Investigação do papel funcional do lncRNA SBF2-AS1 no tratamento com resveratrol ou crisina em células de carcinoma de bexiga.
| Ano de defesa: | 2024 |
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Resumo: | Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. |
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Oliveira, Edymara dos AnjosSilva, Glenda Nicioli daMinicucci, Eliana MariaSouza, Thiago Belarmino deSilva, Glenda Nicioli daAlmeida, Tamires Cunha2025-03-27T19:41:44Z2024OLIVEIRA, Edymara dos Anjos. Investigação do papel funcional do lncRNA SBF2-AS1 no tratamento com resveratrol ou crisina em células de carcinoma de bexiga. 2024. 62 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) – Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2024.https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/20049Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto.O câncer de bexiga ocupa o décimo lugar em incidência mundial e apresenta altas taxas de recorrência e progressão. Os protocolos quimioterápicos atualmente utilizados para o seu tratamento podem promover toxicidades significativas aos pacientes. Na busca por novas terapias, os compostos derivados de plantas têm recebido atenção crescente, como é o caso do resveratrol (RES) e da crisina (CRIS) que tem mostrado resultados promissores no câncer de bexiga. Além disso, evidências relacionaram a funcionalidade de RNAs longos não codificantes (lncRNAs) à carcinogênese. Dentre os lncRNAs de importância, destaca-se o SBF2-AS1, já associado à malignidade tumoral no câncer. No entanto, o papel potencial de SBF2-AS1 na progressão do câncer de bexiga ainda é desconhecido. Nosso estudo teve como objetivo investigar o papel de SBF2-AS1 em células de carcinoma de bexiga e seu potencial como um novo alvo biológico concomitante ao tratamento com RES ou CRIS. As células de câncer de bexiga das linhagens J82 e UM-UC-3 foram tratadas com três concentrações de RES (25 μM, 50 μM e 100 μM) ou CRIS (10 μM, 20 μM e 40 μM) isoladamente ou em combinação com dois siRNAs específicos para silenciar SBF2-AS1. O teste de citotoxicidade (XTT) foi usado para medir a viabilidade celular após o tratamento e os efeitos a longo prazo foram avaliados pelo ensaio de sobrevivência clonogênica. A morfologia celular e a capacidade migratória foram observadas por microscopia de luz e a cinética celular foi avaliada por citometria de fluxo. Os resultados do teste de citotoxicidade e formação de colônias mostraram que nas linhagens celulares estudadas os siRNAs levaram a uma redução na viabilidade e proliferação celular em relação aos tratamentos com RES e CRIS, enquanto o tratamento combinado exibiu uma redução maior na viabilidade celular do que o tratamento sozinho com siRNA ou RES, embora não houve diferenças nos ensaios combinados com CRIS. Além disso, os grupos combinados com RES apresentaram parada em fase G1/G0 na análise de progressão do ciclo celular. A microscopia óptica mostrou uma redução na densidade celular e alterações na morfologia nos tratamentos com RES ou CRIS sozinhos, siRNAs ou combinados em comparação com o controle não tratado. A migração também foi reduzida após todos os tratamentos. Em conclusão, nosso estudo mostrou que o lncRNA SBF2-AS1 foi relacionado à proliferação celular, migração e sobrevida em longo prazo nas células e que a terapia combinada com silenciamento de SBF2-AS1 e RES pode aumentar o potencial antitumoral em relação aos tratamentos