Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2024
Autor(a) principal: Martins, Guilherme Felippelli
Orientador(a): Vidotto, Odilon [Orientador]
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://repositorio.uel.br/handle/123456789/15460
Resumo: Resumo: A coccidiose aviária é uma doença parasitária causada por protozoários do Filo Apicomplexa, do gênero Eimeria Diversos antígenos recombinantes vem sendo testados em vacinas sob condições experimentais apresentando resultados promissores A HSP7 é uma proteína que apresenta múltiplas funções em diversas fases do ciclo de vida deste parasito sendo considerada por diversos autores como promissora para utilização como imunógeno devido ao seu potencial imunogênico Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo produzir a proteína recombinante rHSP7 de E tenella, e avaliar a sua proteção contra desafio homólogo em frangos de corte O segmento de DNA, da proteína HSP7 foi obtido pela técnica de PCR utilizando primers específicos para o gene total Estes segmentos foram incorporados ao vetor de expressão de proteínas pTrcHis2 (Invitrogen) para produção dos plasmídeos recombinantes e posteriormente inseridos em E coli TOP1 competente quimicamente para obtenção e purificação das proteínas recombinantes Foram utilizadas 8 aves, não vacinadas contra coccidiose, distribuídas em quatro tratamentos: G1 - rHSP7 mais toxina colérica (n=2); G2 – soro albumina bovina e toxina colérica (n=2), G3 – somente PBS (controle positivo, n=2) e G4 - somente PBS (controle negativo, n=2) Os tratamentos foram executados por via ocular aos dias 7 e 14 do experimento No dia 21, todos os tratamentos foram desafiados com 5x14 oocistos esporulados de E tenella Foram avaliados o ganho de peso, conversão alimentar, eliminação de oocistos, fecundidade e anticorpos anti-rHSP7 A expressão do gene hsp7 permitiu a produção de uma proteína rHSP7 de aproximadamente 23kDa Quanto ao ganho de peso G1 apresentou um aumento de 2,7% em relação a G4, enquanto G3 apresentou redução de 2,22% neste parâmetro A titulação de anticorpos demonstrou uma intensa resposta humoral em G1 no pós-desafio Apesar da maior eliminação de oocistos em G1, não foram observadas diferenças estatísticas significantes entre os grupos desafiados (p=,162) Da mesma forma não foi observado diferença estatística entre os grupos desafiados no quesito escore de lesão (p=,137) Os tratamentos não promoveram a melhora nos parâmetros estudados à exceção dos níveis de anticorpos que mostraram altos títulos pós desafio, sugerindo tal proteína como promotora da imunidade humoral
id UEL_e048caa425ee84e69b75ddf8641787b9
oai_identifier_str oai:repositorio.uel.br:123456789/15460
network_acronym_str UEL
network_name_str Repositório Institucional da UEL
repository_id_str
spelling Martins, Guilherme FelippelliGarcia, João Luiscef477f3-150b-4c71-ab28-9c65d1ef6b69-1Guimarães Junior, José da Silvab70fb1ab-c9a9-4908-9092-2a3d8c431432-1Bogado, Alexey L. G.3db8f08c-48fc-40a8-b7cd-9d05de2e16ec-1Pereira, Ademir Benedito da Luzf6e23f0f-7efb-49c5-a017-2cdf3f19d583-176b973b8-7516-4837-b470-e683beef58495fe6bef6-84ee-4509-835f-8fd710f15245Vidotto, Odilon [Orientador]Londrina2024-05-01T14:49:25Z2024-05-01T14:49:25Z2015.0010.04.2015https://repositorio.uel.br/handle/123456789/15460Resumo: A coccidiose aviária é uma doença parasitária causada por protozoários do Filo Apicomplexa, do gênero Eimeria Diversos antígenos recombinantes vem sendo testados em vacinas sob condições experimentais apresentando resultados promissores A HSP7 é uma proteína que apresenta múltiplas funções em diversas fases do ciclo de vida deste parasito sendo considerada por diversos autores como promissora para utilização como imunógeno devido ao seu potencial imunogênico Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo produzir a proteína recombinante