Atividade de Glutationa Peroxidase em frações mitocondriais e microssomais hepáticas de pacu, Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887)

• Ano de defesa: 2010
• Autor(a) principal: Moes, Artur Pedro do Carmo
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade do Estado do Rio de Janeiro; Centro Biomédico::Instituto de Biologia Roberto Alcantara Gomes; BR; UERJ; Programa de Pós-Graduação em Biociências
• Palavras-chave em Português: Enzyme; Oxidative stress; ROS; GPX; Enzimas; Estresse Oxidante; ERO; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA
• Link de acesso: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/16298

Íon superóxido (O2˚ˉ), radical hidroxila (.OH) e o peróxido de hidrogênio (H2O2), três tipos de espécies reativas de oxigênio (ERO), tendem a aumentar nas células quando ocorre redução da tensão de oxigênio ou quando ocorre isquemia seguida de reperfusão. Se as quantidades destas espécies químicas altamente reativas não forem mantidas abaixo de certo limite, acontece o estresse oxidante, que impedirá o correto funcionamento bioquímico de macromoléculas, podendo sobrevir morte celular. As ERO têm sido alvo de diversos estudos porque participam em processos patológicos de grande importância, como o da doença de Alzheimer e da doença de Parkinson. O pacu, Piaractus mesopotamicus (Holmberg, 1887), é um peixe constantemente submetido na natureza a processos de hipoxia e reoxigenação, por isto deve ter adaptações morfológicas e bioquímicas que lhe permitem resistir a grandes mudanças nas concentrações de ERO. Falta ainda conhecer as enzimas antioxidantes capazes de proteger as células do pacu do estresse oxidante. As glutationa peroxidases (GPX) são enzimas que reduzem ERO como o H2O2 e os peróxidos de ácidos graxos. Sua atividade já foi descrita em frações citosólicas e ancorada à membrana de mitocôndrias e de microssomos de hepatócitos de ratos. Neste trabalho ensaiamos a atividade de glutationa peroxidase das frações mitocondriais e microssomais obtidas de fígado de pacu e determinamos algumas de suas propriedades cinéticas. Há mais atividade de GPX na fração microssomal do que na mitocondrial em células do fígado de pacu. Os resultados denotam a existência de alta atividade de glutationa peroxidase nas frações microssomais e mitocondriais hepáticas de pacu; maiores que as já descritas nas mesmas frações de hepatócitos de rato, indicando que num animal adaptado à hipoxia a atividade da GPX possa ser constitutivamente alta. O comportamento enzimático evidencia-se sigmoide. Maiores níveis de GSH interferem na catálise, aumentando a velocidade. A variação nos valores da velocidade frente as diferentes concentrações da GSH, mostram que o acréscimo nas concentrações da GSH aumenta a afinidade da GPX pelo H2O2, atingindo uma maior eficácia sobre H2O2 com concentrações entre 4 e 8 mM de GSH.