Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalar

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2020
Autor(a) principal: Pinheiro, Felipe Ramos
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal Fluminense
Niterói
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://app.uff.br/riuff/handle/1/15795
http://dx.doi.org/10.22409/PPGMPA.2020.m.05829633701
Resumo: As infecções relacionadas a assistência em saúde (IRAS) se caracterizam como evento adverso mais frequente nos serviços de saúde em todo o mundo, levando à mortalidade significativa e a perdas financeiras. Os biofilmes bacterianos podem aumentar a resistência a antimicrobianos em até 1.000 vezes, elevando os custos do tratamento e a mortalidade. Staphylococcus aureus vem se destacando nas últimas décadas como um patógeno com notável virulência, incluindo a capacidade de formar biofilme, e adquirir resistência. Dado os riscos associados a surtos envolvendo esse agente, é importante investigar se seu perfil genético pode, de alguma forma, influenciar sua capacidade de formar biofilme, para que estratégias de controle possam ser elaboradas. No total, 94 amostras de origem hospitalar foram selecionadas para o presente estudo, por terem perfis de virulência e resistência bem caracterizados e diversos. As amostras foram submetidas ao teste de força de biofilme por dois protocolos distintos, o primeiro protocolo consiste em um cultivo prévio das amostras em caldo BHI suplementado com 1% de glicose por 24 h 36 ºC e em seguida aplicados em placas de poliestireno na diluição de 1:100. O segundo protocolo a incubação prévia é substituído por um inóculo de turbidez equivalente a 0,5 na escala McFarland com imediata aplicação na placa na diluição (1:10). Com adição de captação da imagem da estirpe selvagem, HU25, para fins comparativos, por se tratar de uma estirpe forte formadora de biofilme. Foram realizados teste de qui-quadrado para correlação entre o biofilme formado e as características de grupo como sitio de isolamento, teste t de uma via para avaliar a influência de da formação do biofilme em uma característica específica (ACME, PVL), ANOVA associado ao teste Turkey e teste t não paramétrico para contagem de unidades formadoras de colônias. Nos ensaios de formação de biofilme, 48 (51%) foram classificadas como fortes formadoras, 27 (29%) com moderada capacidade e 19 (20%) como fracas formadoras. Nenhuma amostra foi classificada como não formadora de biofilme. Nove (9,57%) das 94 estirpes foram selecionadas para o MEV. Todas as fracas formadoras e duas fortes formadoras apresentaram baixa densidade celular. Duas estirpes apresentaram sinais de lesões celulares deixando as células bacterianas com aspecto de hemácias. Foi possível observar a presença de microcanais comunicantes nas microscopias de estirpes com alta densidade de células. As análises do perfil genético comparadas com a capacidade de formação do biofilme mostraram uma relação estatisticamente relevante entre a presença do gene ACME e do cassete SCCmecII com as estirpes classificadas como fortes formadoras de biofilme.
id UFF-2_3c821e0eaf7a03225fe0edd30ab0f82b
oai_identifier_str oai:app.uff.br:1/15795
network_acronym_str UFF-2
network_name_str Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
repository_id_str
spelling Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalarBiofilmeStaphylococcus aureusInfecções HospitalaresBiofilmesStaphylococcus aureusStaphylococcus aureus Resistente à MeticilinaInfecção HospitalarBiofilmStaphylococcus aureusHealthcare-associated infectionsAs infecções relacionadas a assistência em saúde (IRAS) se caracterizam como evento adverso mais frequente nos serviços de saúde em todo o mundo, levando à mortalidade significativa e a perdas financeiras. Os biofilmes bacterianos podem aumentar a resistência a antimicrobianos em até 1.000 vezes, elevando os custos do tratamento e a mortalidade. Staphylococcus aureus vem se destacando nas últimas décadas como um patógeno com notável virulência, incluindo a capacidade de formar biofilme, e adquirir resistência. Dado os riscos associados a surtos envolvendo esse agente, é importante investigar se seu perfil genético pode, de alguma forma, influenciar sua capacidade de formar biofilme, para que estratégias de controle possam ser elaboradas. No total, 94 amostras de origem hospitalar foram selecionadas para o presente estudo, por terem perfis de virulência e resistência bem caracterizados e diversos. As amostras foram submetidas ao teste de força de biofilme por dois protocolos distintos, o primeiro protocolo consiste em um cultivo prévio das amostras em caldo BHI suplementado com 1% de glicose por 24 h 36 ºC e em seguida aplicados em placas de poliestireno na diluição de 1:100. O segundo protocolo a incubação prévia é substituído por um inóculo de turbidez equivalente a 0,5 na escala McFarland com imediata aplicação na placa na diluição (1:10). Com adição de captação da imagem da estirpe selvagem, HU25, para fins comparativos, por se tratar de uma estirpe forte formadora de biofilme. Foram realizados teste