Avaliação das alterações promovidas pela infecção pelo vírus da zika em culturas primárias de células da glia

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Priscila Grazieli Lopes
• Orientador(a): Juliana Alves da Silva
• Banca de defesa: Álvaro Gil Araujo Ferreira, Luciene Bruno Vieira
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Neurociências
• Departamento: ICB - DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E IMUNOLOGIA
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: ZIKV; glia; TNF-α; IL-1β; morte neuronal
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/32819

Infecções neuronais pelo vírus da Zika (ZIKV) têm sido objeto de várias pesquisas nos últimos anos, onde diversos estudos buscam elucidar a correlação entre a infecção por este vírus e síndromes neurológicas, tais como, microcefalia e Guillain Barrè. Um recente trabalho do nosso grupo (Olmo et al., 2017) revelou que infecções por ZIKV induzem processos não autônomos de morte neuronal, in vitro, que por sua vez parecem ser regulados por citocinas pró-inflamatórias e sinalização via glutamato. É importante ressaltar que esses resultados foram realizados em culturas predominantemente neuronais onde pouquíssima ou nenhuma contribuição de astrócitos e micróglias foram encontrados. Devido ao papel crucial de células da glia no metabolismo de neutrotransmissores e regulação de processos inflamatórios no cérebro, o presente estudo tem o propósito de investigar o efeito da infecção por ZIKV em culturas primárias de células da glia e a participação de fatores liberados por estas culturas em processos relacionados a morte neuronal. Diferentes aspectos de resposta celular foram avaliados em culturas primárias de células da glia infectadas com ZIKV por 24 e 48 horas, tais como, carga viral, proliferação de micróglias e alterações de expressão gênica de genes específicos. Nossas análises detectaram carga viral nos tempos de 24 e 48 horas pós infecção, demonstrando que o ZIKV é capaz de infectar células da glia em culturas primárias, o que nos forneceria uma opção de modelo in vitro para o estudo da neuropatogenicidade do ZIKV. A infecção das culturas de células da glia promoveu um aumento da produção de Fator de necrose tumoral (TNF-α) e interleucina 1β (IL-1β), no decurso da infecção, embora não tenha promovido gliose. Análises complementares de morte neuronal também foram realizadas para verificar o efeito do tratamento de culturas primárias de neurônios com um meio condicionado proveniente de culturas de glia infectadas com ZIKV. Estes resultados indicaram que neurônios tratados por 24h com meio condicionado proveniente de culturas gliais infectadas, não apresentaram alterações em índices de morte celular quando comparados aos controles sem infecção. Uma vez que as estratégias estabelecidas no presente trabalho fornecem um modelo in vitro interessante para avaliar consequências da infecção do ZIKV em diferentes células do SNC, novos experimentos serão realizados a fim de investigar o efeito dos fatores liberados por células da glia infectadas por ZIKV na viabilidade de neurônios, utilizando diferentes períodos de incubação e em diferentes fases de diferenciação.