Análise histopatológica e imunomarcação com Ki-67 em lesões leucoplásicas orais avaliadas com o Teste de Azul de Toluidina

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2026
Autor(a) principal: Ecard, Marcelle Bairral
Orientador(a): Lourenço, Simone de Queiroz Chaves lattes
Banca de defesa: Leite, Ana Flávia Schueler de Assumpção lattes, Oliveira, Aline Muniz de lattes, Oliveira, Silvia Paula de lattes
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Link de acesso: https://app.uff.br/riuff/handle/1/43706
Resumo: As Desordens Orais Potencialmente Malignas (DOPMs) caracterizam-se por apresentar risco variável de transformação maligna, o qual depende do tipo específico de lesão diagnosticada, dentre essas desordens mais prevalentes, destaca-se a leucoplasia oral. O Teste de Azul de Toluidina (TAT) tem se mostrado uma ferramenta clínica auxiliar relevante na identificação da área mais apropriada para a realização de biópsia, por sua afinidade com ácidos nucleicos, evidenciando regiões de maior atividade celular. Complementarmente, a proteína Ki-67 é um marcador nuclear amplamente utilizado para a avaliação da proliferação celular. Objetivo: Analisar as características clínicas, histopatológicas e a expressão imuno-histoquímica da proteína Ki-67 em lesões leucoplásicas orais previamente submetidas ao TAT. Metodologia: Estudo observacional, retrospectivo, analítico e descritivo. A casuística deste estudo foi constituída por 28 pacientes que, ao serem submetidos ao exame físico intraoral, apresentaram lesões leucoplásicas orais. Todas as lesões foram submetidas ao TAT, seguida de biópsia incisional.. Os atendimentos dos pacientes e o processamento laboratorial ocorreram na Faculdade de Odontologia da Universidade Federal Fluminense (FOUFF), no período de fevereiro de 2022 a dezembro de 2024. A imuno-histoquímica foi realizada no Laboratório de Suporte à Pesquisa e Biologia Molecular da Divisão de Patologia (DIPAT), do INCA. Foram coletados os dados sociodemográficos e clínicos dos pacientes e análise histopatológica descritiva. Paralelamente, na avaliação imuno-histoquímica, procedeu-se à análise semiquantitativa da expressão da proteína Ki-67, considerando-se sua positividade, localização e padrão de distribuição no epitélio. Para avaliar as associações entre as variáveis, os dados clínicos, histopatológicos e imuno-histoquímicos foram organizados em planilha e submetidos à análise estatística, empregando-se o teste exato de Fisher ou o teste do Qui-quadrado, considerando-se significativos os valores de p ≤ 0,05. Resultados: A população de estudo foi composta por 28 pacientes, com predomínio do gênero feminino (67,9%) com idade superior a 60 anos (46,4%). A maioria dos pacientes era tabagista ou ex-tabagista (57,1%) e etilista (60,7%). Clinicamente, a região mais acometida foi a língua (ventre ou borda lateral) (25%), predominando lesões de sítio único (64,5%), com aspecto homogêneo (53,6%) e resultado positivo para o TAT em 53,6%. A maioria das hipóteses diagnósticas foi única (60,7%), destacando-se a leucoplasia oral (71,4%). Na análise histopatológica, observou-se presença de ceratina em todos os casos (100%), sendo a forma ortoceratinizada a mais frequente (71,4%), acompanhada de hiperceratose (71,4%) e epitélio hiperplásico (71,4%). Todas as amostras apresentaram displasia epitelial (100%), com predominância do grau moderado (57,1%). O infiltrado inflamatório crônico esteve presente em 89,3% dos casos, com padrão liquenóide em 28,6%. A imuno-histoquímica revelou positividade para a proteína Ki-67 em 96,4% dos casos, com predomínio de marcação suprabasal (50%) e distribuição difusa em 71,4%. Todas as lesões analisadas apresentaram displasia epitelial, independentemente do resultado do TAT, não sendo observada associaçãoestatisticamente significativa entre os graus mais elevados de displasia e a positividade para o TAT. Conclusão: Na casuística analisada, observou-se ausência de correlação estatisticamente significativa entre o grau de displasia epitelial, a positividade no TAT e a imunoexpressão de Ki-67. No entanto, identificou-se associação significativa entre a expressão difusa de Ki-67 e os casos com TAT negativo. Tais achados reforçam a necessidade de novas investigações, a fim de aprofundar a compreensão das variáveis envolvidas e contribuir para o esclarecimento desse tema de reconhecida relevância clínica e científica
