Avaliação da toxicidade e da atividade anti-inflamatória dos extratos de Laguncularia racemosa (L.) C. F. Gaertn em modelo de lesão pulmonar aguda induzida por lipopolissacarídeo em camundongos

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2023
Autor(a) principal: MARCELINO NETO, Pedro Paulo
Orientador(a): PONTUAL, Emmanuel Viana
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso embargado
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Pernambuco
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pos Graduacao em Ciencias Biologicas
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Combretaceae
Antioxidante
Anti-inflamatório
Lesão pulmonar aguda
Link de acesso: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/60211
Resumo: Arquivo trocado em 21/07/2025 conforme solicitação do autor e autorização da PROPG via processo.
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Gaertn (Combretaceae), conhecida popularmente como “mangue branco”, é amplamente distribuída no ecossistema manguezal e usada na medicina popular para tratamento de diarreia, feridas bucais e febre. Neste contexo, o objetivo desta Tese foi avaliar a toxicidade e as atividades antioxidante e anti-inflamatória dos extratos hexânico (EHLr), acetato de etila (EALr) e etanólico (EELr) das folhas de L. racemosa frente à LPA induzida por LPS em camundongos. Os extratos foram preparados pelo método de maceração e o seu perfil fitoquímico analisado por cromatografia em camada delgada (CCD), cromatografia gasosa acoplada à espectrofotômetro de massas (GC-MS) e cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à detector de arranjo fotodiodo (CLAE-DAD). O teor de fenóis totais, flavonóis e proantocianidinas foi determinado e a atividade antioxidante in vitro foi avaliada pelos métodos de DPPH, ABTS e fosfomolibdênio. A toxicidade in vitro dos extratos foi avaliada em células mononucleares de sangue periférico (PBMC) e pela atividade hemolítica, e o efeito na liberação de óxido nítrico (NO) por macrófagos intraperitoneais foi investigado. Os testes in vivo foram realizados com o extrato mais ativo de acordo com o perfil fitoquímico e a atividade antioxidante. Foi realizado o ensaio toxicológico agudo em camundongos com o EELr na dose de 2.000 mg/kg. O ensaio de LPA induzida por LPS foi realizado com o EELr nas doses de 50, 100 e 200 mg/kg e foram analisados a quantidade de leucóticos totais e diferenciada, além da atividade da enzima mieloperoxidase (MPO), níveis de óxido nítrico e citocinas, e análise histopatológica e histoquímica do colágeno nos pulmões. Foi identificado um maior teor de fenóis totais no EELr (241,77 ± 3,6 mg EAG/g) quando comparado aos demais extratos, enquanto as proantocianidinas foram indicadas em maior quantidade no EHLr (39,88 ± 12,57 mg EC/g). Na atividade antioxidante, do EELr apresentou uma concentração necessária para inibir 50% do radical DPPH (CE50) de 178,8 ± 0,8 μg/mL e 275,5 ± 0,9 μg/mL para ABTS em relação ao padrão trolox (56,56 ± 0,5 μg/mL e 36,7 ± 0,6 μg/mL, respectivamente), enquanto EHLr e EALr não apresentaram atividade. Na avaliação da viabilidade de PBMC, os extratos apresentaram CI50 > 100 μg/mL e, na atividade hemolítica, não foi detectada hemólise significativa. EELr não causou alterações comportamentais, nas massas corporais e no consumo de água e ração pelos camundongos, e sua DL50 foi superior a 2.000 mg/kg. No ensaio de LPA, EELr reduziu significativamente o número de leucócitos totais, neutrófilos, eosinófilos, macrófagos e células mononucleares sanguíneas presentes no lavado broncoalveolar dos camundongos inflamados. Ademais, EELr reduziu a atividade da MPO, os níveis de NO, IL-6, TNF-α e INF-γ, além de reestabelecer a integridade pulmonar e reduzir a fibrose, conforme as análises histológicas. Com base nos dados aqui apresentados, pode-se concluir que as folhas de L. racemosa são fonte de compostos fenólicos e possuem atividade antioxidante e anti-inflamatória, com baixa toxicidade.CNPqThe Covid-19 pandemic has intensified the search for new therapeutic agents to combat respiratory diseases given the increase in the occurrence of acute lung injury (ALI) and severe acute respiratory syndrome (SARS). Laguncularia racemosa (L.) C. F. Gaertn (Combretaceae), popularly known as “white mangrove”, is widely distributed in the mangrove ecosystem and used in folk medicine to treat diarrhea, mouth sores and fever. In this context, the aim of this Thesis was to evaluate the toxicity and antioxidant and anti-inflammatory activities of hexane (EHLr), ethyl acetate (EALr) and ethanolic (EELr) extracts from L. racemosa leaves against LPS-induced ALI in mice. The