Avaliação da atividade anti-Leishmania do extrato hidroalcoólico e frações de Tephrosia cinerea (L.) Pers

• Ano de defesa: 2012
• Autor(a) principal: Bezerra, Jeamile Lima
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: UNIVERSIDADE FEDERAL DO MARANHÃO
• Palavras-chave em Português: Biotecnologia; Inflamação; Leishmanicida
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=74421

<div><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:11.9965pt;font-family:Times-Roman;color:rgb(0,0,0);">O gênero </span><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:11.9965pt;font-family:Times-Italic;color:rgb(0,0,0);font-style:italic;">Tephrosia</span><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:11.9965pt;font-family:Times-Roman;color:rgb(0,0,0);"> (Fabaceae), com cerca de 300 espécies, é amplamente distribuído nas </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">regiões tropicais e subtropicais, sendo trinta espécies nativas da América do Sul. Já foram </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">descritas para o gênero atividades inseticida, pesticida, anti-helmíntica, anticancerígena, </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">antiulcerogênica e anti-</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">Leishmania</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">. </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">Tephrosia cinerea</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> (L.) Pers, conhecida popularmente </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">como anil bravo, é um arbusto utilizado empiricamente no tratamento de infecções, </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">inflamações, úlceras, afecções nervosas e diarréias. O objetivo deste estudo foi avaliar o </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">extrato hidroalcoólico de </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">Tephrosia cinerea</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> quanto à atividade leishmanicida, em ensaios</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;"> in </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">vivo</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> e </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">in vitro</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">, analisando também a resposta inflamatória e a toxicidade aguda e crônica. </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">Extrato de folhas (EHT), vagem, flores e raízes foram obtidos por maceração com etanol 70% </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">e testados contra promastigotas de</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;"> Leishmania amazonensis</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">. Realizou-se fracionamento </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">biomonitorado do EHT através de técnicas de partição líquido-líquido e cromatografia em </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">coluna de sílica gel, resultando no isolamento de uma fração flavanoídica que exibiu atividade </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">expressiva com CI</span><span style="font-size: 8.03766pt; font-family: Times-Roman;">50</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> de 0.54, 3.36 e 4.96 </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: "Times New Roman";">µ</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">g/mL para</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;"> L. amazonensis, Leishmania chagasi</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> e </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">Leishmania braziliensis</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">, respectivamente. Tratamento </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">in vitro</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> com EHT (40 e 80 µg/mL) e a </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">fração flavonoídica (5 µg/mL) reduziu em 65, 74,5 e 69%, respectivamente, a infecção de </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">macrófagos por </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">L. amazonensis</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">. Em virtude da atividade expressiva, o ensaio </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">in vivo </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">foi </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">conduzido utilizando camundongos C57Bl/6 infectados no coxim plantar esquerdo com 5x10</span><span style="font-size: 8.03766pt; font-family: Times-Roman;">5 </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">de </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">L.amazonensis</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> e no 45º dia iniciamos o tratamento por via intralesional com a fração </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">flavonoídica (10mg/kg/dia) ou antimoniato de meglumina (28mg/kg/dia) ou solução </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">tamponada com fosfato (PBS, controle negativo). Os resultados do tratamento mostram </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">atividade leishmanicida </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">in vivo</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> de </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">T. cinerea</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">. Verificamos a redução significativa no tamanho </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">das patas do grupo tratado com fração flavonoídica em relação ao controle, indicando </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">regressão da lesão leishmaniótica. Dosagem sérica das citocinas IFN-</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: "Times New Roman";">&#947;</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">, IL-4 e IL-10 mostrou </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">elevação significativa na concentração de IFN-</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: "Times New Roman";">&#947;</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> apenas no grupo tratado com a fração </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">flavonoídica. A técnica de imunohistoquímica foi empregada para determinar a carga </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">parasitária do baço e lesão de pata, através da contagem direta das amastigotas nesses tecidos. </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">O resultado obtido revelou menor parasitemia no baço e lesão de pata de animais tratados com </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">a fração flavonoídica em relação ao controle negativo, sendo que, em relação ao antimoniato </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">de meglumina, observamos menor carga parasitária somente no baço. O efeito </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">antiinflamatório de EHT foi evidenciado em modelos clássicos de inflamação. Tratamento </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">com EHT na dose de 100mg/Kg inibiu o edema de pata, sendo esta inibição mais expressiva </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">na 3ª hora. No modelo de peritonite por corpo estranho, o tratamento reduziu </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">significativamente a contagem de  neutrófilos. O tratamento diário com 10, 100 e 250 mg/kg </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">de EHT reduziu significativamente o granuloma induzido por corpo estranho. A contagem </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">diferencial do granuloma revelou aumento de macrófagos e diminuição dos neutrófilos, </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">sugerindo uma modulação da inflamação. Em relação à avaliação toxicológica, não se </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">observou morte e nem tampouco alterações macroscópicas ou microscópicas nos órgãos vitais </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">nos animais tratados com </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">T. cinerea, </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">sugerindo segurança no uso da espécie. Após a análise </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">dos resultados obtidos, foi proposta formulação farmacêutica contendo extrato e/ou frações </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">ativas das folhas de </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">Tephrosia cinerea</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> e uso no tratamento da lesão leishmaniótica, </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">permitindo o depósito de patente junto ao Instituto Nacional de Propriedade Intelectual, sob nº </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">080, em 18 de outubro de 2011. </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">Palavras-chave: </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">Tephrosia cinerea</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;">. </span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Italic; font-style: italic;">Leishmania amazonensis.</span><span style="font-size: 11.9965pt; font-family: Times-Roman;"> Atividade leishmanicida. </span><span style="font-family: Times-Roman; font-size: 11.9965pt;">Inflamação. Avaliação toxicológica.   </span></div>