resultados de calorimetria demonstraram uma grande diferen?a de calor gerada na associa??o da enzima livre aos seus ligantes, revelando assinaturas termodin?micas de intera??es n?o-covalentes para cada processo de liga??o. Estes resultados ajudaram a compreender melhor o modo de a??o da enzima MtSK e podem subsequentemente serem ?teis para guiar o desenho racional de inibidores relacionados a esta enzima e que possam ser avaliados posteriormente como anti-TB. |
publishDate |
2011 |
dc.date.available.fl_str_mv |
2011-03-29 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2011-02-23 |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2015-04-14T13:35:08Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/masterThesis |
format |
masterThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.citation.fl_str_mv |
ROSADO, Leonardo Astolfi. A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas. 2011. 181 f. Disserta??o (Mestrado em Medicina e Ci?ncias da Sa?de) - Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, 2011. |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/1611 |
identifier_str_mv |
ROSADO, Leonardo Astolfi. A enzima chiquimato quinase (EC 2.7.1.71) de Mycobacterium tuberculosis como alvo para o desenvolvimento de drogas. 2011. 181 f. Disserta??o (Mestrado em Medicina e Ci?ncias da Sa?de) - Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, 2011. |
url |
http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/1611 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.relation.program.fl_str_mv |
7620745074616285884 |
dc.relation.confidence.fl_str_mv |
500 600 |
dc.relation.department.fl_str_mv |
-8624664729441623247 |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.none.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul |
dc.publisher.program.fl_str_mv |
Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de |
dc.publisher.initials.fl_str_mv |
PUCRS |
dc.publisher.country.fl_str_mv |
BR |
dc.publisher.department.fl_str_mv |
Faculdade de Medicina |
publisher.none.fl_str_mv |
Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul (PUCRS) instacron:PUC_RS |
instname_str |
Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul (PUCRS) |
instacron_str |
PUC_RS |
institution |
PUC_RS |
reponame_str |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS |
collection |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS |
bitstream.url.fl_str_mv |
http://tede2.pucrs.br/tede2/bitstream/tede/1611/3/430225.pdf.jpg http://tede2.pucrs.br/tede2/bitstream/tede/1611/2/430225.pdf.txt http://tede2.pucrs.br/tede2/bitstream/tede/1611/1/430225.pdf |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
221fbf76c0d12a1d0f96a26fb915fcad 77751f6aeed5fa70c51953f94be77b60 4436e37d2d21598e8ed023afd34398a2 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS - Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul (PUCRS) |
repository.mail.fl_str_mv |
biblioteca.central@pucrs.br|| |
_version_ |
1796793182203150336 |