Modulação da atividade microbicida de macrófagos pela pterocarpanoquinona LQB-118 e sua ação terapêutica em modelo experimental de infecção com Leishmania (Viannia) braziliensis

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Souza, Luciana Costa de
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade do Estado do Rio de Janeiro; Centro Biomédico::Faculdade de Ciências Médicas; Brasil; UERJ; Programa de Pós-Graduação em Microbiologia
• Palavras-chave em Português: Leishmania (Viannia) braziliensis; LQB-118; Macrophages; Human cell; Hamster Immunomodulation; Oral treatment; Macrófagos; Célula humana; Hamster; Imunomodulação; Tratamento oral; CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA::MICROBIOLOGIA APLICADA::MICROBIOLOGIA MEDICA
• Link de acesso: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/17517

As leishmanioses estão entre as mais importantes endemias brasileiras e encontram-se entre as doenças mais negligenciadas no mundo. O arsenal terapêutico disponível é restrito, tóxico, caro e em algumas situações ineficazes, devido ao surgimento de cepas resistentes. No Brasil, são registrados anualmente mais de 20 mil casos de leishmaniose tegumentar, sendo a Leishmania (Viannia) braziliensis considerada a principal espécie causadora das formas clínicas cutânea e mucosa. Portanto, tornam-se importante estudos que conduzam ao desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas. A pterocarpanoquinona LQB-118 é uma molécula que apresenta atividade antitumoral, contra Trypanosoma cruzi e espécies de Leishmania tanto in vitro quanto in vivo. O objetivo da presente tese é estudar a ação moduladora da LQB-118 sintética, sobre macrófagos de hamsters e humanos, infectados ou não por L. (Viannia) braziliensis. O efeito antiparasitário foi avaliado sobre o crescimento in vitro das formas amastigotas intracelulares em macrófagos peritoneais de hamsters e do sangue periférico humano. Para avaliar o modo de ação, foi investigada a ação anti- amastigota, a indução de apoptose usando marcação por TUNEL e a modulação na célula hospedeira foi analisada pela dosagem de óxido nítrico (reagente de Griess) e espécies reativas de oxigênio (EROs) em macrófagos peritoneais de hamsters e em macrófagos humanos o efeito modulador foi avaliado pela dosagem de óxido nítrico e de citocinas IL1-β, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12 e TNF-α (por citometria de fluxo) nos sobrenadantes de macrófagos tratados com a LQB-118 antes ou após a infecção. A ação da LQB-118 in vitro foi dose-dependente inibindo 0,8%, 75% e 88%, nas concentrações de 5, 10 e 20µM, respectivamente para macrófagos de hamster tratados por 48 horas após a infecção. Para macrófagos humanos a inibição foi de 31%, 52% e 81,5% para as mesmas concentrações. Em macrófagos tratados por 24 horas com LQB-118 antes da infecção, a redução do índice de infecção foi de 62%, 89% e 95 nas concentrações de 5, 10 e 20µM, respectivamente para macrófagos de hamster e de 61%, 71% e 79%, para macrófagos humano, nas mesmas concentrações respectivamente. A LQB-118 foi capaz de induzir a fragmentação do DNA das formas amastigotas intracelulares sem alterar a viabilidade da célula hospedeira. Esta substância também foi capaz de modular a resposta dos macrófagos humanos tratados com LQB-118 antes ou após a infecção. In vivo, o tratamento por via oral, foi capaz de diminuir a lesão da pata infectada, reduzir a carga parasitária e estimular a resposta intradérmica aos antígenos totais de Leishmania. Estes resultados parciais demonstram que a atividade anti-Leishmania da LQB-118 é direta sobre o parasito pela indução de morte por apoptose, apresentando também uma ação moduladora da resposta dos macrófagos contribuindo para ação leishmanicida, sem alterar a viabilidade da célula hospedeira. A LQB-118 pode ser uma importante molécula para o desenvolvimento de um novo fármaco.