Efeito do ácido ascórbico sobre a sobrevivência e crescimento in vitro de folículos pré-antrais isolados caprinos
| Ano de defesa: | 2011 |
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| Autor(a) principal: | |
| Orientador(a): | |
| Banca de defesa: | |
| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=70413 |
Resumo: | O presente estudo teve como objetivo investigar a influência de duas concentrações de ácido ascórbico na sobrevivência, crescimento, formação antral e expressão de RNAm para a metaloproteinase da matriz-9 (MMP-9) e seu inibidor tecidual-2 (TIMP-2) em folículos ovarianos pré antrais caprinos (FOPA) durante cultivo de longa duração. FOPA isolados foram individualmente cultivados na ausência ou presença de ácido ascórbico nas concentrações de 50 µg/ml (AA50) ou 100 µg/ml (AA100) durante 18 dias. Os parâmetros avaliados foram viabilidade folicular, crescimento, formação de antro e extrusão oocitária. O RNAm para a MMP-9 e TIMP-2 foi quantificado por reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) após 18 dias de cultivo no meio controle (MEM+ ) ou adicionado de ácido ascórbico (50 ou 100 g/ml) e no controle fresco (não cultivado). No final do período de cultivo, AA50 aumentou significativamente o percentual de folículos viáveis quando comparado aos demais tratamentos. Além disso, a média de diâmetro folicular diário (µm/dia) foi significativamente superior na presença de ambas as concentrações de ácido ascórbico do que no MEM+ sozinho. Altas taxas de formação antral e baixas percentagens de oócitos extrusos foram observadas no meio contendo AA50 quando comparado ao meio controle. Os ensaios de qPCR em tempo real mostraram que o AA50 aumentou significativamente a expressão de RNAm para MMP-9 comparado com o controle fresco e o MEM+ sozinho. Em conclusão, o ácido ascórbico mantém a sobrevivência e estimula o desenvolvimento de FOPA caprinos após cultivo in vitro. Além disso, este antioxidante influenciou a expressão de RNAm para as enzimas MMP-9 e TIMP-2, envolvidas com o remodelamento da membrana basal. Palavras-chave: MMP-9. TIMP-2. Antioxidantes. qPCR. |
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Efeito do ácido ascórbico sobre a sobrevivência e crescimento in vitro de folículos pré-antrais isolados caprinosAntioxidante Caprino Ciências veterinárias Polimerase em Cadeia (PCR)O presente estudo teve como objetivo investigar a influência de duas concentrações de ácido ascórbico na sobrevivência, crescimento, formação antral e expressão de RNAm para a metaloproteinase da matriz-9 (MMP-9) e seu inibidor tecidual-2 (TIMP-2) em folículos ovarianos pré antrais caprinos (FOPA) durante cultivo de longa duração. FOPA isolados foram individualmente cultivados na ausência ou presença de ácido ascórbico nas concentrações de 50 µg/ml (AA50) ou 100 µg/ml (AA100) durante 18 dias. Os parâmetros avaliados foram viabilidade folicular, crescimento, formação de antro e extrusão oocitária. O RNAm para a MMP-9 e TIMP-2 foi quantificado por reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) após 18 dias de cultivo no meio controle (MEM+ ) ou adicionado de ácido ascórbico (50 ou 100 g/ml) e no controle fresco (não cultivado). No final do período de cultivo, AA50 aumentou significativamente o percentual de folículos viáveis quando comparado aos demais tratamentos. Além disso, a média de diâmetro folicular diário (µm/dia) foi significativamente superior na presença de ambas as concentrações de ácido ascórbico do que no MEM+ sozinho. Altas taxas de formação antral e baixas percentagens de oócitos extrusos foram observadas no meio contendo AA50 quando comparado ao meio controle. Os ensaios de qPCR em tempo real mostraram que o AA50 aumentou significativamente a expressão de RNAm para MMP-9 comparado com o controle fresco e o MEM+ sozinho. Em conclusão, o ácido ascórbico mantém a sobrevivência e estimula o desenvolvimento de FOPA caprinos após cultivo in vitro. Além disso, este antioxidante influenciou a expressão de RNAm para as enzimas MMP-9 e TIMP-2, envolvidas com o remodelamento da membrana basal. Palavras-chave: MMP-9. TIMP-2. Antioxidantes. qPCR.The present study aims to investigate the influence of two concentrations of ascorbic acid on the survival, growth, antral formation and mRNA expression of the matrix metalloproteinases-9 (MMP-9) and their tissue inhibitor-2 (TIMP-2) on caprine ovarian preantral follicles (FOPA) during long-term in vitro culture. Isolated preantral follicles were individually cultured without or with ascorbic acid at 50 µg/ml (AA50) or 100 µg/ml (AA100) during 18 days. The parameters evaluated were follicular viability, growth, antrum formation and extruded oocytes. The mRNA expression of the genes MMP-9 and TIMP-2 were quantified by real-time polymerase chain reaction (qPCR) after 18 days of culture in the control medium (MEM+ ) or ascorbic acid (50 or 100 g/ml) and in fresh control (non cultured). At the end of culture, AA50 significantly increased the percentage of viable follicles compared with other treatments. Moreover, mean daily increase in follicular diameter (µm/day) was significantly higher in the presence of both concentrations of ascorbic acid than in MEM+ alone. Higher rates of antral formation and lower percentages of extruded oocytes were observed in medium containing AA50 compared with control medium. qPCR assays showed that AA50 increases MMP-9 mRNA expression significantly compared with fresh control and MEM+ alone. In conclusion, ascorbic acid maintains the survival and stimulates the development of caprine FOPA after in vitro culture. In addition, this antioxidant has influenced the expression of mRNA for the enzymes MMP-9 and TIMP-2, involved in remodeling of the basement membrane. Keywords: MMP-9. TIMP-2. Antioxidants. qPCR.Universidade Estadual do CearáJose Ricardo de FigueiredoSilva, Gerlane Modesto da2012-02-28T00:00:00Z2011info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=70413info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UECEinstname:Universidade Estadual do Cearáinstacron:UECE2012-02-28T00:00:00Zoai:uece.br:70413Repositório InstitucionalPUBhttps://siduece.uece.br/siduece/api/oai/requestopendoar:2012-02-28T00:00Repositório Institucional da UECE - Universidade Estadual do Cearáfalse |
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