Efeito da Ouabaína sobre o Sistema Colinérgico em Culturas de Células da Retina de Ratos
| Ano de defesa: | 2025 |
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Resumo: | Ao longo das últimas décadas tem sido demonstrado que a ouabaína (OUA) pode modular efeitos de sobrevida, diferenciação e proliferação de diferentes populações celulares. Nosso laboratório caracterizou o efeito trófico de 3nM de OUA em células ganglionares da retina, submetidas à axotomia e mantidas em cultura por 48h. Dados prévios do laboratório demonstraram que o tratamento com OUA (3nM) induziu um aumento dos níveis intracelulares de IL-4 em culturas de células da retina mantidas por 15min, 24h e 48h e que o tratamento com IGF-1 aumenta os níveis do receptor M3 em 45min e reduziu em 24 e 48h. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da ouabaína sobre o perfil colinérgico e os níveis de citocinas em células da retina mantidas em cultura. Utilizamos diferentes metodologias, incluindo Western blot e ELISA. Observamos que a OUA (3nM) aumentou os níveis de IL-4 em 15min, 24 e 48h, e modulou os receptores muscarínicos M3 de maneira transitória, com aumento em 45 minutos e redução em 48h. Também aumentou os receptores M3 em 45 min e reduziu em 48h. Em relação aos níveis de IGF-1 a OUA aumenta seus níveis em 15min e induz diminuição em 45min e 48h. Tanto os níveis da ChAT, como do VAChT com do ChT1 foram modulados pelo tratamento com OUA e a colinesterase teve sua atividade diminuída em 15min. Nossos dados demonstram que a OUA é capaz de modular de maneira ampla o perfil colinérgico e os níveis de citocinas com perfil anti inflamatório, em cultura de células da retina. Esses dados nos permitem sugerir um papel importante para a OUA na modulação da resposta inflamatória, contribuindo para a manutenção da homesostasia |
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Efeito da Ouabaína sobre o Sistema Colinérgico em Culturas de Células da Retina de RatosEffect of Ouabain on the Cholinergic System in Rat Retinal Cell CulturesNa+/K+ATPaseAcetilcolinesteraseColina acetiltransferaseIGF-1IL-4Efeito ColinérgicoCitocinasAcetylcholinesteraseCholine acetyltransferaseAo longo das últimas décadas tem sido demonstrado que a ouabaína (OUA) pode modular efeitos de sobrevida, diferenciação e proliferação de diferentes populações celulares. Nosso laboratório caracterizou o efeito trófico de 3nM de OUA em células ganglionares da retina, submetidas à axotomia e mantidas em cultura por 48h. Dados prévios do laboratório demonstraram que o tratamento com OUA (3nM) induziu um aumento dos níveis intracelulares de IL-4 em culturas de células da retina mantidas por 15min, 24h e 48h e que o tratamento com IGF-1 aumenta os níveis do receptor M3 em 45min e reduziu em 24 e 48h. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da ouabaína sobre o perfil colinérgico e os níveis de citocinas em células da retina mantidas em cultura. Utilizamos diferentes metodologias, incluindo Western blot e ELISA. Observamos que a OUA (3nM) aumentou os níveis de IL-4 em 15min, 24 e 48h, e modulou os receptores muscarínicos M3 de maneira transitória, com aumento em 45 minutos e redução em 48h. Também aumentou os receptores M3 em 45 min e reduziu em 48h. Em relação aos níveis de IGF-1 a OUA aumenta seus níveis em 15min e induz diminuição em 45min e 48h. Tanto os níveis da ChAT, como do VAChT com do ChT1 foram modulados pelo tratamento com OUA e a colinesterase teve sua atividade diminuída em 15min. Nossos dados demonstram que a OUA é capaz de modular de maneira ampla o perfil colinérgico e os níveis de citocinas com perfil anti inflamatório, em cultura de células da retina. Esses dados nos permitem sugerir um papel importante para a OUA na modulação da resposta inflamatória, contribuindo para a manutenção da homesostasiaCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior.Over the last decades it has been demonstrated that ouabain (OUA) can modulate survival, differentiation and proliferation effects of different cell populations. Our laboratory characterized the trophic effect of 3nM OUA on retinal ganglion cells, subjected to axotomy and maintained in retinal cell