RECEPTORES CB1 E CB2 MODULAM O TRANSPORTE DE GABA EM RETINAS EMBRIONÁRIAS DE GALINHA EXPOSTAS À CAFEÍNA

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Martins, Vladimir Pedro Peralva Borges
• Orientador(a): Kubrusly, Regina Célia Cussa
• Banca de defesa: Ferreira, Gustavo da Costa , Adesse, Daniel Pedra , Araújo, Elizabeth Giestal , Rodrigues, Alexandre dos Santos
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://app.uff.br/riuff/handle/1/36752
• topic: Cafeína; Receptor de Adenosina; Transportador de GABA; Retina; Receptor Canabinoide; Desenvolvimento; Homeostase; Caffeine; Adenosine receptor; GABA transporter; Retina; Cannabinoid receptor; Development

Cafeína é um psicoestimulante capaz de regular o transporte de GABA em retinas de embriões de galinha. Nosso estudo revelou um perfil de redução na captação de [3H]-GABA regulada tanto pelo sistema adenosinérgico quanto pelo endocanabinoide. Observamos que, existe uma diminuição significativa após uma única injeção de cafeína 30 mg/kg administrada em E11, seguida de análises neuroquímicas em E15. Em contraste, os tratamentos antes deste ponto temporal (de E11 a E14) não exibiram alterações em comparação com o grupo controle. Além disso, não foram observadas alterações quando injetada 1 ou 24 h antes do ensaio em E15. Observamos que a captação de [3H]-GABA possui uma redução significativa após 1 h de ensaio de captação. Ademais, nossas investigações mostraram que uma única injeção de cafeína em E11 não ativou a via apoptótica associada à caspase-3 em E15, indicando que a cafeína não induziu apoptose nesta fase. Também elucidamos que a cafeína exerce seus efeitos moduladores tanto na captação quanto na liberação de [3H]-GABA através da ativação de A1R e sinalização via AMPc/PKA. Corroborando a participação de A1R, o DPCPX (antagonista dos receptores A1R) mimetiza os efeitos da cafeína nos níveis endógenos de AMPc enquanto o CHA (agonista seletivo dos receptores A1R) os reduz. Além disso, observamos que uma única injeção de cafeína aumentou a liberação de [3H]-GABA, e foi revertida pela ativação de A1R pelo CHA e pelo bloqueio da PKA com H-89. Adicionalmente, a exposição aguda ao WIN 55.212-2 não alterou a captação de [3H]-GABA, mas reverteu a redução promovida pela cafeína para níveis basais. A ativação dos receptores eCB também diminuiu os níveis de liberação de [3H]-GABA, chegando a níveis abaixo do basal em ambos os grupos. Há uma expressão consistente dos CB1R e CB2R nas camadas da retina entre os grupos, mas, análises de Western blotting revelaram uma redução mediada pela cafeína na densidade total de ambas as proteínas. Além disso, as densidades dos A1R e CB1R permaneceram constantes ao longo dos períodos estudados. Em conclusão, as nossas descobertas revelam uma interação complexa entre os sistemas adenosinérgico e canabinoide e o transporte de GABA na retina em desenvolvimento, resultando em modificações da excitabilidade celular e homeostase GABAérgica no desenvolvimento da circuitaria retiniana.