Efeitos imunorregulatórios do extrato de Ascaris suum e de sua associação com N-acetil-L-cisteína sobre perfil de ativação de linfócitos hepáticos e expressão de genes fibrogênicos na hepatite autoimune experimenta

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2020
Autor(a) principal: SILVA, Roeckson Carlos Peixoto
Orientador(a): SOUZA, Valdenia Maria Oliveira de
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso embargado
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Pernambuco
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pos Graduacao em Medicina Tropical
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/38239
Resumo: O tratamento com extrato de vermes adultos de Ascaris suum (ASC) atenuou o dano hepático na hepatite autoimune experimental (HAE). A associação da N-acetil-L-cisteína (NAC) ao esquema terapêutico resultou em incremento do efeito hepatoprotetor. Entretanto, a imunomodulação e as alterações celulares no fígado não estão esclarecidas. Neste estudo, foram avaliados os efeitos da associação entre o ASC e a NAC, no modelo de HAE induzida por concanavalina A (ConA), no perfil de ativação dos linfócitos (CD28, CD40L, CTLA-4, FoxP3, produção de IL-10 por linfócitos T e B), na expressão de marcadores fibrogênicos (αSMA, Col1a1, PPAR-γ, ARG1, FIZZ1) e alterações histomorfométricas (leucócitos e colágeno) no fígado. Secundariamente, a produção de TGF-β e a cinética dos isótipos IgG1 e IgG2a anti-Ascaris foi avaliada frente ao tratamento com ASC. Para isso, camundongos BALB/c receberam intravenosamente 20 mg/kg de ConA e 3 grupos de animais foram formados: (1) HAE, recebeu apenas ConA; 2) HAE+ASC+NAC: após 30 minutos da indução da HAE, os animais receberam NAC (200 mg/Kg, 12/12h, por 6 dias, via oral) e ASC (1 mg, via intraperitoneal) após 2 horas; 3) HAE+ASC: receberam somente ASC. Como grupo controle, animais sem HAE receberam PBS. Foi observada alta expressão CD28 e CD40L e sutil aumento de CTLA-4 no grupo HAE, porém no grupo HAE+ASC houve diminuição da expressão destas moléculas. Em relação ao grupo controle, houve menor expressão de ARG1 no grupo HAE+ASC+NAC. Em comparação ao grupo HAE, houve aumento da expressão de Col1a1, porém diminuição da expressão de FIZZ1 no grupo tratado com ASC, com ou sem NAC. Houve maior frequência de linfócitos T CD4+CD25+FoxP3+ e CD4+ IL-10+ , bem como redução do infiltrado inflamatório e produção de colágeno, no grupo HAE+ASC+NAC. Não houve diferença entre os grupos nos níveis de linfócitos B produtores de IL-10, expressão de α-SMA e PPAR-γ. O ASC induz TGF-β e estimula a produção precoce de IgG1 e tardia de IgG2a. Os resultados apontam que ASC favorece a imunossupressão na HAE por limitar a expressão de moléculas coestimulatórias em linfócitos T e diminuir a expressão do gene fibrogênico FIZZ1, bem como por estimular níveis mais altos de IgG1 e TGF-β, sugerindo uma via adicional de controle da resposta Th1 na HAE. Entretanto, associação com a NAC foi necessária para a expansão de linfócitos T CD4+CD25+FoxP3+ e T CD4+ IL10+ e atenuação do processo inflamatório e da deposição de colágeno.
