Emprego da eletroextração multifásica para extração de antidepressivos tricíclicos em fluido oral e determinação por UHPLC-MS/MS e PS-MS

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Millena Christie Ferreira Avelar
• Orientador(a): Ricardo Mathias Orlando
• Banca de defesa: Ricardo Mathias Orlando, Clésia Cristina Nascentes, Adriana Nori de Macedo, Mariana Ramos de Almeida
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Química
• Departamento: ICX - DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Antidepressivos tricíclicos TCAs; Cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas sequencial; Paper spray; Eletroextração; Saliva; Espectrometria de massas; Tricyclic antidepressants TCAs; Ultra high performance liquid chromatography; Mass spectrometry; Electroextraction
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/35312

Os antidepressivos tricíclicos (TCAs) são substâncias usadas para o tratamento de distúrbios de ansiedade e depressão. E apesar de sua eficácia, apresentam muitos efeitos colaterais. Devido a isso e também à janela terapêutica estreita desses fármacos faz-se necessário a sua determinação em amostras biológicas. Para isso, um sistema multipoços de eletroextração (EE) multifases foi empregado para extração dos TCAs: doxepina, imipramina, amitriptilina, nortriptilina e clomipramina em fluido oral. Em seguida, o extrato obtido foi analisado por cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas sequencial (UHPLC-MS/MS) além da espectrometria de massas com ionização por paper spray (PS-MS). A influência do campo elétrico na extração foi avaliada, sendo esse um fator crucial para uma boa recuperação dos TCAs. Os analitos foram extraídos de uma solução doadora composta pela amostra e acetonitrila 1:1 (v/v), migrando através de uma membrana livre de 1-octanol, chegando à fase aceptora. Essa última foi constituída de papel cromatográfico embebido em ácido acético 400 mmol L-1 possuindo uma ponta triangular propícia para técnica de PS-MS. Estudos univariados foram realizados para otimização dos parâmetros de preparo de amostra: tipo de solvente de dessorção dos analitos, tipos de papel e de eletrólito usados na fase aceptora, solvente orgânico usado como filtro, presença de carreador no filtro orgânico e tipo de solvente orgânico na fase doadora. Uma otimização multivariada também foi realizada para avaliação do tempo de extração, diferença de potencial elétrico e percentual de solvente orgânico na fase doadora. Após otimização, o percentual de extração alcançado para cada um dos analitos foi cerca de 55% com um tempo de extração de 10 minutos a 300 V e percentual de acetonitrila de 50% (v/v). O método EE-UHPLC-MS/MS otimizado foi validado na faixa de concentração de TCAs de 2 a 12 ng mL-1, com LD de 0,13 a 0,25 ng mL-1 e LQ de 0,44 a 0,84 ng mL-1. A precisão e exatidão foram avaliadas em três níveis de concentração (2, 6 e 10 ng mL-1) alcançando coeficientes de variação menores que 26% e recuperações maiores que 75%. O método validado foi aplicado a amostras reais de fluido oral fortificadas, e os resultados tiveram baixa variação entre as amostras de diferentes voluntários. O método mostrou-se seletivo e ausente de efeito matriz. Uma nova configuração para a eletroextração foi realizada a fim de reduzir fontes de variação no posicionamento das fases aceptoras e ainda ser facilmente acoplada à espectrometria de massas com ionização por paper spray. Nessa configuração o percentual de extração de TCAs foi de 35% e os coeficientes de variação para a análise por PS-MS foram menores que 20%.