rHSP7 de E tenella, e avaliar a sua proteção contra desafio homólogo em frangos de corte O segmento de DNA, da proteína HSP7 foi obtido pela técnica de PCR utilizando primers específicos para o gene total Estes segmentos foram incorporados ao vetor de expressão de proteínas pTrcHis2 (Invitrogen) para produção dos plasmídeos recombinantes e posteriormente inseridos em E coli TOP1 competente quimicamente para obtenção e purificação das proteínas recombinantes Foram utilizadas 8 aves, não vacinadas contra coccidiose, distribuídas em quatro tratamentos: G1 - rHSP7 mais toxina colérica (n=2); G2 – soro albumina bovina e toxina colérica (n=2), G3 – somente PBS (controle positivo, n=2) e G4 - somente PBS (controle negativo, n=2) Os tratamentos foram executados por via ocular aos dias 7 e 14 do experimento No dia 21, todos os tratamentos foram desafiados com 5x14 oocistos esporulados de E tenella Foram avaliados o ganho de peso, conversão alimentar, eliminação de oocistos, fecundidade e anticorpos anti-rHSP7 A expressão do gene hsp7 permitiu a produção de uma proteína rHSP7 de aproximadamente 23kDa Quanto ao ganho de peso G1 apresentou um aumento de 2,7% em relação a G4, enquanto G3 apresentou redução de 2,22% neste parâmetro A titulação de anticorpos demonstrou uma intensa resposta humoral em G1 no pós-desafio Apesar da maior eliminação de oocistos em G1, não foram observadas diferenças estatísticas significantes entre os grupos desafiados (p=,162) Da mesma forma não foi observado diferença estatística entre os grupos desafiados no quesito escore de lesão (p=,137) Os tratamentos não promoveram a melhora nos parâmetros estudados à exceção dos níveis de anticorpos que mostraram altos títulos pós desafio, sugerindo tal proteína como promotora da imunidade humoralTese (Doutorado em Ciência Animal) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciência AnimalAbstract: Avian coccidiosis is a parasitic disease caused by protozoa of the Phylum Apicomplexa, genus Eimeria Several recombinant antigens in vaccines are being tested under experimental conditions shown promising results HSP7 is a protein that has the multiple functions at various stages of the life cycle of this parasite is considered by many authors as promising for use as an immunogen because of its immunogenic potential Thus, this study aimed to produce the recombinant protein of E tenella rHSP7, and assess their protection against homologous challenge in broilers The DNA segment, HSP7 protein was obtained by PCR using primers specific for the full gene These segments were incorporated into pTrcHis2 protein expression vector (Invitrogen) for production of recombinant plasmids and then inserted into E coli TOP1 chemically competent for collection and purification of recombinant proteins We used 8 birds not vaccinated against coccidiosis, distributed in four treatments: G1 - rHSP7 more cholera toxin (n = 2); G2 - bovine serum albumin, and cholera toxin (n = 2), G3 - PBS only (positive control, n = 2) and G4 - PBS only (negative control, n = 2) The treatments were performed by ocular route at days 7 and 14 of the experiment On day 21, all treatments were challenged with 5x14 sporulated oocysts of E tenella We evaluated weight gain, feed conversion, elimination of oocysts, fertility and anti-rHSP7 antibodies The expression of the hsp7 gene allowed the production of a protein of approximately 23kDa rHSP7 As for the weight gain G1 increased by 27% compared to G4, while G3 declined by 222% in this parameter The antibody titration showed a strong humoral response G1 post-challenge Despite the increased elimination of oocysts in G1, there were no statistically significant differences between the challenged groups (p=,162) Similarly was not statistical difference between the challenged groups in the item injury score (p=,137) The