Efeito da melatonina na maturação in vitro sobre a expressão gênica e a qualidade de oócitos bovinos sob choque térmico

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Paula, Fabiane Angélica de Paiva
• Orientador(a): Alves, Nadja Gomes
• Banca de defesa: Camargo, Luiz Sérgio de Almeida, Souza, José Camisão de, Lima, Renato Ribeiro de, Gionbelli, Tathyane Ramalho Santos
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Lavras
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
• Departamento: Departamento de Medicina Veterinária
• País: brasil
• Palavras-chave em Português: Apoptose; Atividade mitocondrial; Estresse oxidativo; Maturação nuclear; Transcritos gênicos; Oócitos bovinos - Maturação; Apoptosis; Mitochondrial activity; Oxidative stress; Nuclear maturation; Gene transcripts; Bovine oocytes - Maturation
• Área do conhecimento CNPq: Medicina Veterinária
• Link de acesso: https://repositorio.ufla.br/handle/1/28437

Conduziu-se este trabalho, com o objetivo de avaliar o efeito da adição de melatonina ao meio de maturação in vitro (MIV) de oócitos bovinos submetidos ao choque térmico sobre sua qualidade e expressão de genes específicos. Foram aspirados folículos ovarianos, provenientes de ovários de abatedouro, com 3 a 8 mm de diâmetro. Os oócitos foram maturados sob choque térmico em meio MIV acrescido de melatonina nas concentrações 0; 10 -12 ;10 -9 ; 10 -6 e 10 -3 M. No controle positivo, os oócitos foram maturados na ausência de melatonina (NS) sob condição convencional. Foram realizadas de três a seis baterias por análise. Foi considerado o delineamento em blocos ao acaso, sendo os blocos formados pelas baterias. As taxas de maturação e de apoptose, a produção de espécies reativas de oxigênio (EROS) e a atividade mitocondrial foram analisadas por modelos lineares generalizados pelo procedimento GLIMMIX (SAS®). Na análise de expressão gênica, foi utilizado como calibrador o tratamento NS e a eficiência do primer foi calculada pelo programa LinRegPCR, com os resultados analisados pelo software REST®. A taxa de maturação não diferiu entre oócitos maturados sob choque térmico com diferentes concentrações de melatonina e não diferiu entre oócitos dos tratamentos 0 M de melatonina sob choque térmico e 0 M de melatonina sob condição convencional. As concentrações 10 -3 e 10 -9 M de melatonina reduziram a taxa de maturação em relação ao NS. A melatonina não influenciou a taxa de apoptose. A taxa de apoptose do grupo NS foi menor do que a observada no grupo 0 M, mas não diferiu da observada no tratamento 10 -3 M. A produção de EROS foi menor nos tratamentos 10 -9 , 10 -6 e 10 -3 M e maior nos tratamentos 0 e 10 -12 M. A atividade mitocondrial foi menor no tratamento 10 -3 M em comparação aos demais tratamentos sob choque térmico. A atividade mitocondrial dos oócitos maturados com 10 -12 , 10 -9 e 10 -6 M de melatonina não diferiu da observada nos oócitos do tratamento NS. Oócitos do grupo 0 M apresentaram maior atividade mitocondrial comparado ao grupo NS. Houve sub expressão dos genes C-MOS nos tratamentos 10 -9 e 10 -12 M de melatonina e de MAPK no tratamento 10 -12 M. Os tratamentos 10 -3 ; 10 -6 e 10 -9 M de melatonina apresentaram superexpressão do gene GDF9. Os genes ZAR1 e HSP40 não foram afetados pela adição de melatonina ao meio MIV ou pelo choque térmico. Conclui-se que a melatonina é capaz de proteger os oócitos contra prejuízos causados pelo choque térmico, sendo a concentração 10 -6M a mais eficiente.