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Caracterização de plugs (bioscaffolds) de fibrina rica em plaquetas e leucócitos (L-PRF) obtidos a partir de um dispositivo experimental para aplicação em regeneração de defeitos ósseos

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2025
Autor(a) principal: Silva, Joanilda Paolla Raimundo e lattes
Orientador(a): Costa, Edja Maria Melo de Brito lattes
Banca de defesa: Costa, Edja Maria Melo de Brito, Formiga Filho, Amaro Lafayette Nobre, Firmino, Ramon Targino, Pereira, Jozinete Vieira, Nonaka, Cassiano Francisco Weege
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso embargado
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Estadual da Paraíba
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Odontologia - PPGO
Departamento: Pró-Reitoria de Pós-Graduação e Pesquisa - PRPGP
País: BR
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: https://repositorio.uepb.edu.br/handle/123456789/72014
Resumo: Regenerative therapies based on autologous sources, such as leukocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF) plugs, represent effective and low-cost alternatives for guided bone regeneration (GBR). This study aimed to characterize L-PRF plugs obtained from a commercial device (Plugs A) and from a new device developed in this work (Plugs B), produced by additive manufacturing using stereolithography. The plugs were prepared from blood samples collected from volunteers and immediately centrifuged at 700 g for 8 minutes. The plugs were compared in terms of macroscopic features, biological composition and organization, biodegradation, microstructure, and quantification and release of TGF-β, through histological, immunohistochemical, microstructural analyses, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The plugs were processed for hematoxylin-eosin (HE) staining. For immunohistochemical analysis, the immunoperoxidase method with dextran polymer-based technique was used, employing CD61 and TGF-β antibodies. Slides were digitized using the MoticEasyScan Pro 6 system and analyzed with DSAssistant software. Microstructural organization and biological content were examined by scanning electron microscopy (SEM). TGF-β release was quantified by ELISA at 1, 3, 7, and 14 days. Plugs B exhibited more standardized organization and greater resistance to biodegradation, with platelet concentration at the buffy coat region, along the edges, and formation of platelet aggregates in the central region. All plugs showed platelet immunostaining, with differences in distribution between Plugs A and B. Plugs B showed a significant increase in TGF-β expression at day 7. Microstructural evaluation of Plug B revealed numerous cells and platelets with preserved morphology, surrounded by a mature and organized fibrin network. In Plug A, a reduced number of cells and platelets were observed, along with loss of integrity in the fibrin network. Considering its three-dimensional configuration and cellular content, Plug B can be regarded as a bioscaffold with potential to stimulate and guide new bone formation in bone defects. The results provide a basis for future in vivo studies to evaluate the regenerative capacity of L-PRF plugs produced with the new device.
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The plugs were prepared from blood samples collected from volunteers and immediately centrifuged at 700 g for 8 minutes. The plugs were compared in terms of macroscopic features, biological composition and organization, biodegradation, microstructure, and quantification and release of TGF-β, through histological, immunohistochemical, microstructural analyses, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The plugs were processed for hematoxylin-eosin (HE) staining. For immunohistochemical analysis, the immunoperoxidase method with dextran polymer-based technique was used, employing CD61 and TGF-β antibodies. Slides were digitized using the MoticEasyScan Pro 6 system and analyzed with DSAssistant software. Microstructural organization and biological content were examined by scanning electron microscopy (SEM). TGF-β release was quantified by ELISA at 1, 3, 7, and 14 days. Plugs B exhibited more standardized organization and greater resistance to biodegradation, with platelet concentration at the buffy coat region, along the edges, and formation of platelet aggregates in the central region. All plugs showed platelet immunostaining, with differences in distribution between Plugs A and B. Plugs B showed a significant increase in TGF-β expression at day 7. Microstructural evaluation of Plug B revealed numerous cells and platelets with preserved morphology, surrounded by a mature and organized fibrin network. In