treatments did not promote the improvement in the parameters studied except for levels of antibodies that showed high post-competition titles, suggesting this protein as a promoter of humoral immunityporCoccidiose em aveFrango de corteDoençasEimeriaFrango de corteDiseasesImmunologyVeterinary vaccinesBroilers (Poultry)Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocularinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisDoutoradoCiência AnimalCentro de Ciências AgráriasPrograma de Pós-graduação em Ciência Animal-1-1reponame:Repositório Institucional da UELinstname:Universidade Estadual de Londrina (UEL)instacron:UELinfo:eu-repo/semantics/openAccess176638vtls000201492SIMvtls000201492http://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls00020149264.00SIMhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls0002014923894.pdf123456789/301 - Doutorado - Ciência AnimalORIGINAL3894.pdfapplication/pdf1417863https://repositorio.uel.br/bitstreams/e09d3f93-82cb-4baa-b713-c03d7f986a76/download80b84218e06a7ed281adbd4eda064b04MD51LICENCElicence.txttext/plain263https://repositorio.uel.br/bitstreams/df84e313-dc2d-4eda-b47f-4da9001bf121/download753f376dfdbc064b559839be95ac5523MD52TEXT3894.pdf.txt3894.pdf.txtExtracted texttext/plain153024https://repositorio.uel.br/bitstreams/55852bc3-bdae-4e7d-b4da-55a16ff7975a/download8fcea8f3d702f3121ab1f839412d17d9MD53THUMBNAIL3894.pdf.jpg3894.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3848https://repositorio.uel.br/bitstreams/bb662bc5-4b99-4074-9599-097db1707efa/download437a3af4a640e513c4c1037452c78064MD54123456789/154602024-07-12 01:19:54.627open.accessoai:repositorio.uel.br:123456789/15460https://repositorio.uel.brBiblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.bibliotecadigital.uel.br/PUBhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/OAI/oai2.phpbcuel@uel.br||opendoar:2024-07-12T04:19:54Repositório Institucional da UEL - Universidade Estadual de Londrina (UEL)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular
title Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular
spellingShingle Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular
Martins, Guilherme Felippelli
Coccidiose em ave
Frango de corte
Doenças
Eimeria
Frango de corte
Diseases
Immunology
Veterinary vaccines
Broilers (Poultry)
title_short Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular
title_full Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular
title_fullStr Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular
title_full_unstemmed Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular
title_sort Avaliação da imunogenicidade da proteína rHSP70 de Eimeria tenella em frangos de corte por via ocular
author Martins, Guilherme Felippelli
author_facet Martins, Guilherme Felippelli
author_role author
dc.contributor.banca.pt_BR.fl_str_mv Garcia, João Luis
Guimarães Junior, José da Silva
Bogado, Alexey L. G.
Pereira, Ademir Benedito da Luz
dc.contributor.author.fl_str_mv Martins, Guilherme Felippelli
dc.contributor.authorID.fl_str_mv 76b973b8-7516-4837-b470-e683beef5849
dc.contributor.advisor1ID.fl_str_mv 5fe6bef6-84ee-4509-835f-8fd710f15245
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Vidotto, Odilon [Orientador]
contributor_str_mv Vidotto, Odilon [Orientador]
dc.subject.por.fl_str_mv Coccidiose em ave
Frango de corte
Doenças
Eimeria
Frango de corte
Diseases
Immunology
Veterinary vaccines
Broilers (Poultry)
topic Coccidiose em ave
Frango de corte
Doenças
Eimeria
Frango de corte
Diseases
Immunology
Veterinary vaccines
Broilers (Poultry)
