Padronização de multiplex-PCR para detecção de Escherichia coli diarreiogênica e atividade antibacteriana de compostos naturais em leite bovino

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Nandi, Renata Daniela Saldanha
• Orientador(a): Nakazato, Gerson [Orientador]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Leite; Microbiologia; Agentes antibacterianos; Produtos naturais; Escherichia coli; Milk; Antibacterial agents; Natural products; Polymerase chain reaction; Micro-organisms
• Link de acesso: https://repositorio.uel.br/handle/123456789/10055

Resumo: O leite bovino é um alimento rico em nutrientes consumido mundialmente, e é utilizado como matéria-prima para produção de diversos produtos lácteos com o envolvimento de microrganismos, dentre eles as bactérias ácido láticas (LAB), que são as principais utilizadas Esses alimentos são submetidos à diversas etapas de fabricação, onde sofrem a interferência de contaminantes biológicos, incluindo Escherichia coli e Staphylococcus aureus, afetando a qualidade do alimento Esses microrganismos são importantes contaminantes, devido sua capacidade de causar infecções e intoxicações no homem O objetivo deste estudo foi padronizar um sistema de Reação em Cadeia da Polimerase – multiplex (multiplex-PCR) para detecção de Escherichia coli diarreiogênica (DEC) em leite bovino, e avaliar a ação antibacteriana do óleo essencial de orégano (OEO) e de três tipos de méis (Scaptotrigona postica – SP, Scaptotrigona bipunctata - SB e Apis mellifera - Apis) contra LAB, E coli e S aureus Para a padronização da multiplex-PCR foram utilizados os iniciadores stx2 e elt para detecçao de E coli produtora de Shiga-toxina (STEC) e E coli enterotoxigênica (ETEC), respectivamente As quantidades celulares testadas foram 11 a 19 UFC mL-1 de leite “Ultra-High-Temperature” (UHT) e leite pasteurizado, ambos desnatados O sistema de multiplex-PCR utilizado demonstrou detecção de E coli a 19 UFC mL-1, tanto para o leite UHT quanto para o leite pasteurizado Esses resultados indicam que a multiplex-PCR pode ser utilizada para detecção de E coli dirreiogênica no leite, porém em uma concentração bacteriana acima de 19 UFC mL-1 Para avaliar a ação antibacteriana do OEO e dos méis, foram determinadas a concentração inibitória mínima (MIC), a concentração bactericida mínima (MBC) e atividade antibacteriana das bacteriocinas produzidas por LAB Os testes realizados para os compostos naturais demonstraram importante atividade antibacteriana do OEO e dos méis SP e SB Foi possível notar que o OEO apresenta uma ação antibacteriana mais potente que os méis No entanto, essa ação antibacteriana é similar para as LAB e para os microrganismos patogênicos, indicando que o uso desses compostos em produtos lácteos fermentados deve ser controlada Não foi possível detectar a MIC do mel Apis Não foi possivel determinar a atividade antibacteriana das bacteriocinas Dessa forma, o uso de OEO e méis de abelhas indígenas sem ferrão (SP e SB) são interessantes como antimicrobianos naturais para solucionar as contaminações microbianas no leite