Uso de trans-anetol purificado na criopreservação de sêmen ovino
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Resumo: | Trabalho desenvolvido nos Laboratórios de Reprodução Animal do Departamento de Patologia e Clínica Veterinária e na Unidade de Pesquisa Experimental em Caprinos e Ovinos (UniPECO) da Faculdade de Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Ciências e Biotecnologia, Universidade Federal Fluminense. |
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Braga, Rachel FerreiraFabjan, Joanna Maria Gonçalves de SouzaAlves, Bruna Rios CoelhoBatista, Ribrio Ivan Tavares PereiraNichi, MarcílioCarvalho Neto, José de OliveiraCorreia, Lucas Francisco Leodido2023-06-22T19:52:15Z2023-06-22T19:52:15ZBRAGA, Rachel Ferreira. Uso de trans-anetol purificado na criopreservação de sêmen ovino. 2023. 55 f. Dissertação (Mestrado em Ciências e Biotecnologia) – Programa de Pós-Graduação em Ciências e Biotecnologia, Instituto de Biologia, Universidade Federal Fluminense, Niterói, 2023.http://app.uff.br/riuff/handle/1/29200Trabalho desenvolvido nos Laboratórios de Reprodução Animal do Departamento de Patologia e Clínica Veterinária e na Unidade de Pesquisa Experimental em Caprinos e Ovinos (UniPECO) da Faculdade de Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Ciências e Biotecnologia, Universidade Federal Fluminense.A criopreservação de sêmen associada à inseminação artificial torna mais eficiente a propagação de características zootécnicas de interesse. No entanto, esse processo leva ao estresse oxidativo dos espermatozoides, reduzindo sua viabilidade. O trans-anetol, um antioxidante natural encontrado em plantas, parece melhorar a sobrevivência dessas células durante a criopreservação de sêmen. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos de diferentes concentrações de trans-anetol purificado no meio de criopreservação de sêmen ovino. Para isso, seis carneiros foram submetidos a coleta seminal via vagina artificial por sete dias. Ejaculados com motilidade espermática ≥80% (n=30) foram diluídos individualmente com meio Tris-Gema, e divididos nos seguintes tratamentos, de acordo com a concentração de trans-anetol adicionado ao meio: CONT (0 µM), AN10 (10 µM), AN50 (50 µM) e AN100 (100 µM). O sêmen foi congelado em máquina própria e descongelado a 37 °C por 30 s. Análises foram realizadas no momento da diluição (cinética espermática, integridade de membrana plasmática, hiposmótico e atividade mitocondrial) e imediatamente após o descongelamento (cinética espermática, integridade de membrana plasmática, hiposmótico, atividade mitocondrial, status acrossomal, ligação à membrana perivitelínica e lipoperoxidação). Os dados foram analisados usando um modelo misto linear generalizado. Após o descongelamento, o grupo AN100 apresentou melhores resultados (P < 0,05) nos parâmetros de motilidade progressiva e espermatozoides com velocidade média, quando comparado aos outros grupos. Além disso, AN100 também apresentou mais espermatozoides com velocidade rápida que o CONT e AN10 (P < 0,05). No teste de ligação à membrana perivitelínica, AN100 e AN50 tenderam a ter (P = 0,08) mais espermatozoides ligados à membrana. Por outro lado, no teste hiposmótico, AN100 apresentou menos espermatozoides com membrana ativa quando comparado aos grupos CONT e AN10 (P < 0,05) e maiores níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) do que AN10 e AN50 (P < 0,05). O AN10 foi o grupo que apresentou menores níveis de TBARS quando comparado aos grupos CONT e AN100 (P < 0,05). Assim, é possível afirmar que concentrações de 10 e 50 µM de trans-anetol no diluidor possuem efeitos positivos nos espermatozoides ovinos, aumentando sua motilidade progressiva, habilidade de ligação à membrana, além de possuir efeito antioxidante na criopreservação de sêmen, mas sua alta concentração parece afetar a membrana dessas células.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível SuperiorConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de JaneiroSemen cryopreservation associated with artificial insemination increases the efficiency for propagation of zootechnical characteristics of interest. However, this process leads to oxidative stress of sperm, reducing their viability. Transanethole, a natural antioxidant found in plants, appears to improve the survival of these cells during semen cryopreservation. The aim of this study was to evaluate the effects of different concentrations of commercial trans-anethole in ram semen cryopreservation extender. Six rams were submitted to a seminal collection with artificial vagina for seven days. Ejaculates with sperm motility ≥80% (n=30) were individually diluted with Tris-Egg-Yolk extender, and allocated into the following treatments, according to the concentration of commercial transanethole added to the extender: CONT (0 µM), AN10 (10 µM), AN50 (50 µM) and AN100 (100 µM). The semen was frozen in a machine and thawed at 37 °C for 30 s. Analyses were performed at the time of dilution (sperm kinetics, plasma membrane integrity, hypoosmotic, and mitochondrial activity) and immediately after thawing (sperm kinetics, plasma membrane integrity, hypoosmotic, mitochondrial activity, acrosomal status, binding to the perivitelline membrane, and lipid peroxidation). Data were analyzed using a generalized linear mixed model. After thawing, the AN100 group presented better results (P < 0.05) of progressive motility and spermatozoa with average velocity when compared to the other groups. In addition, AN100 also had more fast sperm when compared to CONT and AN10 (P < 0.05). In the perivitelline membrane binding test, AN100 and AN50 tended to have more sperm bound to the membrane (P = 0.08). However, in the hypoosmotic test, AN100 showed fewer sperm with active membranes when compared to the CONT and AN10 groups (P < 0.05). Moreover, AN100 also had higher levels of TBARS when compared to AN10 and AN50 groups (P < 0.05). AN10 had the lowest TBARS levels when compared to CONT and AN100 (P < 0.05). Therefore, adding concentrations of 10 and 50 µM of trans-anethole in the extender has positive effects on ovine spermatozoa, increasing progressive motility, ability to bind to the membrane, and an antioxidant effect in semen cryopreservation, but it seems that a higher concentration can affect these cell membranes.55 f.CC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessUso de trans-anetol purificado na criopreservação de sêmen ovinoinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisAntioxidanteErva-doceCongelamentoMalonaldeídoROSCriopreservaçãoPreservação do sêmenOvinoReprodução animalFenilpropanoideTrans-anetol (TAN)Composto aromáticoComposto orgânicoAntioxidantFennelFreezingMalondialdehydeROSMestrado acadêmicoUniversidade Federal FluminenseInstituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Ciências e Biotecnologia2023Niterói, RJporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFFORIGINALDissertação-RachelFerreiraBraga.pdfDissertação-RachelFerreiraBraga.pdfapplication/pdf1419790https://app.uff.br/riuff/bitstream/1/29200/1/Disserta%c3%a7%c3%a3o-RachelFerreiraBraga.pdfaecf7570375fd8eded2b66f4a5d507aeMD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81866https://app.uff.br/riuff/bitstream/1/29200/2/license.txt43cd690d6a359e86c1fe3d5b7cba0c9bMD521/292002023-06-22 16:52:19.703oai:app.uff.br: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ório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202023-06-22T19:52:19Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false |
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