Seleção de peptídeos com potencial aplicação no diagnóstico de geohelmintíases

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Jordânia Costa Pinto
• Orientador(a): Ricardo Toshio Fujiwara
• Banca de defesa: Silvio Santana Dolabella, Stefan Michael Geiger, João Luis Reis Cunha
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Parasitologia
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Geohelmintíases; Imunodiagnóstico; Biomarcador
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/52404

As geohelmintíases estão entre as doenças tropicais de maior prevalência no mundo, afetando aproximadamente 1,5 bilhão de pessoas. Entre as espécies de importância epidemiológica, se destacam, Ascaris lumbricoides, Trichiuris trichiura, Ancylostoma duodenale, Necator americanus e Strongyloides stercoralis. Esses helmintos são facilmente transmitidos através da ingestão de ovos ou exposição às larvas, que são liberados nas fezes de indivíduos infectados. As helmintíases causam grande impacto a saúde pública, afetando o aprendizado e desenvolvimento principalmente de crianças em fase escolar e pré-escolar. Nesse contexto, o controle dessas parasitoses se torna necessário e o diagnóstico preciso assume um papel fundamental nesse processo. O diagnóstico dos geohelmintos tem se baseado em técnicas parasitológicas, moleculares e imunológicas. Entretanto, os métodos disponíveis têm se monstrado falhos e de difícil aplicação em campo, sendo necessário o aprimoramento das técnicas atuais e a busca de novos métodos diagnósticos que sejam sensíveis, específicos e que não necessitem de aparelhagem especializada. No imunodiagnóstico são utilizados anticorpos específicos ou antígenos puros e fracionados do parasito para detecção de infecções. Nos últimos anos, o uso de extrato de antígenos de patógenos em ensaios de imunodiagnóstico tem sido substituído por peptídeos ou proteínas recombinantes com maior especificidade diagnóstica. O objetivo do presente trabalho foi selecionar alvos conservados para o diagnóstico sorológico de nematódeos, assim como alvos específicos para espécies epidemiologicamente relevantes na infecção humana. A partir de ferramentas in silico foi realizada a análise do proteoma predito, com base nos genes identificados em sequenciamentos de genoma dos nematódeos de interesse. Dessas análises foram identificados 1160 peptídeos que apresentaram alto score de predição de epítopos lineares de células B, entre estes, foram selecionados alvos específicos e conservados entre as espécies de interesse e ausentes em outros helmintos. Esses peptídeos foram submetidos a testes de reatividade por immunoblotting, com soros de indivíduos sabidamente positivos para as espécies de interesses, confirmados por técnicas parasitológicas, afim de filtrar os alvos mais promissores. No total foram selecionados 107 peptídeos alvos, sendo que 80 específicos (13 para ancilostomídeos, 41 para Ascaris sp., e 26 para S. stercoralis) e 27 conservados em mais de uma espécie. Os diversos alvos identificados apresentam grande potencial para o aprimoramento do diagnóstico das geohelmintíases.