Caracterização das proteínas coesina e condensina do protozoário Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909)

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Shimada, Márcia Kiyoe
• Orientador(a): Fragoso, Stênio Perdigão [Orientador]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Tripanossama cruzi; Genética; Recombinação (Genética); Cromatina; Proteínas celulares; Microbial genetics; Single cell proteins
• Link de acesso: https://repositorio.uel.br/handle/123456789/11345

Resumo: As proteínas coesina e condensina pertencem à familia das proteínas de manutenção estrutural dos cromossomos (do inglês, Structural Maintenance Chromosome, SMC), altamente conservadas desde leveduras até humanos Essas proteínas executam importantes funções no processo de divisão celular, uma vez que elas estão envolvidas na condensação cromossômica e na coesão das cromátides irmãs durante o processo de divisão celular Nós identificamos os ortólogos dessas proteínas no protozoário Trypanosoma cruzi Dm28c Esteparasita apresenta algumas características peculiares como limitada condensaçãocromossômica e a manutenção da integridade do envelope nuclear durante a divisão celularIsso o torna um modelo interessante para o estudo das funções das SMCs Os genes que codificam duas, das coesinas (SMC1 and Scc1) e duas, das condensinas (SMC4 and Cap-D2) foram caracterizados tanto por Southern e Northern blots quanto por análise in silico Os dados mostram que TcSMC1, TcScc1, TcSMC4 e TcCap-D2 são genes de cópia-única nogenoma do T cruzi Dm28c e são transcritos em mRNAs O alinhamento das sequências deaminoácidos deduzidas a partir dos genes das SMCs de T cruzi, T brucei, L major, X laevis,C elegans, H sapiens, S pombe e S cerevisiae mostrou que os motivos conservados dessasproteínas estão presentes em todos os organismos mencionados acima, sugerindo que suasestruturas foram conservadas durante a evolução, as quais são importantes para sua atividadede ATPase e de interações com DNA Pela imunofluorescência, as SMCs estão localizadas nonúcleo Além disso, a análise do perfil de expressão por Western blot mostrou que as SMCs estão expressas nas formas epimastigotas e tripomstigotas para as condensinas Cap-D2 eSMC4 Enquanto as coesinas SMC1 e Scc1 somente foram detectadas no estágio epimastigota, sugerindo que essas proteínas são importantes para a replicação e não para adiferenciação do parasita Esses dados também levantam a hipótese de que essas proteínas possam participar da regulação funcional da cromatina modulando sua organização espacialno núcleo e, consequentemente, modulando a expressão gênica do parasita