Criopreservação e vitrificação de sêmen de curimba (Prochilodus lineatus): uso de diferentes crioprotetores na solução diluidora

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2014
Autor(a) principal: Vasconcelos, Ana Carina Nogueira
Orientador(a): Murgas, Luís David Solis
Banca de defesa: Mian, Gláucia Frasnelli, Felizardo, Viviane de Oliveira, Victorio, Sheila Cristina da Silva
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS
Programa de Pós-Graduação: DMV - Programa de Pós-graduação
Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
Departamento: Não Informado pela instituição
País: BRASIL
Palavras-chave em Português:
Preservação espermática
Qualidade seminal
Toxicidade
Crioprotetor
Sperm preservation
Semen quality
Toxicity
Cryoprotectant
Área do conhecimento CNPq:
CNPQ_NÃO_INFORMADO
Link de acesso: https://repositorio.ufla.br/handle/1/1910
Resumo: Dissertação apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, área de concentração em Ciências Veterinárias, para a obtenção do título de Mestre.
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spelling 2014-07-31T18:54:45Z2014-07-31T18:54:45Z20142014-02-202014VASCONCELOS, A. C. N. Criopreservação e vitrificação de sêmen de curimba (Prochilodus lineatus): uso de diferentes crioprotetores na solução diluidora. 2014. 73 p. Dissertação (Mestrado em Ciências Veterinárias) - Universidade Federal de Lavras, Lavras, 2014.https://repositorio.ufla.br/handle/1/1910Dissertação apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, área de concentração em Ciências Veterinárias, para a obtenção do título de Mestre.The first experiment aimed at comparing the toxicity and the effect of the combination of intra and extracellular cryoprotectants, in sperm cells of curimba (Prochilodus lineatus) subjected to cryopreservation. Aliquots of 400 µl of semen from 19 males were diluted in four cryoprotectant solutions (DMSO+egg yolk, lactose+DMSO, methanol+egg yolk and lactose+methanol) and placed in 0.50 ml sterile straws. The samples were placed for 24 hours in liquid nitrogen vapor and, later, immersed in the cryogenic fluid for 10 days. After thawing, the highest motility rate and duration was obtained by using lactose as extracellular cryoprotectant, independent of its combination (p<0.05). There was no significant difference between treatments when analyzing sperm morphology after thawing (p>0.05). Considering the effects of the tested treatments, we recommend the use of lactose as extracellular cryoprotectant, added with DMSO or methanol, since these combinations presented the highest motility rates and durations as well as low morphological change rate after thawing. The second experiment aimed at developing a simplified protocol for curimba semen vitrification using different methanol concentrations (10 and 20%). The acute toxicity of this internal cryoprotectant was tested and we compared vitrifications with and without methanol in the diluting solution. Aliquots of 20 µl of semen from 23 males were placed in 0.25 ml sterile straws and directly immersed into liquid nitrogen. After thawing, we measured sperm motility and morphological changes in spermatozoa. The dilution of the semen in cryoprotectant solutions significantly reduced sperm motility (p<0.0001). When compared to the solution containing only Belltsville Thawing Solution (BTS), the presence of methanol in the medium reduced sperm motility rate and duration. After thawing, there was no motility in any of the treatments and the morphological analysis showed a high incidence of curled tail in the samples which were vitrified in the presence of methanol. These data demonstrate the need to improve the technique for this species and show that sperm morphology is not sufficient to assess the damage caused during the vitrification process.Com o primeiro experimento objetivou-se comparar a toxicidade e o efeito da combinação de crioprotetores intra e extracelulares, nas células espermáticas de curimba (Prochilodus lineatus) submetidas à criopreservação. Alíquotas de 400 µL de sêmen, de 19 reprodutores, foram diluídas em quatro soluções crioprotetoras (DMSO+gema de ovo, DMSO+lactose, metanol+gema de ovo e metanol+lactose) e envasadas em palhetes de 0,5 ml. As amostras foram colocadas durante 24 horas em vapor de nitrogênio líquido e após esse período, foram imersas nesse fluido criogênico por 10 dias. Após o descongelamento, a maior taxa e duração de motilidade foram obtidas utilizando a lactose como crioprotetor