Purificação de proteínas utilizando membranas de poliacrilonitrila modificadas com quitosana
| Ano de defesa: | 2025 |
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| Tipo de documento: | Tese |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
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| Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Pernambuco
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| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pos Graduacao em Fisica
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Não Informado pela instituição
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| País: |
Brasil
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/62681 |
Resumo: | A purificação de proteínas é essencial para aplicações biomédicas e industriais, mas os métodos atuais frequentemente enfrentam desafios como baixa eficiência, alto custo e seleti- vidade limitada. Para superar essas limitações, desenvolvemos membranas de Poliacrilonitrila (PAN) eletrofiadas com Quitosana (Cs) e avaliamos sua capacidade de capturar Albumina de Soro Bovino (BSA) e Imunoglobulina G (IgG) a partir de soluções aquosas. As membranas foram caracterizadas por meio de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), espectrosco- pia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), testes de tração, Análise de Área Superficial (BET), espectroscopia de Dispersão de Raios X (EDS) e medições de Ângulo de Contato (AC). As membranas de PAN/Cs exibiram fibras lisas e uniformes, com diâmetro médio de 0,454 μm. Tanto as soluções de BSA quanto de IgG foram analisadas por meio de espectroscopia Ultravioleta-Visível (UV-Vis) para acompanhar a variação da concentração das proteínas no meio. A capacidade máxima de adsorção de BSA (q max e ) foi de 75,61 mg/g para PAN/Cs e 21,17 mg/g para PAN, enquanto para IgG, q max e foi de 28,83 mg/g para PAN/Cs e 19,77 mg/g para PAN. Um destaque importante deste trabalho é que as membranas de PAN/Cs demonstraram ser capazes de realizar a separação seletiva de BSA e IgG conjun- tamente presentes em soluções binárias, um avanço significativo para aplicações biomédicas e industriais. A eficiência de eluição das membranas de PAN/Cs atingiu 89,13% para BSA e 62,16% para IgG, mantendo a qualidade e a integridade das proteínas recuperadas, como confirmado pela Eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil-sulfato de sódio (SDS- PAGE). Esses resultados posicionam as membranas de PAN/Cs eletrofiadas como materiais promissores para purificação de proteínas de maneira eficiente, econômica e seletiva. |
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As membranas foram caracterizadas por meio de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), espectrosco- pia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), testes de tração, Análise de Área Superficial (BET), espectroscopia de Dispersão de Raios X (EDS) e medições de Ângulo de Contato (AC). As membranas de PAN/Cs exibiram fibras lisas e uniformes, com diâmetro médio de 0,454 μm. Tanto as soluções de BSA quanto de IgG foram analisadas por meio de espectroscopia Ultravioleta-Visível (UV-Vis) para acompanhar a variação da concentração das proteínas no meio. A capacidade máxima de adsorção de BSA (q max e ) foi de 75,61 mg/g para PAN/Cs e 21,17 mg/g para PAN, enquanto para IgG, q max e foi de 28,83 mg/g para PAN/Cs e 19,77 mg/g para PAN. Um destaque importante deste trabalho é que as membranas de PAN/Cs demonstraram ser capazes de realizar a separação seletiva de BSA e IgG conjun- tamente presentes em soluções binárias, um avanço significativo para aplicações biomédicas e industriais. A eficiência de eluição das membranas de PAN/Cs atingiu 89,13% para BSA e 62,16% para IgG, mantendo a qualidade e a integridade das proteínas recuperadas, como confirmado pela Eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil-sulfato de sódio (SDS- PAGE). Esses resultados posicionam as membranas de PAN/Cs eletrofiadas como materiais promissores para purificação de proteínas de maneira eficiente, econômica e seletiva.Protein purification is essential for biomedical and industrial applications, but current methods often face challenges such as low efficiency, high cost, and limited selectivity. To over- come these limitations, we developed electrospun Polyacrylonitrile (PAN) membranes modified with Chitosan (Cs) and evaluated their capacity to capture Bovine Serum Albumin (BSA) and Immunoglobulin G (IgG) from aqueous solutions. The membranes were characterized using Scanning Electron Microscopy (SEM), Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR), ten- sile tests, Surface Area Analysis (BET), Energy Dispersive X-ray Spectroscopy (EDS), and Contact Angle (CA) measurements. PAN/Cs membranes exhibited smooth and uniform fibers with an average diameter of 0.454 μm. Both BSA and IgG solutions were analyzed using Ultraviolet-Visible (UV-Vis) spectroscopy to monitor the concentration variations of the pro- teins in the medium. The maximum adsorption capacity (q max e ) for BSA was 75.61 mg/g for PAN/Cs and 21.17 mg/g for PAN, while for IgG, q max e was 28.83 mg/g for PAN/Cs and 19.77 mg/g for PAN. A significant highlight of this work is that PAN/Cs membranes demonstrated the ability to perform selective separation of BSA and IgG simultaneously present in binary solutions, representing a major advance for biomedical and industrial applications. The elution efficiency of PAN/Cs membranes reached 89.13% for BSA and 62.16% for IgG, maintaining the quality and integrity of the recovered proteins, as confirmed by Sodium Dodecyl Sulfate- Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE). These results position electrospun PAN/Cs membranes as promising materials for efficient, economical, and selective protein purification.porUniversidade Federal de PernambucoPrograma de Pos Graduacao em FisicaUFPEBrasilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessPurificação de proteínasAlbumina de soro bovino (BSA)Imunoglobulina G (IgG)Membranas eletrofiadasPurificação de proteínas utilizando membranas de poliacrilonitrila modificadas com quitosanainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisdoutoradoreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPECC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8811https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/62681/2/license_rdfe39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34MD52ORIGINALTESE Gizele das Graças Farias de Andrade.pdfTESE Gizele das Graças Farias de Andrade.pdfapplication/pdf12696597https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/62681/1/TESE%20Gizele%20das%20Gra%c3%a7as%20Farias%20de%20Andrade.pdf32cb09a1495ad89f7403ceb68ae805e4MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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