de qui-quadrado para correlação entre o biofilme formado e as características de grupo como sitio de isolamento, teste t de uma via para avaliar a influência de da formação do biofilme em uma característica específica (ACME, PVL), ANOVA associado ao teste Turkey e teste t não paramétrico para contagem de unidades formadoras de colônias. Nos ensaios de formação de biofilme, 48 (51%) foram classificadas como fortes formadoras, 27 (29%) com moderada capacidade e 19 (20%) como fracas formadoras. Nenhuma amostra foi classificada como não formadora de biofilme. Nove (9,57%) das 94 estirpes foram selecionadas para o MEV. Todas as fracas formadoras e duas fortes formadoras apresentaram baixa densidade celular. Duas estirpes apresentaram sinais de lesões celulares deixando as células bacterianas com aspecto de hemácias. Foi possível observar a presença de microcanais comunicantes nas microscopias de estirpes com alta densidade de células. As análises do perfil genético comparadas com a capacidade de formação do biofilme mostraram uma relação estatisticamente relevante entre a presença do gene ACME e do cassete SCCmecII com as estirpes classificadas como fortes formadoras de biofilme.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorHealthcare-associated infections are the most frequent adverse events associated with healthcare worldwide, leading to significant mortality and financial losses. Bacterial biofilms can increase antimicrobial resistance by up to 1,000 times, increasing treatment costs and mortality. In recent decades, Staphylococcus aureus has been prominent as a pathogen with remarkable virulence, including the ability to form biofilm, and acquired resistance. Given the risks associated with outbreaks involving this agent, it is important to investigate whether its genetic profile can somehow influence its ability to form biofilm, so that strategies to control S. aureus infections can be implemented. Ninety-four well-characterized isolates, with diverse virulence and resistance profiles, were analyzed. Isolates were subjected to the biofilm strength test, comparing two protocols. The first protocol consists of a previous cultivation of samples in BHI broth supplemented with 1% glucose for 24 h at 36 ºC and then applied to polystyrene 96-well plates at a dilution of 1:100. The second protocol for previous incubation is replaced by an inoculum of turbidity equivalent to 0.5 on the McFarland scale with immediate application to the 96-well plate at 1:10 dilution. Structure of the biofilm was observed by scanning electron microscopy (SEM) in selected samples according to its epidemiological profile (SCCmec and spa typing). In addition, HU25, a well-known strong biofilm-forming strain has been used for comparative purposes. Chi-square test was used for correlation between the formed biofilm and group characteristics, as well as one sample t-Student test to evaluate the influence of biofilm formation on a specific characteristic (ACME, PVL). ANOVA associated with Turkey’s test and non-parametric t test were used for colony forming units (CFU) measurement. Forty-nine (51%) isolates were classified as strong former, 27 (29%) isolates as moderate former and 19 (20%) isolates as weak former. Nine (9.57%) of the 94 strains were selected for SEM. Two weak formers and two strong formers presented a low cell density. Two strains presented cell surface lesions, like red blood cells. It was possible to observe the presence of communicating microchannels in all strains with a high cell density. The analyses of the genetic profile compared with the biofilm formation capacity show statistical correlation between the ACME gene and the SCCmecII with strains classified as strong biofilm former.84f.Universidade Federal FluminenseNiteróiAlves, Fábio AguiarPenna, Bruno de AraújoPóvoa, Helvécio CardosoSachs, DanielaPereira, Renata Freire Alveshttp://lattes.cnpq.br/7912841775695894http://lattes.cnpq.br/0096649753805134Pinheiro, Felipe Ramos2020-11-04T18:23:38Z2020-11-04T18:23:38Z2020info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://app.uff.br/riuff/handle/1/15795Aluno de Mestradohttp://dx.doi.org/10.22409/PPGMPA.2020.m.05829633701Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 BrazilopenAccesshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/CC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFF2021-07-13T03:08:30Zoai:app.uff.br:1/15795Repositório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202021-07-13T03:08:30Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false
dc.title.none.fl_str_mv Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalar
title Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalar
spellingShingle Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalar
Pinheiro, Felipe Ramos
Biofilme
Staphylococcus aureus
Infecções Hospitalares
Biofilmes
Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus Resistente à Meticilina
Infecção Hospitalar
Biofilm
Staphylococcus aureus
Healthcare-associated infections
title_short Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalar
title_full Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalar
title_fullStr Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalar
title_full_unstemmed Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalar
title_sort Avaliação da capacidade de formação do biofilme de estirpes de Staphylococcus aureus resistente a meticilina circulantes em ambiente hospitalar
author Pinheiro, Felipe Ramos
author_facet Pinheiro, Felipe Ramos
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Alves, Fábio Aguiar
Penna, Bruno de Araújo
Póvoa, Helvécio Cardoso
Sachs, Daniela
Pereira, Renata Freire Alves
http://lattes.cnpq.br/7912841775695894
http://lattes.cnpq.br/0096649753805134
dc.contributor.author.fl_str_mv Pinheiro, Felipe Ramos
dc.subject.por.fl_str_mv Biofilme
Staphylococcus aureus
Infecções Hospitalares
Biofilmes
Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus Resistente à Meticilina
Infecção Hospitalar
Biofilm
Staphylococcus aureus
Healthcare-associated infections
topic Biofilme
Staphylococcus aureus
Infecções Hospitalares
Biofilmes
Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus Resistente à Meticilina
Infecção Hospitalar
Biofilm
Staphylococcus aureus
Healthcare-associated infections
description As infecções relacionadas a assistência em saúde (IRAS) se caracterizam como evento adverso mais frequente nos serviços de saúde em todo o mundo, levando à mortalidade significativa e a perdas financeiras. Os biofilmes bacterianos podem aumentar a resistência a antimicrobianos em até 1.000 vezes, elevando os custos do tratamento e a mortalidade. Staphylococcus aureus vem se destacando nas últimas décadas como um patógeno com notável virulência, incluindo a capacidade de formar biofilme, e adquirir resistência. Dado os riscos associados a surtos envolvendo esse agente, é importante investigar se seu perfil genético pode, de alguma forma, influenciar sua capacidade de formar biofilme, para que estratégias de controle possam ser elaboradas. No total, 94 amostras de origem hospitalar foram selecionadas para o presente estudo, por terem perfis de virulência e resistência bem caracterizados e diversos. As amostras foram submetidas ao teste de força de biofilme por dois protocolos distintos, o primeiro protocolo consiste em um cultivo prévio das amostras em caldo BHI suplementado com 1% de glicose por 24 h 36 ºC e em seguida aplicados em placas de poliestireno na diluição de 1:100. O segundo protocolo a incubação prévia é substituído por um inóculo de turbidez equivalente a 0,5 na escala McFarland com imediata aplicação na placa na diluição (1:10). Com adição de captação da imagem da estirpe selvagem, HU25, para fins comparativos, por se tratar de uma estirpe forte formadora de biofilme. Foram realizados teste de qui-quadrado para correlação entre o biofilme formado e as características de grupo como sitio de isolamento, teste t de uma via para avaliar a influência de da formação do biofilme em uma característica específica (ACME, PVL), ANOVA associado ao teste Turkey e teste t não paramétrico para contagem de unidades formadoras de colônias. Nos ensaios de formação de biofilme, 48 (51%) foram classificadas como fortes formadoras, 27 (29%) com moderada capacidade e 19 (20%) como fracas formadoras. Nenhuma amostra foi classificada como não formadora de biofilme. Nove (9,57%) das 94 estirpes foram selecionadas para o MEV. Todas as fracas formadoras e duas fortes formadoras apresentaram baixa densidade celular. Duas estirpes apresentaram sinais de lesões celulares deixando as células bacterianas com aspecto de hemácias. Foi possível observar a presença de microcanais comunicantes nas microscopias de estirpes com alta densidade de células. As análises do perfil genético comparadas com a capacidade de formação do biofilme mostraram uma relação estatisticamente relevante entre a presença do gene ACME e do cassete SCCmecII com as estirpes classificadas como fortes formadoras de biofilme.
publishDate 2020
dc.date.none.fl_str_mv 2020-11-04T18:23:38Z
2020-11-04T18:23:38Z
2020
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://app.uff.br/riuff/handle/1/15795
Aluno de Mestrado
http://dx.doi.org/10.22409/PPGMPA.2020.m.05829633701
url https://app.uff.br/riuff/handle/1/15795
http://dx.doi.org/10.22409/PPGMPA.2020.m.05829633701
identifier_str_mv Aluno de Mestrado
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil
openAccess
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/
CC-BY-SA
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil
openAccess
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/
CC-BY-SA
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal Fluminense
Niterói
publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal Fluminense
Niterói
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)
instacron:UFF
instname_str Universidade Federal Fluminense (UFF)
instacron_str UFF
institution UFF
reponame_str Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
collection Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)
repository.mail.fl_str_mv riuff@id.uff.br
_version_ 1807827796876066816