extracts were prepared by the maceration method and their phytochemical profile was analyzed by thin layer chromatography (TLC), gas chromatography coupled to a mass spectrophotometer (GC-MS) and high performance liquid chromatography coupled to a photodiode array detector (HPLC- DAD). The content of total phenols, flavonols and proanthocyanidins was determined and the in vitro antioxidant activity was evaluated by DPPH, ABTS and phosphomolybdenum methods. The in vitro toxicity of the extracts was evaluated in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and by hemolytic activity, and the effect on the release of nitric oxide (NO) by intraperitoneal macrophages was investigated. In vivo tests were carried out with the most active extract according to the phytochemical profile and antioxidant activity. An acute toxicological test was carried out in mice with EELr at a dose of 2,000 mg/kg. The LPS-induced ALI assay was performed with EELr at doses of 50, 100 and 200 mg/kg and the amount of total and differentiated leukocytes were analyzed, in addition to the activity of the enzyme myeloperoxidase (MPO), levels of nitric oxide and cytokines, and histopathological and histochemical analysis of collagen in the lungs. A higher content of total phenols was identified in EELr (241.77 ± 3.6 mg EAG/g) when compared to the other extracts, while proanthocyanidins were indicated in greater quantities in EHLr (39.88 ± 12.57 mg EC/ g). In terms of antioxidant activity, EELr presented a concentration necessary to inhibit 50% of the DPPH radical (EC50) of 178.8 ± 0.8 μg/mL and 275.5 ± 0.9 μg/mL for ABTS in relation to the trolox standard ( 56.56 ± 0.5 μg/mL and 36.7 ± 0.6 μg/mL, respectively), while EHLr and EALr showed no activity. In evaluating PBMC viability, the extracts showed IC50 > 100 μg/mL and, in hemolytic activity, no significant hemolysis was detected. EELr did not cause behavioral changes, body masses or water and food consumption by the mice, and its DL50 was greater than 2,000 mg/kg. In the LPA assay, EELr significantly reduced the number of total leukocytes, neutrophils, eosinophils, macrophages and blood mononuclear cells present in the bronchoalveolar lavage of inflamed mice. Furthermore, EELr reduced MPO activity, levels of NO, IL-6, TNF-α and INF-γ, in addition to reestablishing lung integrity and reducing fibrosis, according to histological analyses. Based on the data presented here, it can be concluded that L. racemosa leaves are a source of phenolic compounds and have antioxidant and anti- inflammatory activity, with low toxicity.porUniversidade Federal de PernambucoPrograma de Pos Graduacao em Ciencias BiologicasUFPEBrasilAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/embargoedAccessCombretaceaeAntioxidanteAnti-inflamatórioLesão pulmonar agudaAvaliação da toxicidade e da atividade anti-inflamatória dos extratos de Laguncularia racemosa (L.) C. F. Gaertn em modelo de lesão pulmonar aguda induzida por lipopolissacarídeo em camundongosinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesismestradoreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPECC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8811https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/60211/2/license_rdfe39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34MD52THUMBNAILTESE Pedro Paulo Marcelino Neto.pdf.jpgTESE Pedro Paulo Marcelino Neto.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1209https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/60211/5/TESE%20Pedro%20Paulo%20Marcelino%20Neto.pdf.jpg529f91431d9d957493b64bb318896f2eMD55LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82362https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/60211/3/license.txt5e89a1613ddc8510c6576f4b23a78973MD53ORIGINALTESE Pedro Paulo Marcelino Neto.pdfTESE Pedro Paulo Marcelino Neto.pdfapplication/pdf4119556https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/60211/6/TESE%20Pedro%20Paulo%20Marcelino%20Neto.pdf26f2ac2b003f7555f835ea82c50f5186MD56TEXTTESE Pedro Paulo Marcelino Neto.pdf.txtTESE Pedro Paulo Marcelino Neto.pdf.txtExtracted texttext/plain214728https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/60211/7/TESE%20Pedro%20Paulo%20Marcelino%20Neto.pdf.txtfc426538b29a8c894b9fdb16b11e4ca9MD57123456789/602112025-07-27 14:47:22.06oai:repositorio.ufpe.br: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Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufpe.br/oai/requestattena@ufpe.bropendoar:22212025-07-27T17:47:22Repositório Institucional da UFPE - Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)false
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