isolados.Bladder cancer ranks tenth in worldwide incidence and has high rates of recurrence and progression. Chemotherapy protocols currently used can promote significant toxicities to patients. In the search for new therapies, plant-derived compounds have received increasing attention, such as resveratrol (RES) and chrysin (CRIS), which have shown promising results in bladder cancer. Furthermore, evidence has linked the functionality of long non-coding RNAs (lncRNAs) to carcinogenesis. Among the lncRNAs of importance, SBF2-AS1 stands out, already associated with tumor malignancy in cancer. However, the potential role of SBF2-AS1 in bladder cancer progression is still unknown. Our study aimed to investigate the role of SBF2-AS1 in bladder carcinoma cells and its potential as a novel biological target concomitant with RES or CRIS treatment. Bladder cancer cells from lines J82 and UM-UC3 were treated with three concentrations of RES (25 μM, 50 μM and 100 μM) or CRIS (10 μM, 20 μM and 40 μM) alone or in combination with two specific siRNAs to silence SBF2-AS1. Cytotoxicity test (XTT) was used to measure cell viability after treatment and long-term effects were evaluated by clonogenic survival assay. Cell morphology and migratory capacity were observed by light microscopy and cell kinetics were evaluated by flow cytometry. The results of the cytotoxicity and colony formation test showed that in the cell lines studied, siRNAs caused a reduction in cell viability and proliferation in relation to RES and CRIS treatments, while the combined treatment exhibited a greater reduction in cell viability than the treatment alone with siRNA or RES, although there were no differences in the combined assays with CRIS. Furthermore, the groups combined with RES showed G1/G0 phase arrest in the analysis of cell cycle progression. Light microscopy showed a reduction in cell density and changes in morphology in treatments with RES or CRIS alone, siRNAs or combined compared to the untreated control. Migration was also reduced after all treatments. In conclusion, our study showed that lncRNA SBF2-AS1 was related to cell proliferation, migration and long-term survival in cells and that combined therapy with silencing of SBF2-AS1 and RES can increase the antitumor potential compared to isolated treatments.Attribution-ShareAlike 3.0 United Stateshttp://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/us/Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 21/03/2024 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante.info:eu-repo/semantics/openAccessRNA longo não codificanteBexiga - câncerAgentes antineoplásicosFlavonóidesResveratrolInvestigação do papel funcional do lncRNA SBF2-AS1 no tratamento com resveratrol ou crisina em células de carcinoma de bexiga.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFOPinstname:Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)instacron:UFOPORIGINALDISSERTAÇÃO_InvestigaçãoPapelFuncional.pdfDISSERTAÇÃO_InvestigaçãoPapelFuncional.pdfapplication/pdf2607577https://www.repositorio.ufop.br/bitstreams/d957e750-d15f-4b53-9379-bd648100e7b2/downloada7539a406abce757c6593cc03a868436MD51trueAnonymousREADCC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-81160https://www.repositorio.ufop.br/bitstreams/b2dc371d-e09a-45af-a847-3a5990a4e5b1/download4c46c1685887261330e9f754a74247dbMD52falseAnonymousREADLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748https://www.repositorio.ufop.br/bitstreams/3c4f6a3c-b145-44ba-8b37-821e830ed8b3/downloadbb9bdc0b3349e4284e09149f943790b4MD53falseAnonymousREADTEXTDISSERTAÇÃO_InvestigaçãoPapelFuncional.pdf.txtDISSERTAÇÃO_InvestigaçãoPapelFuncional.pdf.txtExtracted texttext/plain102500https://www.repositorio.ufop.br/bitstreams/f320b22a-199a-4f51-b85b-f9d576c27601/downloadd2135a6897c140f1d672cada2d6146a7MD54falseAnonymousREADTHUMBNAILDISSERTAÇÃO_InvestigaçãoPapelFuncional.pdf.jpgDISSERTAÇÃO_InvestigaçãoPapelFuncional.