Comparação do perfil catalítico e termodinâmico de diferentes β-glicosidases fúngicas

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Morais, Tobias Pereira de
• Orientador(a): Leite, Rodrigo Simões Ribeiro
• Banca de defesa: Fonseca, Gustavo Graciano , Minillo, Alessandro
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal da Grande Dourados
• Programa de Pós-Graduação: Programa de pós-graduação em Biologia Geral/Bioprospecção
• Departamento: Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Fermentação em estado sólido; Fungo filamentoso; Produção enzimática
• Palavras-chave em Inglês: Solid state fermentation; Filamentous fungi; Enzyme production
• Área do conhecimento CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERAL
• Link de acesso: http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/2014

As β-glicosidases são enzimas que catalisam a hidrólise da celobiose, dímero de glicose resultante da ação de enzimas celulolíticas sobre a molécula de celulose, liberando glicose livre que pode ser utilizada em processos fermentativos para produção de etanol, essas enzimas são capazes de romper ligações glicosídicas de terpenos encontrados na uva, aumentando a volatilidade destes compostos, e na desglicosilação de isoflavonas presentes na soja, favorecendo a absorção destes compostos pelo intestino humano. O objetivo do presente estudo foi otimizar parâmetros para o cultivo de Lichtheimia corymbifera (mesófilo) e Byssochlamys spectabilis (termofílico) para a produção de βglicosidases e comparar as propriedades catalíticas e termodinâmicas das enzimas parcialmente purificadas. A quantidade máxima de β-glicosidase produzida por L. corymbifera foi de 39 U / g de substrato seco (ou 3,9 U / mL) e a de B. spectabilis foi de 77 U / g (ou 7,7 U / mL). O pH e a temperatura ótimos foram 4,5 e 55° C e 4,0 e 50° C para a enzima L. corymbifera e B. spectabilis, respectivamente. A β-glicosidase produzida por L. corymbifera manteve-se estável em pH entre 4,0 e 7,5, enquanto a enzima de B. spectabilis manteve-se estável em pH entre 4,0 e 6,0. Em relação à termoestabilidade, a β-glicosidases produzida por B. spectabilis permaneceu estável por 1 ha 50° C, e a de L. corymbifera foi ativa por 1 ha 45° C. A determinação dos parâmetros termodinâmicos confirmou a maior termoestabilidade da enzima produzida pelo fungo termofílico B. spectabilis, que apresentou maiores valores de ΔH, energia de ativação para desnaturação (Ea) e meia-vida t (1/2). As enzimas eram estáveis na presença de etanol e eram inibidas competitivamente pela glicose. Estas características contribuem para a sua utilização na sacarificação e fermentação simultâneas da biomassa vegetal.