extracelular, independente da sua combinação (p<0,05). Não houve diferença significativa entre os tratamentos quando se analisou a morfologia espermática após o descongelamento (p>0,05). Considerando os efeitos dos tratamentos testados, recomenda-se o uso da lactose, como crioprotetor extracelular, acrescida de DMSO ou metanol, visto que essas combinações apresentaram as maiores taxas e durações de motilidade e baixo índice de alterações morfológicas após o descongelamento. Com o segundo experimento objetivou-se desenvolver um protocolo simplificado para a vitrificação de sêmen de curimba utilizando diferentes concentrações de metanol (10 e 20%). A toxicidade aguda desse crioprotetor interno foi testada e comparou-se à vitrificação com e sem metanol na solução diluidora. Alíquotas de 20 µL de sêmen, de 23 reprodutores, foram colocadas em palhetas de 0,25 ml e imersas diretamente em nitrogênio líquido. Após o descongelamento das amostras, mensurou-se a motilidade espermática e as alterações morfológicas nos espermatozoides. A diluição do sêmen em soluções crioprotetoras reduziu significativamente a motilidade espermática (p<0,0001). Quando comparadas à solução contendo apenas o diluidor Belltsville Thawing Solution (BTS), a presença do metanol no meio reduziu a taxa e a duração da motilidade espermática. Após o descongelamento, não houve motilidade em nenhum dos tratamentos e a análise morfológica mostrou uma alta incidência de cauda enrolada nas amostras que foram vitrificadas na presença do metanol. Esses dados demonstram a necessidade de melhoria da técnica para essa espécie e mostram que a morfologia espermática não é suficiente para avaliar os danos causados durante o processo de vitrificação.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Ciências VeterináriasUNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRASDMV - Programa de Pós-graduaçãoPrograma de Pós-Graduação em Ciências VeterináriasUFLABRASILCNPQ_NÃO_INFORMADOPreservação espermáticaQualidade seminalToxicidadeCrioprotetorSperm preservationSemen qualityToxicityCryoprotectantCriopreservação e vitrificação de sêmen de curimba (Prochilodus lineatus): uso de diferentes crioprotetores na solução diluidorainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisMurgas, Luís David SolisMian, Gláucia FrasnelliFelizardo, Viviane de OliveiraVictorio, Sheila Cristina da SilvaVasconcelos, Ana Carina Nogueirainfo:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFLAinstname:Universidade Federal de Lavras (UFLA)instacron:UFLAORIGINALDISSERTAÇÃO Criopreservação e vitrificação de sêmen de curimba (Prochilodus lineatus) _ uso de diferentes crioprotetores na solução diluidora.pdfDISSERTAÇÃO Criopreservação e vitrificação de sêmen de curimba (Prochilodus lineatus) _ uso de diferentes crioprotetores na solução diluidora.pdfapplication/pdf364599https://repositorio.ufla.br/bitstreams/6e965889-4b38-4b65-8cf8-d46444ca307c/download82b4f6b4b12c4a24eb9c0f2c8f3015ceMD52trueAnonymousREADLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-8953https://repositorio.ufla.br/bitstreams/53790167-aa4d-4709-8add-4824bba34a2e/download760884c1e72224de569e74f79eb87ce3MD53falseAnonymousREADTEXTDISSERTAÇÃO Criopreservação e vitrificação de sêmen de curimba (Prochilodus lineatus) _ uso de diferentes crioprotetores na solução diluidora.pdf.txtDISSERTAÇÃO Criopreservação e vitrificação de sêmen de curimba (Prochilodus lineatus) _ uso de diferentes crioprotetores na solução diluidora.pdf.txtExtracted texttext/plain102919https://repositorio.ufla.br/bitstreams/b1452597-5b9a-4527-a4d1-c17776eeaeba/download3d77ddcfb9e79d00113e5a5db03afac0MD54falseAnonymousREADTHUMBNAILDISSERTAÇÃO Criopreservação e vitrificação de sêmen de curimba (Prochilodus lineatus) _ uso de diferentes crioprotetores na solução diluidora.pdf.jpgDISSERTAÇÃO Criopreservação e vitrificação de sêmen de curimba (Prochilodus lineatus) _ uso de diferentes crioprotetores na solução diluidora.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg2878https://repositorio.ufla.br/bitstreams/9b1e7e4d-6e4f-4692-983b-c6294fb0e44d/download17d19930b24b8299a58c9d567b4cb36cMD55falseAnonymousREAD1/19102025-10-06 11:27:53.956open.accessoai:repositorio.ufla.br:1/1910https://repositorio.ufla.brRepositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufla.br/server/oai/requestnivaldo@ufla.br || repositorio.biblioteca@ufla.bropendoar:2025-10-06T14:27:53Repositório Institucional da UFLA - Universidade Federal de Lavras (UFLA)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