Ação antibacteriana da propafenona: atividade antibiofilme e sinergismo com a oxacilina contra Staphylococcus aureus resistente à meticilina

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Cândido, Thiago Mesquita
• Orientador(a): Silva, Cecília Rocha da
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Propafenona; Staphylococcus aureus Resistente à Meticilina; Antibacterianos; Reposicionamento de Medicamentos
• Link de acesso: http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/65817

Bactérias multirresistentes são causas de diversas enfermidades em todo o globo. A Organização Mundial da Saúde estima que dentre as bactérias multirresistentes, Staphylococcus aureus é a segunda maior causa de infecções e ônus econômico no continente europeu. Infecções persistentes, oriundas da formação de biofilme são responsáveis por parte significativa de progressão da doença para sepse em indivíduos hospitalizado que fazem uso de material biomédico. Diante dessa prerrogativa, estratégias para viabilizar uma resposta a resistência antimicrobiana vem sendo traçada, como o reposicionamento de fármacos e interações farmacológicas de antimicrobianos. Nesse contexto de reposicionamento, a propafenona um antiarrítmico 1c bloqueador dos canais de sódio e com atividade βadrenérgico, surgiu como um fármaco recentemente avaliado com propriedade antimicrobianas, sendo assim um alvo a ser reposicionado para a antibioticoterapia. Diante disso, esse estudo buscou aprofundar o entendimento do mecanismo de ação antimicrobiana da propafenona em cepas Staphylococcus aureus resistentes a meticilina na forma planctônica e em biofilme, além de avaliar a interação da sustância quando associada a oxacilina e determinar se a propafenona apresentou presença de atividade citotóxica em células eucarióticas. Para determinar o efeito antibacteriano em células planctônicas, foram utilizadas metodologias referentes ao protocolo M7-A9 do CLSI em diluições em caldo na placa de 96 poços. A determinação da ação bactericida da droga foram realizadas pela razão da Concentração Bactericida Mínima (CBM) com a Concentração Inibitória Mínima (CIM) definida pelo Nível de Tolerância e através do ensaio Curva de Morte. Para determinar a interação farmacológica com a oxacilina foi utilizado o checkerboard. A fim de elucidar mecanismos de ação da droga, utilizou-se a citometria de fluxo para determinação da permeabilidade de membrana e da fragmentação do DNA bacteriano. Os ensaios de toxicidade foram realizados em gel de agarose no ensaio Cometa Alcalino e em placa de 96 poços para o Ensaio Hemólise. Os ensaios in sílico foram realizados em software: Lamarkian Genetic algorithm. A CIM da propafenona ficou definida em 250 em das cepas e 500 ug/mL para o restante. A propafenona apresentou ação sinérgica com a oxacilina contra biofilme e em células planctônicas. Foram evidenciados o aumento da permeabilidade da membrana em decorrência da propafenona, assim como dano ao DNA e ligações moleculares do tipo ponte de hidrogênio na PBP2a e em proteínas nucleares. Não foram evidenciados indícios de citotoxicidade em células eucarióticas de murinos induzidos pela propafenona. A propafenona nesse estudo confirmou sua atividade antimicrobiana em células planctônicas e em biofilme, além de determinar um provável mecanismo de ação envolvendo a desestabilização do revestimento bacteriano com fragmentação do DNA em MRSA, sem apresentar indícios de citotoxicidade a células eucarióticas. A identificação de um provável mecanismo de ação facilita os estudos posteriores com a droga, na busca por uma futura alternativa de uso como adjuvante na terapia antimicrobiana.