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Dissertação ( Mestrado em Odontologia) - Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Faculdade de Odontologia, Universidade Federal Fluminense, Niterói, 2025.https://app.uff.br/riuff/handle/1/43706As Desordens Orais Potencialmente Malignas (DOPMs) caracterizam-se por apresentar risco variável de transformação maligna, o qual depende do tipo específico de lesão diagnosticada, dentre essas desordens mais prevalentes, destaca-se a leucoplasia oral. O Teste de Azul de Toluidina (TAT) tem se mostrado uma ferramenta clínica auxiliar relevante na identificação da área mais apropriada para a realização de biópsia, por sua afinidade com ácidos nucleicos, evidenciando regiões de maior atividade celular. Complementarmente, a proteína Ki-67 é um marcador nuclear amplamente utilizado para a avaliação da proliferação celular. Objetivo: Analisar as características clínicas, histopatológicas e a expressão imuno-histoquímica da proteína Ki-67 em lesões leucoplásicas orais previamente submetidas ao TAT. Metodologia: Estudo observacional, retrospectivo, analítico e descritivo. A casuística deste estudo foi constituída por 28 pacientes que, ao serem submetidos ao exame físico intraoral, apresentaram lesões leucoplásicas orais. Todas as lesões foram submetidas ao TAT, seguida de biópsia incisional.. Os atendimentos dos pacientes e o processamento laboratorial ocorreram na Faculdade de Odontologia da Universidade Federal Fluminense (FOUFF), no período de fevereiro de 2022 a dezembro de 2024. A imuno-histoquímica foi realizada no Laboratório de Suporte à Pesquisa e Biologia Molecular da Divisão de Patologia (DIPAT), do INCA. Foram coletados os dados sociodemográficos e clínicos dos pacientes e análise histopatológica descritiva. Paralelamente, na avaliação imuno-histoquímica, procedeu-se à análise semiquantitativa da expressão da proteína Ki-67, considerando-se sua positividade, localização e padrão de distribuição no epitélio. Para avaliar as associações entre as variáveis, os dados clínicos, histopatológicos e imuno-histoquímicos foram organizados em planilha e submetidos à análise estatística, empregando-se o teste exato de Fisher ou o teste do Qui-quadrado, considerando-se significativos os valores de p ≤ 0,05. Resultados: A população de estudo foi composta por 28 pacientes, com predomínio do gênero feminino (67,9%) com idade superior a 60 anos (46,4%). A maioria dos pacientes era tabagista ou ex-tabagista (57,1%) e etilista (60,7%). Clinicamente, a região mais acometida foi a língua (ventre ou borda lateral) (25%), predominando lesões de sítio único (64,5%), com aspecto homogêneo (53,6%) e resultado positivo para o TAT em 53,6%. A maioria das hipóteses diagnósticas foi única (60,7%), destacando-se a leucoplasia oral (71,4%). Na análise histopatológica, observou-se presença de ceratina em todos os casos (100%), sendo a forma ortoceratinizada a mais frequente (71,4%), acompanhada de hiperceratose (71,4%) e epitélio hiperplásico (71,4%). Todas as amostras apresentaram displasia epitelial (100%), com predominância do grau moderado (57,1%). O infiltrado inflamatório crônico esteve presente em 89,3% dos casos, com padrão liquenóide em 28,6%. A imuno-histoquímica revelou positividade para a proteína Ki-67 em 96,4% dos casos, com predomínio de marcação suprabasal (50%) e distribuição difusa em 71,4%. Todas as lesões analisadas apresentaram displasia epitelial, independentemente do resultado do TAT, não sendo observada associaçãoestatisticamente significativa entre os graus mais elevados de displasia e a positividade para o TAT. Conclusão: Na casuística analisada, observou-se ausência de correlação estatisticamente significativa entre o grau de displasia epitelial, a positividade no TAT e a imunoexpressão de Ki-67. No entanto, identificou-se associação significativa entre a expressão difusa de Ki-67 e os casos com TAT negativo. Tais achados reforçam a necessidade de novas investigações, a fim de aprofundar a compreensão das variáveis envolvidas e contribuir para o esclarecimento desse tema de reconhecida relevância clínica e científicaPotentially Malignant Oral Disorders (PMODs) are characterized by a variable risk of malignant transformation, depending on the specific type of lesion diagnosed. Among the most prevalent PMODs, oral leukoplakia stands out. The Toluidine Blue Test (TBT) has proven to be a valuable clinical adjunct for identifying the most appropriate area for biopsy, due to its affinity for nucleic acids, highlighting regions of higher cellular activity. Additionally, the Ki-67 protein is a widely used nuclear marker for assessing cell proliferation. Objective: To analyze the clinical, histopathological, and immunohistochemical characteristics of the Ki-67 protein