Plug A, a reduced number of cells and platelets were observed, along with loss of integrity in the fibrin network. Considering its three-dimensional configuration and cellular content, Plug B can be regarded as a bioscaffold with potential to stimulate and guide new bone formation in bone defects. The results provide a basis for future in vivo studies to evaluate the regenerative capacity of L-PRF plugs produced with the new device.As terapias regenerativas baseadas em fontes autólogas, como os plugs de fibrina rica em plaquetas e leucócitos (L-PRF), configuram-se como alternativas eficazes e de baixo custo para a regeneração óssea guiada (ROG). Este estudo teve como objetivo caracterizar plugs de L-PRF obtidos de um dispositivo comercial (Plugs A) e de um novo dispositivo desenvolvido neste trabalho (Plugs B), produzido por manufatura aditiva por meio da técnica de estereolitografia. Os plugs foram produzidos a partir de amostras de sangue de voluntários, submetidas à centrifugação imediata a 700 g por 8 minutos. Os plugs foram comparados quanto à macroscopia, composição e organização biológica, biodegradação, microestrutura, além da quantificação e liberação de TGF-β, por meio de análises histológicas, imuno-histoquímicas, microestruturais e de bioensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA). Os plugs foram processados para coloração em hematoxilina-eosina (HE). Para a análise imuno-histoquímica, empregou-se o método da imunoperoxidase com técnica baseada em polímeros de dextrano, utilizando os anticorpos CD61 e TGF-β. As lâminas foram digitalizadas pelo sistema MoticEasyScan Pro 6 e analisadas com o software DSAssistant. A organização microestrutural e o conteúdo biológico foram examinados por meio da microscopia eletrônica de varredura (MEV). A liberação de TGF-β foi quantificada por ELISA nos intervalos de 1, 3, 7 e 14 dias. Os plugs B apresentaram uma organização mais padronizada e maior resistência a biodegradação, com concentração de plaquetas na região do buffy coat, nas bordas e formação de agregados de plaquetas na região central. Todos os plugs apresentaram imunomarcação para plaquetas, com diferenças na distribuição entre os plugs A e B. Os plugs B apresentaram um aumento significativo na expressão de TGF-β no período de 7 dias. A avaliação da microestrutura do plug B revelou inúmeras células e plaquetas com morfologia preservada, envoltas por uma rede de fibrina madura e organizada. No plug A, observou-se uma quantidade reduzida de células e plaquetas, além de perda de integridade na rede de fibrina. Considerando a configuração tridimensional e o conteúdo celular, o plug B pode ser considerado um bioscaffold, com potencial para estimular e direcionar a neoformação óssea em defeitos ósseos. Os resultados obtidos fornecem subsídios para futuros estudos in vivo, visando avaliar a capacidade regenerativa dos plugs de L-PRF produzidos com o novo dispositivo.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESapplication/pdfUniversidade Estadual da ParaíbaPrograma de Pós-Graduação em Odontologia - PPGOUEPBBRPró-Reitoria de Pós-Graduação e Pesquisa - PRPGPPró-Reitoria de Pós-Graduação e Pesquisa - PRPGPODONTOLOGIAL-PRFSuporte de tecidosEngenharia tecidualAlvéolo dentalCaracterização de plugs (bioscaffolds) de fibrina rica em plaquetas e leucócitos (L-PRF) obtidos a partir de um dispositivo experimental para aplicação em regeneração de defeitos ósseosCharacterization of the vegetal drug of Schinopsis brasiliensis and prospection of the anti-inflammatory activity of the infusioninfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisCosta, Edja Maria Melo de BritoFormiga Filho, Amaro Lafayette NobreFirmino, Ramon TarginoPereira, Jozinete VieiraNonaka, Cassiano Francisco WeegeCosta, Edja Maria Melo de Britohttp://lattes.cnpq.br/0192415370217147https://lattes.cnpq.br/8682878035567720Silva, Joanilda Paolla Raimundo einfo:eu-repo/semantics/embargoedAccessporreponame:Repositório Institucional da Universidade Estadual da Paraíba (UEPB)instname:Universidade Estadual da Paraíba (UEPB)instacron:UEPBTHUMBNAILTS - Joanilda Paolla Raimundo e Silva.pdf.jpgTS - Joanilda Paolla Raimundo e Silva.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3516https://repositorio.uepb.edu.br/bitstreams/97e42783-fc23-4470-b52e-e832ba0d9e1c/downloaddd361d4e8fb39c87c4381450d0519a0fMD56falseAnonymousREAD2026-08-21Termo de depósito BDTD.pdf.jpgTermo de depósito BDTD.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg4515https://repositorio.uepb.edu.br/bitstreams/426b8170-d66e-4076-8c72-162a9d87cbf7/downloadfb8e964b870ca0695c0142e5c02de272MD57falseAdministratorREAD2999-12-31LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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