Reatividade sorológica e resposta de citocinas aos antígenos LID-1, NDO-LID e NDOHSA em pacientes com hanseníase e contatos intradomiciliares provenientes de regiões endêmicas do Rio de Janeiro e Minas Gerais.

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Marçal, Pedro Henrique Ferreira
• Orientador(a): Teixeira, Henrique Couto
• Banca de defesa: Sarno, Euzenir Nunes , Pinheiro, Roberta Olmo , Castro, Juciane Maria de Andrade , Bizarro, Heloisa D'Avila da Silva
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF)
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-graduação em Ciências Biológicas: Imunologia e Doenças Infecto-Parasitárias/Genética e Biotecnologia
• Departamento: ICB – Instituto de Ciências Biológicas
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Hanseníase; Sorodiagnóstico; Proteínas recombinantes; LID-1; NDOLID; NDO-HAS; Leprosy; Serodiagnosis; M. leprae antigens; Natural octyl disaccharide; Antibodies
• Área do conhecimento CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA
• Link de acesso: https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/11929

A hanseníase é um problema de saúde pública no Brasil e em diversas regiões do mundo. Dificuldades no diagnóstico resultam em atraso no tratamento, aumento de casos severos da doença e incapacidades. Ainda não existe um teste sorológico utilizado no diagnóstico. O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial diagnóstico de três antígenos específicos do M. leprae: (i) LID-1 ou “Leprosy IDRI diagnostic 1”; (ii) NDO-HSA e (iii) NDO-LID. Testes imunoenzimáticos (ELISA) baseados na detecção de anticorpos IgG, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 e IgM contra os antígenos LID-1, NDO-LID e NDO-HSA foram padronizados e avaliados utilizando soros de pacientes multibacilares (MB, n = 18) e paucibacilares (PB, n = 20), além de contatos intradomiciliares de pacientes multibacilares (CMB, n = 28) e paucibacilares (CPB, n = 20). Foram também analisados os níveis de IL-17, IFN-y, TNF-α, IL-10, IL-6, IL-4 e IL-2 após estímulo de PBMC com os antígenos LID-1, NDO-LID and NDO-HSA em pacientes com hanseníase MB (10) e PB (10) e indíviduos dos grupos CPB (08) e CMB (09). Os resultados mostraram que apenas pacientes multibacilares apresentam titulos elevados de anticorpos contra os três antígenos avaliados. Os anticorpos IgM apresentaram maior reatividade com o antígeno NDO-HSA, enquanto que anticorpos IgG apresentaram maior reatividade com o antígeno LID-1. O teste utilizando a combinação NDO-LID-1 favoreceu a detecção de anticorpos IgM e IgG. A análise da curva ROC mostrou que valores da área sob a curva (AUC) do antígeno NDO-HSA foi significativamente menor do que as AUC dos antígenos LID-1 e NDO-LID. Em relação à reatividade de subclasses de IgG, pacientes MB apresentaram reatividade de IgG1 > IgG3 > IgG2 > IgG4, contra os antígenos LID-1 e NDO-LID, em comparação com os grupos PB, CMB e CPB. O teste IgM anti-NDO-HSA frente a soros de pacientes MB apresentou sensibilidade de 70% e especificidade de 98%. Testes IgG anti-LID-1, anti-NDO-LID e anti-NDO-HSA, mostraram valores de sensibilidade e especificidade de 90 e 100, 95 e 98, 85 e 78, respectivamente. Testes IgG1 contra os antígenos LID-1, NDO-LID e NDOHSA mostraram sensibilidade de 90, 90 e 75, e especificidade de 100, 90 e 88, respectivamente. Com relação à contribuição das citocinas na infecção pelo M. leprae, os resultados demonstraram que a produção de IL-17 foi significativamente maior no grupo PB após estímulo com os antígenos LID-1, NDO-LID e NDO-HSA. Além disso, a estimulo com o antígeno LID-1 também levou ao aumento da produção de IFN, TNF e IL-2 neste mesmo grupo de indivíduos. Por outro lado, foi possível observar que o grupo MB apresentou maior produção de IL-6 após estimulo com LID-1, e IL-4 após estimulo com LID e NDO-LID. Esses resultados sugerem que testes sorológicos baseados na detecção de anticorpos IgG, IgG1 e IgM podem representar ferramentas úteis no diagnóstico da hanseníase. Neste sentido, os resultados indicam um melhor desempenho dos antígenos LID-1 e NDO-LID, em comparação ao antígeno NDO-HSA. E que a pesquisa de citocinas contra os antígenos em questão constitui bons biomarcadores para a caracterização das formas clínicas de hanseníase.