Caracterização fenotípica e molecular de Staphylococcus aureus isolados de mastite bovina

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Salimena, Alessandra Pereira Sant’Anna
• Orientador(a): Piccoli, Roberta Hilsdorf
• Banca de defesa: Piccoli, Roberta Hilsdorf, Lange, Carla Christine, Dias, Disney Ribeiro, Brito, Maria Aparecida V. Paiva e, Cardoso, Patricia Gomes
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Lavras
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Microbiologia Agrícola
• Departamento: Departamento de Biologia
• País: brasil
• Palavras-chave em Português: CAP; icaAD; Bap; Cápsula bacteriana; Adesina; Proteína ativadora catabólica; Proteína associada a biofilme; Catabolite activator protein; Biofilm associated protein; Bacterial capsule; Adhesin
• Área do conhecimento CNPq: Microbiologia Agrícola
• Link de acesso: https://repositorio.ufla.br/handle/1/11079

A mastite é uma inflamação da glândula mamária, causada primariamente pela invasão e a multiplicação de bactérias no parênquima glandular, podendo ser considerada doença de maior significância econômica na pecuária leiteira mundial. Staphylococcus aureus é um patógeno frequentemente associado à mastite em rebanhos bovinos, em todo o mundo. A análise da diversidade genética de S. aureus e o estudo de diferentes cepas têm sido vistos como etapas indispensáveis para o controle mais efetivo da doença. Diversos fatores de virulência, tais como resistência à fagocitose, reconhecimento e ligação a proteínas da matriz extracelular do hospedeiro, polissacarídeos capsulares e capacidade de metabolizar substratos presentes no leite, contribuem para a diversidade genética de S. aureus e auxiliam no estabelecimento das infecções causadas pelo patógeno. Mediante algumas condições, os microrganismos se aderem, interagem com diversas superfícies e iniciam o crescimento celular, sendo, então, formado o biofilme. O presente estudo foi realizado com o objetivo de detectar a presença de genes envolvidos na produção de polissacarídeos capsulares e a formação de biofilmes em S. aureus isolados a partir de amostras de leite bovino de três diferentes regiões do Brasil, bem como a produção de polissacarídeos capsulares e biofilmes, in vitro. Foi avaliada a presença dos genes cap, icaAD e bap, pela técnica de PCR. A detecção e a quantificação da produção de polissacarídeos capsulares foram realizadas utilizando-se antissoros e ensaios de ELISA. A análise da produção de biofilme foi realizada em microplacas de poliestireno estéreis, de fundo plano com tampa. Todos os 159 isolados de S. aureus investigados apresentaram o gene cap, tendo 80% apresentado o gene cap5 e 20% apresentado o gene cap8. Sessenta e nove por cento dos isolados apresentaram polissacarídeo capsular (PC) in vitro e, dentre estes, 58% foram PC5 e 11%, PC8. Todos os isolados apresentaram os genes icaA e icaD, e 95,6% dos isolados apresentaram o gene bap. Dos 159 isolados analisados, 97,5% eram produtores de biofilme. Detectouse associação significativa entre o genótipo e o fenótipo capsular e a quantidade de formação de biofilme. Estes resultados indicam elevado potencial de patogenicidade entre S. aureus isolados de leite bovino coletado de três regiões diferentes do Brasil.