Análise multielementar usando microfluorescência de raios X em culturas 3D de células de neuroblastoma humano

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Ferreira, Gabriel da Cruz
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade do Estado do Rio de Janeiro; Centro de Tecnologia e Ciências::Instituto de Física Armando Dias Tavares; Brasil; UERJ; Programa de Pós-Graduação em Física
• Palavras-chave em Português: X-Ray Fluorescence; Cell culture; Cancer - Treatment; Medical physics; Micro X-ray fluorescence; 3D culture cells; Trace elements; Fluorescência de raio X; Cultura de células; Câncer - Tratamento; Física médica; Microfluorescência de raios X; Neuroblastoma; Cultura celular em 3D; Elementos traços; CIENCIAS EXATAS E DA TERRA::FISICA::FISICA NUCLEAR
• Link de acesso: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/16571

O neuroblastoma (NB) é uma neoplasia maligna no sistema nervoso que ocorre exclusivamente na infância e nos primeiros anos de vida. O NB acomete cerca de 8 % a 10 % dos casos de neoplasias em crianças, onde mais de 50 % dos casos apresentam doença metastática generalizada no momento do diagnóstico. Os elementos químicos são extremamente importantes no funcionamento de processos celulares, como reações metabólicas e expressões gênicas. A técnica de microfluorescência fluorescência de raios X (microXRF) tem sido amplamente empregada em análises de amostras biológicas por ser uma técnica não destrutiva, produzir dano térmico quase desprezível e permitir a análise de diversos elementos simultaneamente. O objetivo deste estudo foram obter as concentrações elementares presentes em esferoides de linhagens celulares de neuroblastoma humano (SH-SY5Y e SK-N-BE (2)). Além disso, determinar os limites de detecção do sistema de microXRF e analisar as distribuições espaciais (mapas bidimensionais) dos elementos presentes nas amostras comparando as linhagens tumorais de NB. Os esferoides celulares foram formados a partir de cultura celular em placa de 96 poços utilizando meio de cultura DMEM suplementado com 10% de SFB durante 5 dias de incubação. A análise por microXRF foi realizada através do espectrômetro M4 Tornado (Bruker Nano GmbH), sendo possível a detecção dos seguintes elementos: P, S, Cl, K, Ca, Fe, Cu e Zn. A partir de uma amostra certificada foi possível calcular o limite de detecção do sistema, estando este entre 0,8 µg.g⁻¹ (para cobre e zinco) até 7,2 µg.g⁻¹ (para fósforo). Os mapas bidimensionais dos elementos químicos mostraram distribuições não uniformes para todos os elementos e esferoides analisados. Além disso, os resultados obtidos através da quantificação mostraram que os valores obtidos para as concentrações elementares variaram desde valores mínimos de 1,5 µg.g⁻¹ até 3,0 µg.g⁻¹ para o elemento Zn e valores mínimos de 1064,0 µg.g⁻¹ até 2413,0 µg.g⁻¹ para o elemento P, respectivamente para as linhagens SK-N-BE (2) e SHSY5Y. Os resultados apresentaram grande dispersão devido a heterogeneidade dos esferoides celulares. Os resultados mostraram através do teste não paramétrico de Mann-Whitney com nível de significância de 5 % que as linhagens celulares apresentam diferenças significativas.