in oral leukoplakic lesions previously subjected to TBT.. Methodology: This is an observational, retrospective, analytical, and descriptive study. The sample consisted of 28 patients who, upon intraoral examination, presented with oral leukoplakic lesions. All lesions were subjected to TBT followed by incisional biopsy. Patient care and laboratory processing were carried out at the School of Dentistry of the Fluminense Federal University (FOUFF) between February 2022 and December 2024. Immunohistochemistry was performed at the Research Support and Molecular Biology Laboratory of the Division of Pathology (DIPAT) at the National Cancer Institute (INCA). Sociodemographic and clinical data were collected, along with descriptive histopathological analysis. In the immunohistochemical assessment, a semi-quantitative analysis of Ki-67 expression was performed, considering its positivity, location, and distribution pattern within the epithelium. To evaluate associations between variables, clinical, histopathological, and immunohistochemical data were compiled and submitted to statistical analysis using Fisher’s exact test or the Chi-square test, considering p-values ≤ 0.05 as statistically significant. Results: The study population consisted of 28 patients, predominantly female (67.9%), with over 60 years of age (46.4%). Most were smokers or former smokers (57.1%) and alcohol users (60.7%). Clinically, the most affected region was the tongue (ventral or lateral border) (25%), with a predominance of single-site lesions (64.5%), homogeneous appearance (53.6%), and positive TBT results in 53.6% of cases. Most diagnostic hypotheses were singular (60.7%), with oral leukoplakia accounting for 71.4%. Histopathological analysis revealed the presence of keratin in all cases (100%), with orthokeratinization as the most frequent form (71.4%), accompanied by hyperkeratosis (71.4%) and hyperplastic epithelium (71.4%). All samples showed epithelial dysplasia (100%), predominantly moderate grade (57.1%). Chronic inflammatory infiltrate was present in 89.3% of cases, with a lichenoid pattern in 28.6%. Immunohistochemistry showed positivity for Ki-67 in 96.4% of cases, with suprabasal staining in 50% and diffuse distribution in 71.4%. All lesions exhibited epithelial dysplasia regardless of TBT results, and no statistically significant association was observed between higher grades of dysplasia and TBT positivity. Conclusion: In the analyzed sample, no statistically significant correlation was observed between the degree of epithelial dysplasia, TBT positivity, and Ki-67 immunoexpression. However, a significant association was identified between diffuse Ki-67 expression and lesions with negative TBT results. These findings underscore the need for further studies to deepen the understanding of the variables involved and contribute to the elucidation of this clinically and scientifically relevant topic.92 f.CC-BY-NCinfo:eu-repo/semantics/openAccessAnálise histopatológica e imunomarcação com Ki-67 em lesões leucoplásicas orais avaliadas com o Teste de Azul de ToluidinaHistopathological analysis and Ki-67 immunostaining in oral leukoplakic lesions evaluated using the Toluidine Blue Testinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisLeucoplasia oralCâncer oralImuno-histoquímicaNeoplasial bucalLeucoplasia oralImuno-histoquímicaAzul de ToluidinaOral leukoplakiaOral cancerImmunohistochemistryMestrado acadêmicoUniversidade Federal FluminenseFaculdade de OdontologiaPrograma de Pós-Graduação em Odontologia2025Niterói, RJObjetivo 3. Assegurar uma vida saudável e promover o bem-estar para todos, em todas as idadesporreponame:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF)instname:Universidade Federal Fluminense (UFF)instacron:UFFORIGINALDissertação Odonto MARCELLE BAIRRAL ECARD 2025.pdfDissertação Odonto MARCELLE BAIRRAL ECARD 2025.pdfDissertaçãoapplication/pdf11873496https://app.uff.br/riuff/bitstream/1/43706/1/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20Odonto%20MARCELLE%20BAIRRAL%20ECARD%202025.pdf750532fb350ca224f7681bc46facd685MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81866https://app.uff.br/riuff/bitstream/1/43706/2/license.txt43cd690d6a359e86c1fe3d5b7cba0c9bMD521/437062026-07-23 16:26:39.968oai:app.uff.br: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ório InstitucionalPUBhttps://app.uff.br/oai/requestriuff@id.uff.bropendoar:21202026-07-23T19:26:39Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense (RIUFF) - Universidade Federal Fluminense (UFF)false
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