Construção, avaliação da imunogenicidade e potencial protetor em modelo murino, de diferentes construções do Vaccinia virus Ankara modificado (MVA) expressando a proteína E de Dengue virus sorotipo 3

• Ano de defesa: 2014
• Autor(a) principal: Barbara Resende Quinan
• Orientador(a): Flavio Guimaraes Fonseca
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Palavras-chave em Português: Microbiologia
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-9HKH5V

A Dengue é, atualmente, a mais importante doença humana causada por um arbovírus. O vírus da Dengue (DENV) possui quatro sorotipos (DENV 1-4) e estimase que seja responsável por 390 milhões de infecções por ano em todo o mundo, sendo que dessas, pelo menos 2 milhões resultam nas formas graves da doença. Apesar dos altos números de casos por ano e de, aproximadamente, a metade da população do mundo estar sob-risco de infecção, não existem drogas antivirais para o tratamento da doença e, muito menos, vacinas aprovadas como prevenção. Dentre as técnicas utilizadas para o desenvolvimento de vacinas, a utilização de vetores virais recombinantes baseados no Vaccinia Ankara Modificado (MVA) vem se mostrado promissora. Dessa forma, esse trabalho realizou a construção de diversos vírus MVA recombinantes, todos expressando a proteína E de DENV-3, porém com diferentes elementos inseridos nas extremidades do gene exógeno. O objetivo foi avaliar qual desses elementos foi capaz de melhorar a imunogenicidade do vírus recombinante ou a detecção da proteína exógena. Para que a avaliação da resposta celular TCD8+ fosse possível, 2 epítopos para a proteína E de DENV-3 em camundongos C57BL/6 foram identificados e descritos. Assim, a avaliação da resposta TCD8+ em camundongos imunizados com os diferentes vírus recombinantes demonstrou que os vírus MVA recombinantes que possuem o peptídeo sinal natural da proteína E e, portanto, endereçam essa proteína para o retículo endoplasmático, apresentam uma melhor resposta. Avaliações da resposta humoral também demonstraram que esses vírus contendo essa sequência sinal são capazes de estimular uma produção robusta de anticorpos anti-E, enquanto os vírus sem o peptídeo sinal não induzem nenhuma produção de anticorpos. Além disso, análises de proteção em camundongos C57BL/6 sugerem que a imunização com essa construção mais imunogênica é protetora. Assim, esses resultados demonstram a importância dessa sequência de peptídeo sinal e, no futuro, essa construção mais imunogênica poderá ser utilizada para a construção de MVA recombinantes para os outros sorotipos de DENV. Esses, por sua vez, poderão ser utilizados para a geração de vacinas tetravalentes contra o DENV.