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg3064https://www.repositorio.ufop.br/bitstreams/684ef803-257f-4c06-b230-f56bf68037aa/download5fcf2d0eaa0ee507707818a148d3e238MD55falseAnonymousREAD123456789/200492025-03-27 16:41:49.157http://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/us/abertoopen.accessoai:repositorio.ufop.br:123456789/20049https://www.repositorio.ufop.brRepositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.ufop.br/oai/requestrepositorio@ufop.edu.bropendoar:32332025-03-27T19:41:49Repositório Institucional da UFOP - Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)falseTk9URTogUExBQ0UgWU9VUiBPV04gTElDRU5TRSBIRVJFClRoaXMgc2FtcGxlIGxpY2Vuc2UgaXMgcHJvdmlkZWQgZm9yIGluZm9ybWF0aW9uYWwgcHVycG9zZXMgb25seS4KCk5PTi1FWENMVVNJVkUgRElTVFJJQlVUSU9OIExJQ0VOU0UKCkJ5IHNpZ25pbmcgYW5kIHN1Ym1pdHRpbmcgdGhpcyBsaWNlbnNlLCB5b3UgKHRoZSBhdXRob3Iocykgb3IgY29weXJpZ2h0IG93bmVyKSBncmFudHMgdG8gRFNwYWNlIFVuaXZlcnNpdHkgKERTVSkgdGhlIG5vbi1leGNsdXNpdmUgcmlnaHQgdG8gcmVwcm9kdWNlLCB0cmFuc2xhdGUgKGFzIGRlZmluZWQgYmVsb3cpLCBhbmQvb3IgZGlzdHJpYnV0ZSB5b3VyIHN1Ym1pc3Npb24gKGluY2x1ZGluZyB0aGUgYWJzdHJhY3QpIHdvcmxkd2lkZSBpbiBwcmludCBhbmQgZWxlY3Ryb25pYyBmb3JtYXQgYW5kIGluIGFueSBtZWRpdW0sIGluY2x1ZGluZyBidXQgbm90IGxpbWl0ZWQgdG8gYXVkaW8gb3IgdmlkZW8uCgpZb3UgYWdyZWUgdGhhdCBEU1UgbWF5LCB3aXRob3V0IGNoYW5naW5nIHRoZSBjb250ZW50LCB0cmFuc2xhdGUgdGhlIHN1Ym1pc3Npb24gdG8gYW55IG1lZGl1bSBvciBmb3JtYXQgZm9yIHRoZSBwdXJwb3NlIG9mIHByZXNlcnZhdGlvbi4KCllvdSBhbHNvIGFncmVlIHRoYXQgRFNVIG1heSBrZWVwIG1vcmUgdGhhbiBvbmUgY29weSBvZiB0aGlzIHN1Ym1pc3Npb24gZm9yIHB1cnBvc2VzIG9mIHNlY3VyaXR5LCBiYWNrLXVwIGFuZCBwcmVzZXJ2YXRpb24uCgpZb3UgcmVwcmVzZW50IHRoYXQgdGhlIHN1Ym1pc3Npb24gaXMgeW91ciBvcmlnaW5hbCB3b3JrLCBhbmQgdGhhdCB5b3UgaGF2ZSB0aGUgcmlnaHQgdG8gZ3JhbnQgdGhlIHJpZ2h0cyBjb250YWluZWQgaW4gdGhpcyBsaWNlbnNlLiBZb3UgYWxzbyByZXByZXNlbnQgdGhhdCB5b3VyIHN1Ym1pc3Npb24gZG9lcyBub3QsIHRvIHRoZSBiZXN0IG9mIHlvdXIga25vd2xlZGdlLCBpbmZyaW5nZSB1cG9uIGFueW9uZSdzIGNvcHlyaWdodC4KCklmIHRoZSBzdWJtaXNzaW9uIGNvbnRhaW5zIG1hdGVyaWFsIGZvciB3aGljaCB5b3UgZG8gbm90IGhvbGQgY29weXJpZ2h0LCB5b3UgcmVwcmVzZW50IHRoYXQgeW91IGhhdmUgb2J0YWluZWQgdGhlIHVucmVzdHJpY3RlZCBwZXJtaXNzaW9uIG9mIHRoZSBjb3B5cmlnaHQgb3duZXIgdG8gZ3JhbnQgRFNVIHRoZSByaWdodHMgcmVxdWlyZWQgYnkgdGhpcyBsaWNlbnNlLCBhbmQgdGhhdCBzdWNoIHRoaXJkLXBhcnR5IG93bmVkIG1hdGVyaWFsIGlzIGNsZWFybHkgaWRlbnRpZmllZCBhbmQgYWNrbm93bGVkZ2VkIHdpdGhpbiB0aGUgdGV4dCBvciBjb250ZW50IG9mIHRoZSBzdWJtaXNzaW9uLgoKSUYgVEhFIFNVQk1JU1NJT04gSVMgQkFTRUQgVVBPTiBXT1JLIFRIQVQgSEFTIEJFRU4gU1BPTlNPUkVEIE9SIFNVUFBPUlRFRCBCWSBBTiBBR0VOQ1kgT1IgT1JHQU5JWkFUSU9OIE9USEVSIFRIQU4gRFNVLCBZT1UgUkVQUkVTRU5UIFRIQVQgWU9VIEhBVkUgRlVMRklMTEVEIEFOWSBSSUdIVCBPRiBSRVZJRVcgT1IgT1RIRVIgT0JMSUdBVElPTlMgUkVRVUlSRUQgQlkgU1VDSCBDT05UUkFDVCBPUiBBR1JFRU1FTlQuCgpEU1Ugd2lsbCBjbGVhcmx5IGlkZW50aWZ5IHlvdXIgbmFtZShzKSBhcyB0aGUgYXV0aG9yKHMpIG9yIG93bmVyKHMpIG9mIHRoZSBzdWJtaXNzaW9uLCBhbmQgd2lsbCBub3QgbWFrZSBhbnkgYWx0ZXJhdGlvbiwgb3RoZXIgdGhhbiBhcyBhbGxvd2VkIGJ5IHRoaXMgbGljZW5zZSwgdG8geW91ciBzdWJtaXNzaW9uLgo= |
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