description Resumo: A coccidiose aviária é uma doença parasitária causada por protozoários do Filo Apicomplexa, do gênero Eimeria Diversos antígenos recombinantes vem sendo testados em vacinas sob condições experimentais apresentando resultados promissores A HSP7 é uma proteína que apresenta múltiplas funções em diversas fases do ciclo de vida deste parasito sendo considerada por diversos autores como promissora para utilização como imunógeno devido ao seu potencial imunogênico Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo produzir a proteína recombinante rHSP7 de E tenella, e avaliar a sua proteção contra desafio homólogo em frangos de corte O segmento de DNA, da proteína HSP7 foi obtido pela técnica de PCR utilizando primers específicos para o gene total Estes segmentos foram incorporados ao vetor de expressão de proteínas pTrcHis2 (Invitrogen) para produção dos plasmídeos recombinantes e posteriormente inseridos em E coli TOP1 competente quimicamente para obtenção e purificação das proteínas recombinantes Foram utilizadas 8 aves, não vacinadas contra coccidiose, distribuídas em quatro tratamentos: G1 - rHSP7 mais toxina colérica (n=2); G2 – soro albumina bovina e toxina colérica (n=2), G3 – somente PBS (controle positivo, n=2) e G4 - somente PBS (controle negativo, n=2) Os tratamentos foram executados por via ocular aos dias 7 e 14 do experimento No dia 21, todos os tratamentos foram desafiados com 5x14 oocistos esporulados de E tenella Foram avaliados o ganho de peso, conversão alimentar, eliminação de oocistos, fecundidade e anticorpos anti-rHSP7 A expressão do gene hsp7 permitiu a produção de uma proteína rHSP7 de aproximadamente 23kDa Quanto ao ganho de peso G1 apresentou um aumento de 2,7% em relação a G4, enquanto G3 apresentou redução de 2,22% neste parâmetro A titulação de anticorpos demonstrou uma intensa resposta humoral em G1 no pós-desafio Apesar da maior eliminação de oocistos em G1, não foram observadas diferenças estatísticas significantes entre os grupos desafiados (p=,162) Da mesma forma não foi observado diferença estatística entre os grupos desafiados no quesito escore de lesão (p=,137) Os tratamentos não promoveram a melhora nos parâmetros estudados à exceção dos níveis de anticorpos que mostraram altos títulos pós desafio, sugerindo tal proteína como promotora da imunidade humoral
publishDate 2024
dc.date.defesa.pt_BR.fl_str_mv 10.04.2015
dc.date.created.fl_str_mv 2015.00
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2024-05-01T14:49:25Z
dc.date.available.fl_str_mv 2024-05-01T14:49:25Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://repositorio.uel.br/handle/123456789/15460
url https://repositorio.uel.br/handle/123456789/15460
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.confidence.fl_str_mv -1
-1
dc.relation.coursedegree.pt_BR.fl_str_mv Doutorado
dc.relation.coursename.pt_BR.fl_str_mv Ciência Animal
dc.relation.departament.pt_BR.fl_str_mv Centro de Ciências Agrárias
dc.relation.ppgname.pt_BR.fl_str_mv Programa de Pós-graduação em Ciência Animal
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.coverage.spatial.pt_BR.fl_str_mv Londrina
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UEL
instname:Universidade Estadual de Londrina (UEL)
instacron:UEL
instname_str Universidade Estadual de Londrina (UEL)
instacron_str UEL
institution UEL
reponame_str Repositório Institucional da UEL
collection Repositório Institucional da UEL
bitstream.url.fl_str_mv https://repositorio.uel.br/bitstreams/e09d3f93-82cb-4baa-b713-c03d7f986a76/download
https://repositorio.uel.br/bitstreams/df84e313-dc2d-4eda-b47f-4da9001bf121/download
https://repositorio.uel.br/bitstreams/55852bc3-bdae-4e7d-b4da-55a16ff7975a/download
https://repositorio.uel.br/bitstreams/bb662bc5-4b99-4074-9599-097db1707efa/download
bitstream.checksum.fl_str_mv 80b84218e06a7ed281adbd4eda064b04
753f376dfdbc064b559839be95ac5523
8fcea8f3d702f3121ab1f839412d17d9
437a3af4a640e513c4c1037452c78064
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UEL - Universidade Estadual de Londrina (UEL)
repository.mail.fl_str_mv bcuel@uel.br||
_version_ 1862739651896279040