Avaliação da atividade in vitro anti-zika vírus de bis-naftoquinonas sintéticas

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Rosa, Stephanie Rangel da Silva
• Orientador(a): Pinto, Ana Maria Viana
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal Fluminense
• Departamento: Niterói
• Link de acesso: https://app.uff.br/riuff/handle/1/15819
• topic: Zika Vírus; Citotoxicidade; Bis-naftoquinonas; Atividade Antiviral; Zika virus; Naftoquinonas; Antivirais; Citotoxicidade Imunológica; Zika virus; Citotoxicity; Antiviral activity; Bis-naphthoquinones

A epidemia do Zika vírus (ZIKV) que ocorreu em 2015 e 2016, despertou um grande interesse de pesquisadores de instituições de saúde pública no Brasil e no mundo, especialmente em função do vírus ocasionar microcefalia, síndrome de Guillain-Barré e outras complicações neurológicas. O objetivo deste estudo foi avaliar primeiramente a citotoxicidade de uma série com dezesseis compostos em células de rim de embrião humano (HEK-293) e, posteriormente, testar a atividade antiviral dos compostos mais ativos. Dentre os compostos analisados, três moléculas (3g, 3h e 3i) não apresentaram toxicidade para as células HEK-293. A avaliação da citotoxicidade foi determinada pela concentração das bis-naftoquinonas capazes de matar 50% das células (CC50), utilizando três metodologias: o sal tetrazólico 3-(4,5-dimethylthiazol-2yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide (MTT), o vermelho neutro (VN) e o cristal violeta (CV). As células foram tratadas com diferentes concentrações das bis-naftoquinonas (3,125 μM; 6,25 μM; 12,5 μM; 25 μM; 50 μM e 100 μM). Os resultados do CC50 obtidos foram: MTT (3g = 355 ± 2,4; 3h = 355 ± 2,3; 3i = 325 ± 1,6); VN (3g = 365 ± 3,3; 3h = 345 ± 2,7; 3i = 347 ± 1,8); CV (3g = 371 ± 1,1; 3h = 375 ± 1,0; 3i = 355 ± 1,5). A avaliação da atividade antiviral das moléculas, frente uma amostra selvagem de Zika vírus, da variante brasileira BRAZIL-ZKV 2015 (GenBank: KU497555.1) foi testada, por ser uma cepa circulante no país. A concentração das bis-naftoquinonas capaz de inibir 50% da produção do ZIKV (EC50) foi determinada pela técnica de Reed Muench e os resultados obtidos foram: 3g (EC50 = 2,8 ±1,1); 3h (EC50 = 1,5 ± 1,0) e 3i (EC50 = 2,1 ± 1,1); A partir dos resultados do CC50 e EC50, foi determinado o índice de seletividade (IS), que estabelece a razão entre CC50/EC50 de cada bis-naftoquinona, nas diferentes metodologias de avaliação da citotoxicidade: 3g IS (MTT = 127; VN = 130; CV = 133); 3h IS (MTT= 237; VN = 230; CV = 250) e 3i IS (MTT = 155; VN= 165; CV = 169). Os resultados obtidos sugerem que as bis-naftoquinonas inibiram a etapa de replicação do genoma viral em diferentes proporções, com maiores inibições observadas para 3i e 3h, indicando que suas atividades antivirais envolveram a sinalização da transcrição do genoma viral. Foi observada uma redução expressiva na produção de virion em cultivo de células HEK-293 pelas moléculas. Portanto, de acordo com os resultados, todas as moléculas apresentaram potencial para serem utilizadas como antivirais, porém a bis-naftoquinona 3i desempenhou um resultado mais promissor.