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spelling SILVA, Roeckson Carlos Peixotohttp://lattes.cnpq.br/4838408922152686http://lattes.cnpq.br/8056939101932406SOUZA, Valdenia Maria Oliveira de2020-10-05T20:17:23Z2020-10-05T20:17:23Z2020-02-27SILVA, Roeckson Carlos Peixoto. Efeitos imunorregulatórios do extrato de Ascaris suum e de sua associação com N-acetil-L-cisteína sobre perfil de ativação de linfócitos hepáticos e expressão de genes fibrogênicos na hepatite autoimune experimenta. 2020. Tese (Doutorado em Medicina Tropical) - Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2020.https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/38239O tratamento com extrato de vermes adultos de Ascaris suum (ASC) atenuou o dano hepático na hepatite autoimune experimental (HAE). A associação da N-acetil-L-cisteína (NAC) ao esquema terapêutico resultou em incremento do efeito hepatoprotetor. Entretanto, a imunomodulação e as alterações celulares no fígado não estão esclarecidas. Neste estudo, foram avaliados os efeitos da associação entre o ASC e a NAC, no modelo de HAE induzida por concanavalina A (ConA), no perfil de ativação dos linfócitos (CD28, CD40L, CTLA-4, FoxP3, produção de IL-10 por linfócitos T e B), na expressão de marcadores fibrogênicos (αSMA, Col1a1, PPAR-γ, ARG1, FIZZ1) e alterações histomorfométricas (leucócitos e colágeno) no fígado. Secundariamente, a produção de TGF-β e a cinética dos isótipos IgG1 e IgG2a anti-Ascaris foi avaliada frente ao tratamento com ASC. Para isso, camundongos BALB/c receberam intravenosamente 20 mg/kg de ConA e 3 grupos de animais foram formados: (1) HAE, recebeu apenas ConA; 2) HAE+ASC+NAC: após 30 minutos da indução da HAE, os animais receberam NAC (200 mg/Kg, 12/12h, por 6 dias, via oral) e ASC (1 mg, via intraperitoneal) após 2 horas; 3) HAE+ASC: receberam somente ASC. Como grupo controle, animais sem HAE receberam PBS. 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In this study, the effects of the association between ASC and NAC were evaluated in the model of EAH induced by concanavalin A (ConA), in the lymphocyte activation profile (CD28, CD40L, CTLA-4, FoxP3, production of IL-10 by T and B lymphocytes), in the expression of fibrogenic markers (α-SMA, Col1a1, PPAR-γ, ARG1, FIZZ1), and in histomorphometric changes (leukocytes and collagen) in the liver. Secondly, the production of TGF-β and the kinetics of the IgG1 and IgG2a anti-Ascaris isotypes were evaluated against treatment with ASC. For this, BALB/c mice received 20 mg/kg of ConA intravenously and 3 groups of animals were formed: (1) EAH, received only ConA; 2) EAH+ASC+NAC: after 30 minutes of EAH induction, the animals received NAC (200 mg/Kg, 12/12h, for 6 days, orally) and ASC (1 mg, intraperitoneally) after 2 hours; 3) EAH+ASC: received only ASC. As a control group, animals without EAH received PBS. High CD28 and CD40L expression and a subtle increase in CTLA-4 were observed in the EAH group, but in the EAH+ASC group there was a decrease in the expression of these molecules. In relation to the control group, there was a less expression of ARG1 in the EAH+ASC+NAC group. In comparison to the EAH group, there was an increase in Col1a1 expression, but a decrease in FIZZ1 expression in the group treated with ASC, with or without NAC. There was a higher frequency of CD4+CD25+FoxP3+ and CD4+ IL-10+ T lymphocytes, as well as reduced inflammatory infiltrate and collagen production, in the EAH+ASC+NAC group. There was no difference in the levels of IL-10 producing B lymphocytes, expression of α-SMA and PPAR-γ between groups. ASC induces TGF-β and early production of IgG1 and late IgG2a The results indicate that ASC favors immunosuppression in EAH by limiting the expression of costimulatory molecules in T lymphocytes and decrease the expression fibrogenic FIZZ1 gene, as well as for stimulating higher levels of IgG1 and TGF-β, suggest that an additional Th1 response control route exists in EAH. However NAC was necessary for the expansion of CD4+CD25+FoxP3+ T lymphocytes, production of IL-10, attenuation of the inflammatory process and collagen depositionporUniversidade Federal de PernambucoPrograma de Pos Graduacao em Medicina TropicalUFPEBrasilAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/embargoedAccessAscaris suumFibroseImunomodulaçãoHepatite autoimuneN-acetil-LcisteínaEfeitos imunorregulatórios do extrato de Ascaris suum e de sua associação com N-acetil-L-cisteína sobre perfil de ativação de linfócitos hepáticos e expressão de genes fibrogênicos na hepatite autoimune experimentainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisdoutoradoreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPEORIGINALTESE Roeckson Carlos Peixoto Silva.pdfTESE Roeckson Carlos Peixoto Silva.pdfapplication/pdf989126https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/38239/1/TESE%20Roeckson%20Carlos%20Peixoto%20Silva.pdf84fff78151c625d6cf71b8cc7842a4e3MD51CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; 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