Alternativas à colchicina na produção de linhagens duplo haploides em milho branco tropical

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Fregonezi, Bruno Figueiró
• Orientador(a): Ferreira, Josué Maldonado
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Zea mays; Amiprofos metil; Indutores de haploidia; Pronamide; Duplicação espontânea; Agronomia; Milho doce - Duplicação cromossômica - Colchicina; Milho (Zea mayz) - Duplicação cromossômica - Colchicina; Milho branco tropical - Duplicação cromossômica espontânea
• Área do conhecimento CNPq: Ciências Agrárias - Agronomia
• Link de acesso: https://repositorio.uel.br/handle/123456789/17974

A colchicina é uma substância amplamente utilizada e eficaz para a duplicação cromossômica de haploides e obtenção de linhagens de milho, porém é altamente toxica ao ser humano e meio ambiente, exigindo cuidados extremos no manuseio e descarte. Assim, é importante identificar substâncias alternativas em substituição ao uso da colchicina, que ofereçam menores riscos e que apresentem eficácia semelhante. Outra alternativa seria a identificação de populações doadoras com elevadas taxas de duplicação espontânea. Um dos fatores mais importantes para o sucesso da produção de linhagens duplo haploides é o uso de indutores de haploidia adaptados e com altas taxas de indução. Dessa forma, os objetivos foram: determinar a eficácia do uso de soluções de pronamide e Amiprofos methyl (APM), em substituição à cochicina, na duplicação cromossômica via imersão de raízes de plântulas; identificar o potencial de duplicação cromossômica espontânea de populações de milho branco tropical; comparar as taxas de indução a haploidia de três linhagens indutoras tropicalizadas desenvolvidas pelo Centro internacional de Melhoramento de Milho e Trigo (CIM2GTAIL-P1, CIM2GTAIL-P2 e CIM2GTAIL-P3) e suas três combinações híbridas em cruzamento com milho branco tropical. Oito populações de milho branco foram polinizadas por estes seis genótipos indutores gimnogenéticos. As sementes F1’s foram classificadas em haploides e diploides, pela expressão do gene R1-nj, e estimadas as taxas de indução à haploidia. As sementes haploides putativas (SHP), de cada população, foram semeadas em bandejas contendo substrato turfa sphagnum. As plântulas haploides foram conduzidas ao estádio V2, quando tiveram suas raízes lavadas em água corrente e imersas em diferentes soluções, constituindo quatro tratamentos de duplicação cromossômica: apenas água filtrada, como controle negativo; colchicina; pronamide; APM+pronamide. Durante o experimento foram contabilizados os números de SHP’s utilizados; sementes germinadas; plântulas submetidas aos tratamentos; plântulas tratadas e transplantadas para vasos; plantas D0 sobreviventes até a fase de polinização; plantas D0 polinizadas; plantas D0 que produziram sementes D1; plantas macho-estéreis. Estas contagens foram utilizadas para estimar as taxas de autofecundação, eficiência da autofecundação, sobrevivência, reprodução e sucesso geral. Para análise da quantidade de sementes oriundas de plantas férteis D0, as espigas com sementes D1 foram categorizadas em cinco classes de acordo com o número de sementes por espiga. A combinação hibrida CIM2GTAIL-P1 x CIM2GTAIL-P2 apresentou maior taxa de indução média para as populações de milho branco tropical utilizadas, superando o desempenho das linhagens per-se. As populações estudadas apresentaram taxas duplicação cromossômica espontânea entre 7,9% a 38,3%. Em média o sucesso do tratamento APM+pronamide não diferiu da colchicina e é apresenta como alternativa eficaz na produção de linhagens duplo haploides em milho branco tropical