Estudo da diversidade de flavivírus em mosquitos hematófagos : contribuição na epidemiologia de arboviroses de importância na saúde pública
Ano de defesa: | 2019 |
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Estudo da diversidade de flavivírus em mosquitos hematófagos : contribuição na epidemiologia de arboviroses de importância na saúde públicaARBOVÍRUSFLAVIVÍRUSEXTRAÇÃO DE RNAINSETOS HEMATÓFAGOSPRIMERS CFD2MAMDFLAVIVIRUSESRNA EXTRACTIONHEMATOPHAGOUS INSECTSPROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM EVOLUÇÃO E DIVERSIDADE - UFABCOrientadora: Profa. Dra. Márcia Aparecida SperançaDissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Evolução e Diversidade, Santo André, 2019.As arboviroses estão distribuídas mundialmente, com mais de 390 milhões de casos humanos por ano. Especialmente em regiões tropicais e subtropicais, onde a presença de seus vetores está consolidada devido ao clima favorável, os arbovírus são responsáveis por grandes desafios para a saúde pública dos países afetados, como o Brasil. O gênero Flavivirus compreende os arbovírus mais prevalentes, dentre eles os vírus da dengue, da Zika e da febre amarela. De acordo com o Ministério da Saúde, entre 2016 e 2017, ocorreram 1.732.679 casos de dengue, com 864 óbitos; 233.800 casos de febre Zika, com 08 mortes; e 1.908 casos de febre amarela, com 548 mortes. Além da perda de vidas humanas, há grandes impactos econômicos e sociais envolvidos. O monitoramento das ocorrências de flavivírus durante períodos interepidêmicos pode ajudar as instituições de saúde a desenvolver estratégias de controle preventivo. Assim, o objetivo deste estudo foi detectar a ocorrência de flavivírus diretamente em insetos hematófagos coletados em ambientes naturais, de forma a preservar o espécime, permitindo sua identificação para estudos filogenéticos e ecológicos. Nesta pesquisa, foram processados 102 insetos hematófagos coletados na cidade de Marília, estado de São Paulo. Os insetos foram incubados em um tampão de lise com proteinase K, para liberação de ácidos nucleicos e em seguida o RNA foi purificado. A detecção dos flavivírus foi realizada por transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase, utilizando os oligonucleotídeos cFD2 e MAMD, complementares à proteína não-estrutural 5 (NS5) do gênero Flavivirus. O fragmento de 220-250 pb foi obtido em 19 amostras de mosquitos, e a análise por "Basic Local Alignment Search Tool - BLAST" dos dados de sequenciamento dessas dezenove amostras apresentou similaridade de 94-96% com Culex Flavivirus. Sabendo que os mosquitos vetores podem se alimentar de sangue infectado e que podem transmitir vírus durante todo o seu ciclo de vida, esses mosquitos podem ser usados como indicadores epidemiológicos (sentinelas) da circulação de arbovírus em uma determinada área.Arboviruses are distributed worldwide, with more than 390 million human cases per year. Especially in tropical and subtropical regions, where the presence of their vectors is consolidated due to the favorable climate, arboviruses are responsible for major public health challenges in affected countries, such as Brazil. The genus Flavivirus comprises the most prevalent arboviruses, among them the dengue virus, Zika virus and yellow fever virus. According to the Ministry of Health, between 2016 and 2017, there were 1,732,679 cases of dengue, with 864 deaths; 233,800 cases of Zika fever, with 8 deaths; and 1,908 cases of yellow fever, with 548 deaths. In addition to the loss of human lives, there are major economic and social impacts involved. Monitoring of occurrences of flaviviruses during interepidemic periods may help health institutions develop preventive control strategies. Thus, the objective of this study was to detect the occurrence of flavivirus directly in hematophagous insects collected in natural environments, in order to preserve the specimen, allowing its identification for phylogenetic and ecological studies. In this research, 102 hematophagous insects were collected in the city of Marília, state of São Paulo. The insects were incubated in a lysate buffer with proteinase K, to release nucleic acids and then the obtained RNA was purified. The detection of flavivirus was performed by reverse transcription and polymerase chain reaction, using the cFD2 and MAMD oligonucleotides, complementary to the nonstructural protein 5 (NS5) of the genus Flavivirus. The 220-250 bp fragment was obtained from 19 mosquito samples, and the Basic Local Alignment Search Tool - BLAST analysis of the sequencing data from these nineteen samples showed 94-96% similarity with Culex Flavivirus. Knowing that vector mosquitoes can feed on infected blood and can transmit viruses throughout their life cycle, these mosquitoes can be used as epidemiological indicators (sentinels) of the arbovirus circulation in a given area.Sperança, Márcia AparecidaFreitas, Simone Rodrigues deCabral, Aline DinizMolina, Juliana Sá Teles de Oliveira2019info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf71 f. : il.http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=118700http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=118700&midiaext=77660http://biblioteca.ufabc.edu.br/index.php?codigo_sophia=118700&midiaext=77659Cover: http://biblioteca.ufabc.edu.br/php/capa.php?obra=118700porreponame:Repositório Institucional da UFABCinstname:Universidade Federal do ABC (UFABC)instacron:UFABCinfo:eu-repo/semantics/openAccess2022-03-18T15:03:30Zoai:BDTD:118700Repositório InstitucionalPUBhttp://www.biblioteca.ufabc.edu.br/oai/oai.phpopendoar:2022-03-18T15:03:30Repositório Institucional da UFABC - Universidade Federal do ABC (UFABC)false |
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