cultures for 48h. Previous data from the laboratory demonstrated that treatment with OUA (3nM) induced an increase in intracellular levels of IL-4 in cultures of retinal cells maintained for 15min, 24h and 48h and that treatment with IGF-1 increases levels of the M3 receptor in 45min and reduced in 24 and 48h. The present study aimed to evaluate the effect of ouabain on the cholinergic profile and cytokine levels in retinal cells maintained in culture. We use different methodologies, including Western blot and ELISA. We observed that OUA (3nM) increased IL-4 levels at 15min, 24 and 48h, and modulated M3 muscarinic receptors in a transient manner, with an increase at 45 minutes and a reduction at 48h. It also increased M3 receptors in 45 min and reduced them in 48 h. In relation to IGF-1 levels, OUA increases its levels in 15 minutes and induces a decrease in 45 minutes and 48 hours. Both ChAT and VAChT and ChT1 levels were modulated by OUA treatment and cholinesterase activity decreased within 15 minutes. Our data demonstrate that OUA is capable of broadly modulating the cholinergic profile and levels of cytokines with an anti-inflammatory profile in retinal cell cultures. These data allow us to suggest an important role for OUA in modulating the inflammatory response, contributing to the maintenance of homeostasis.101 f.Araujo, Elizabeth Giestal dehttp://lattes.cnpq.br/8230334072312477Oliveira, Thalita Mázala dehttp://lattes.cnpq.br/0798032960813817Souza, Thayane Martins Silvahttp://lattes.cnpq.br/7639569152487589Nunes-Tavares, Nilsonhttp://lattes.cnpq.br/5617474265892547Oliveira, Amanda Cãndida da Rochahttp://lattes.cnpq.br/4194292172340220http://lattes.cnpq.br/0275333171286372Oliveira, Michelle Rodrigues de2025-03-17T20:22:59Z2025-03-17T20:22:59Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfOLIVEIRA, Michelle Rodrigues. Oliveira, Michelle Rodrigues. Efeito da Ouabaína sobre o Sistema Colinérgico em Cultura de Células da Retina de Ratos. 2024. 101 f. Tese (Doutorado em Neurociências), Programa de Pós-graduação em Neurociências, Universidade Federal Fluminense, Niterói, 2024.https://app.uff.br/riuff/handle/1/37249ark:/87559/001300001817qCC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFF2025-03-17T20:22:59Zoai:app.uff.br:1/37249Repositório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202025-03-17T20:22:59Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false |
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Ao longo das últimas décadas tem sido demonstrado que a ouabaína (OUA) pode modular efeitos de sobrevida, diferenciação e proliferação de diferentes populações celulares. Nosso laboratório caracterizou o efeito trófico de 3nM de OUA em células ganglionares da retina, submetidas à axotomia e mantidas em cultura por 48h. Dados prévios do laboratório demonstraram que o tratamento com OUA (3nM) induziu um aumento dos níveis intracelulares de IL-4 em culturas de células da retina mantidas por 15min, 24h e 48h e que o tratamento com IGF-1 aumenta os níveis do receptor M3 em 45min e reduziu em 24 e 48h. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da ouabaína sobre o perfil colinérgico e os níveis de citocinas em células da retina mantidas em cultura. Utilizamos diferentes metodologias, incluindo Western blot e ELISA. Observamos que a OUA (3nM) aumentou os níveis de IL-4 em 15min, 24 e 48h, e modulou os receptores muscarínicos M3 de maneira transitória, com aumento em 45 minutos e redução em 48h. Também aumentou os receptores M3 em 45 min e reduziu em 48h. Em relação aos níveis de IGF-1 a OUA aumenta seus níveis em 15min e induz diminuição em 45min e 48h. Tanto os níveis da ChAT, como do VAChT com do ChT1 foram modulados pelo tratamento com OUA e a colinesterase teve sua atividade diminuída em 15min. Nossos dados demonstram que a OUA é capaz de modular de maneira ampla o perfil colinérgico e os níveis de citocinas com perfil anti inflamatório, em cultura de células da retina. Esses dados nos permitem sugerir um papel importante para a OUA na modulação da resposta inflamatória, contribuindo para a manutenção da homesostasia |
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