Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2019
Autor(a) principal: Paiva, Thales Henrique de
Orientador(a): Cota, Renata Guerra de Sá
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Schistosoma mansoni
Proteínas
Expressão gênica
Link de acesso: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/12094
Resumo: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
id UFOP_32eff4351f54220fa4c4ceb2b58e2ea3
oai_identifier_str oai:localhost:123456789/12094
network_acronym_str UFOP
network_name_str Repositório Institucional da UFOP
repository_id_str
spelling Paiva, Thales Henrique deCota, Renata Guerra de SáJeremias, Wander de JesusBorges, William de CastroCota, Renata Guerra de Sá2020-04-23T17:53:52Z2020-04-23T17:53:52Z2019PAIVA, Thales Henrique de. Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni. 2019. 45 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) – Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2019.http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/12094Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.A esquistossomose é uma doença parasitária de grande importância econômica e social afetando aproximadamente 200mi/ano de pessoas no mundo. Causada pelo nematódeo do gênero Schistosoma (especificamente neste estudo o S. mansoni por ser o de maior prevalência no Brasil), continua sendo um desafio para a comunidade científica sua compreensão ampla e descoberta de novas tecnologias diagnósticas e terapêuticas. Este estudo realizado trata da caracterização in vitro e in silico da proteína talin bem como avaliar os efeitos ultraestruturais após silenciamento in vitro por seu microRNA intrônico miR-190 em vermes adultos. As proteínas Talinas são uma família de proteínas grandes adaptadoras que conectam uma família de moléculas de adesão celular chamadas integrinas aos filamentos de F-actina do citoesqueleto. Há dois tipos de genes Talin em vertebrados. Talin 1 é essencial para o processo de adesão celular mediado por integrinas enquanto o papel do Talin 2 é desconhecido. Duas entradas da proteína talina previamente anotadas no genoma do S. mansoni, identificadas como Smp_167010 e Smp_142630 foram objeto desse estudo. Análises de predição estrutural in silico foram feitas e observado um padrão diferencial de domínios funcionais (PFAM), bem como alto grau de similaridade e identidade com seus ortólogos (SWISS-MODEL) e os dados indicam que as duas entradas não são oriundas de splicing alternativo e sim de diferenciação e especiação com valores de bootstrap próximo ou atingindo 100 (filogenia). Amostras de vermes adultos machos e fêmeas, cercárias, esquistossômulos mecanicamente transformados (EMT3,5h – EMT-24h) e ovos de S. mansoni foram utilizados para traçar o perfil de expressão gênica por qRT-PCR usando o gene constitutivo EIF4E como controle endógeno. A expressão gênica relativa foi determinada pelo método 2 –ΔCq. A análise estatística foi realizada utilizando o teste one-way ANOVA (Tukey) com P<0,01. Foi observado um perfil de expressão gênica diferencial em Smp_167010 e Smp_142630 tanto entre as fases de vida do verme quanto entre os dois genes. Foi ainda observado alterações ultraestruturais significativas em vermes adultos machos expostos ao miR-190 em comparação ao controle com a presença de descamação, bolhas e fissuras enquanto nenhuma alteração em fêmeas foi identificado. Em conclusão vimos que o S. mansoni possui dois genes talin que indicam ter grande importância em sua biologia e que há retroregulação do gene talin por seu microRNA intrônico miR-190 que quando ofertado em meio livre interfere em processos biológicos e causa danos estruturais visíveis.Schistosomiasis is a parasitic disease of great economic and social importance, affecting approximately 200 million people per year worldwide. Caused by the genus nematode Schistosoma (S. mansoni is the genus in this work for having the highest prevalence in Brazil), its wide understanding and discovery of new diagnostic and therapeutic technologies remains a major challenge for the scientific community. This study deals with the in vitro and in silico characterization of the talin protein as well as assessing the ultrastructural effects after in vitro silencing by its miR-190 intronic microRNA in coupled adult worms. Talin proteins are a family of large adaptor proteins that connects a family of cell-binding molecules called integrins to the cytoskeleton F-actin filaments. There are two types of Talin genes in vertebrates. Talin1 is essential for the cell adhesion process mediated by integrins while the role of Talin2 is unknown. Two entries of the talin protein registered in the S. mansoni genome identified as Smp_167010 and Smp_142630 were the object of this study. Structural prediction analyzes in silico were performed and observed as a differential pattern of functional domains (PFAM), as well as a high degree of similarity and identity with its orthologs (SWISS-MODEL) and the data observed as two inputs are not derived from alternative splicing and rather, differentiation and specification with bootstrap values close to or reaching 100 (phylogeny). Samples of adult worms, male and female, cercariae, mechanically transformed schistosomula (EMT-3.5h - EMT-24h) and S. mansoni eggs were used to trace the gene expression profile by qRT-PCR using the constitutive gene EIF4E as endogenous control. Relative gene expression was determined by the 2 –ΔCq method. A statistical analysis was performed using the one-way ANOVA test (Tukey) with P <0.01. A differential expression profile was observed in Smp_167010 and Smp_142630 both between the phases of the worm's life and between the two genes. It was also observed ultrastructural changes applied in adult worms, exposed to miR190, compared to the control with the presence of flaking, bubbles and cracks, while the following changes were used. In conclusion that S. mansoni has two important genes that detect great importance in its biology and that there is a genetic regression of its gene by its miR-190 intronic microRNA, which when activated in the free medium interferes with clinical processes and causes visible damage.Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 09/04/2020 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite o uso para fins comerciais nem a adaptação.info:eu-repo/semantics/openAccessSchistosoma mansoniProteínasExpressão gênicaCaracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFOPinstname:Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)instacron:UFOPLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-8924http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/5/license.txt62604f8d955274beb56c80ce1ee5dcaeMD55CC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; charset=utf-849http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/2/license_url4afdbb8c545fd630ea7db775da747b2fMD52license_textlicense_texttext/html; charset=utf-80http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/3/license_textd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD53license_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-80http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/4/license_rdfd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD54ORIGINALDISSERTAÇÃO_CaracterizaçãoGenesTalin.pdfDISSERTAÇÃO_CaracterizaçãoGenesTalin.pdfapplication/pdf4247682http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/1/DISSERTA%c3%87%c3%83O_Caracteriza%c3%a7%c3%a3oGenesTalin.pdf3581c5e34f133a7f5433d2b735cdda9eMD51123456789/120942020-04-23 13:53:52.754oai:localhost: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ório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.ufop.br/oai/requestrepositorio@ufop.edu.bropendoar:32332020-04-23T17:53:52Repositório Institucional da UFOP - Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.
title Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.
spellingShingle Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.
Paiva, Thales Henrique de
Schistosoma mansoni
Proteínas
Expressão gênica
title_short Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.
title_full Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.
title_fullStr Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.
title_full_unstemmed Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.
title_sort Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni.
author Paiva, Thales Henrique de
author_facet Paiva, Thales Henrique de
author_role author
dc.contributor.referee.pt_BR.fl_str_mv Cota, Renata Guerra de Sá
Jeremias, Wander de Jesus
Borges, William de Castro
dc.contributor.author.fl_str_mv Paiva, Thales Henrique de
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Cota, Renata Guerra de Sá
contributor_str_mv Cota, Renata Guerra de Sá
dc.subject.por.fl_str_mv Schistosoma mansoni
Proteínas
Expressão gênica
topic Schistosoma mansoni
Proteínas
Expressão gênica
description Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
publishDate 2019
dc.date.issued.fl_str_mv 2019
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2020-04-23T17:53:52Z
dc.date.available.fl_str_mv 2020-04-23T17:53:52Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.citation.fl_str_mv PAIVA, Thales Henrique de. Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni. 2019. 45 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) – Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2019.
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/12094
identifier_str_mv PAIVA, Thales Henrique de. Caracterização de genes talin e os efeitos do silenciamento por RNAi usando miR-190 em Schistosoma mansoni. 2019. 45 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) – Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2019.
url http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/12094
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFOP
instname:Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)
instacron:UFOP
instname_str Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)
instacron_str UFOP
institution UFOP
reponame_str Repositório Institucional da UFOP
collection Repositório Institucional da UFOP
bitstream.url.fl_str_mv http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/5/license.txt
http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/2/license_url
http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/3/license_text
http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/4/license_rdf
http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/12094/1/DISSERTA%c3%87%c3%83O_Caracteriza%c3%a7%c3%a3oGenesTalin.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv 62604f8d955274beb56c80ce1ee5dcae
4afdbb8c545fd630ea7db775da747b2f
d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e
d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e
3581c5e34f133a7f5433d2b735cdda9e
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFOP - Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)
repository.mail.fl_str_mv repositorio@ufop.edu.br
_version_ 1797950904030199808

Registros relacionados