Análise do perfil fenotípico e funcional de leucócitos do sangue periférico de crianças com síndrome nefrótica idiopática

• Ano de defesa: 2014
• Autor(a) principal: Fabio Tadeu Lourenço Guimarães
• Outros Autores: Gustavo Eustáquio Brito Alvim de Melo
• Orientador(a): Ana Cristina Simoes e Silva
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Minas Gerais
• Palavras-chave em Português: Receptores de quimiocinas; Citometria de fluxo; Integrinas; Síndrome nefrótica idiopática; Células T reguladoras; Citocinas
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-9UJJRV

A síndrome nefrótica idiopática (SNI) se caracteriza por proteinúria maciça, hipoproteinemia e edema. Considerando as características imunopatológicas da SNI, o presente estudo teve como objetivo analisar o perfil fenotípico e funcional de leucócitos do sangue periférico de crianças com SNI. Foram estudados 44 pacientes pediátricos com SNI, provenientes da Unidade de Nefrologia Pediátrica do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais e 10 crianças e adolescentes saudáveis utilizados como grupo controle (CON). Os pacientes foram subdivididos de acordo com os valores da proteinúria em urina de 24 horas no momento da coleta em grupo com proteinúria elevada (PE200mg/24 horas) e proteinúria reduzida (PR<200mg/24 horas) e de acordo com a resposta à corticoterapia em córtico-sensíveis (SNCS) e córtico-resistentes/dependentes (SNCR). Os pacientes e controles foram submetidos à coleta de sangue para análise ex-vivo do perfil fenotípico de leucócitos circulantes por citometria de fluxo. Foi também analisada a produção in vitro de citocinas pró e anti-inflamatórias em populações específicas de linfócitos do sangue periférico. Foram comparados os dados obtidos em pacientes e no grupo controle e de acordo com a intensidade da proteinúria. Além disso, foram avaliados o comportamento migratório e de ativação celular e o percentual de células T com perfil regulador em linfócitos de pacientes com síndrome nefrótica e do grupo controle. Tais parâmetros foram comparados nos subgrupos de SNCS e SNCR, bem como conforme a proteinúria. Os resultados mostraram aumento no percentual de linfócitos TCD4+TNF-+ e redução no percentual de linfócitos TCD8+IFN-+ nos pacientes com SNI, independente dos níveis de proteinúria. Nos pacientes com PE, houve aumento no percentual de linfócitos TCD4+ marcados para as citocinas pró-inflamatórias IFN-, TNF- e IL-17 quando comparado ao grupo controle. Somente os pacientes com PE apresentaram aumento no percentual de linfócitos TCD8+TNF-+ em comparação ao grupo controle. Os achados sugerem que os pacientes com proteinúria persistente apresentam resposta pró-inflamatória mais acentuada e mediada por linfócitos T, principalmente pelos linfócitos T CD4+, mesmo sob uso de medicação anti-inflamatória. A comparação dos pacientes subdivididos conforme a resposta à corticoterapia mostrou redução nos percentuais de linfócitos B e células NK nos pacientes com SNCR quando comparado ao grupo CON. Já o grupo com SNCS apresentou apenas redução no percentual de células NKT quando comparado ao CON. Em linfócitos T CD4+, a expressão de FoxP3 nos linfócitos TCD4+ foi significativamente maior nos pacientes do grupo SNCS quando comparado aos grupos CON e SNCR. O percentual de células CD4+CTLA4+ foi maior no grupo SNCS em relação ao SNCR. Foi observada redução na expressão da integrina CD18 em linfócitos TCD3+ e TCD8+ no grupo SNCS quando comparado ao CON. A análise dos receptores de quimiocinas, no entanto, revelou um aumento no percentual de linfócitos marcados para CCR2 e CXCR4 tanto no grupo SNCS quanto no SNCR quando comparados ao grupo controle. O aumento no percentual de células marcadas para o receptor CCR5 foi observado apenas no grupo SNCR comparado ao CON. A redução da expressão de CD18 na superfície de linfócitos TCD3 e TCD8, bem como as evidências de um perfil regulador em linfócitos TCD4 presente apenas em pacientes com SNCS sugerem que o controle da resposta inflamatória nesse grupo de pacientes possa estar relacionado a alterações nesses parâmetros. O aumento na expressão de receptores de quimiocinas CCR2 e CCR4 em todos os pacientes com SNI pode ser explicado pela natureza inflamatória da doença. Por outro lado, apenas o grupo com SNCR apresentou aumento na expressão de CCR5, indicando atividade infamatória maior ainda nesse grupo de pacientes. Em conjunto, nossos resultados sugerem que a capacidade de ativar mecanismos reguladores da resposta imune esteja associada à sensibilidade aos corticosteroides.