Avaliação da resposta imune de células T em infecção humana pelo vírus dengue com ênfase em células T reguladoras

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Marcela Helena Gonçalves Pereira
• Orientador(a): Helton da Costa Santiago
• Banca de defesa: Ana Maria Caetano de Faria, Kenneth John Gollob
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Bioquímica e Imunologia
• Departamento: ICB - DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E IMUNOLOGIA
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Dengue; Tempestade de Citocinas; Células Tregs
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/55493

A dengue é uma doença viral aguda causada por quatro sorotipos diferentes (DENV1, DENV2, DENV3 ou DENV4) e muito presente em países tropicais e subtropicais. A doença pode ser classificada como dengue sem sinais de alarme (DSA), dengue com sinais de alarme (DCA) e dengue grave (DG), que pode ser fatal. Especula-se que o processo inflamatório exacerbado seja o responsável pela ocorrência da DG, porém pouco se sabe sobre os mecanismos que regulam o processo inflamatório em infecções por dengue. As células T reguladoras (Tregs) são importantes reguladoras da resposta inflamatória através da secreção de citocinas anti-inflamatórias, como a IL-10, ou por inibição direta das células efetoras através de seus receptores como CD200, LAP, GITR, PD-1, entre outros. O estudo de mecanismos de regulação mediada por Tregs pode fornecer informações sobre como o hospedeiro controla a inflamação em uma infecção aguda prevenindo complicações. A fim de avaliar o perfil de resposta imunológica, as PBMC foram isoladas de amostras de sangue de indivíduos saudáveis e infectados com vírus dengue e mantidas congeladas a -196°C até o momento de uso. Após descongelamento, as células foram cultivadas com estímulos antigênicos e submetidas à citometria de fluxo multi-paramétrica. Observou-se que os indivíduos DSA mostraram um aumento significativo na produção de citocinas inflamatórias como IFNγ e TNFα, oriundos de células T específicas de dengue, 7 dias após o início dos sintomas. Além disso, as células T de pacientes DSA exibiram produção de IL-10 específica ao dengue 30 dias após o início dos sintomas, em contraste com os sujeitos DCA. Apesar de não haver diferença na frequência das Tregs (CD4+ CD25highCD127lowFoxP3+), foram observadas entre as classificações de dengue, que as células Tregs de pacientes DSA expressam frequências mais elevadas de CD200 e GITR quando comparado ao grupo DCA. Muito importante, a população de Tregs específica à dengue produzindo níveis elevados de IL-10 foi detectada em indivíduos DSA, mas não em indivíduos DCA. Outras moléculas reguladoras, como PD-1 e LAP, não foram diferentes entre os grupos. Indivíduos DSA durante a defervescência exibiram maior produção de IFNγ e TNFα por células T específicas ao dengue quando comparados aos pacientes DCA. Além disso, a resposta pró-inflamatória específica do dengue foi associada com mecanismos de regulação (IL-10, CD200 e GITR), sugerindo que a resposta imune equilibrada é importante para a evolução clínica da dengue favorável.