Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2019
Autor(a) principal: NEVES, Giselda Bezerra Correia
Orientador(a): LIMA FILHO, José Luiz de
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
dARK ID: ark:/64986/0013000014d2w
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Pernambuco
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pos Graduacao em Biologia Aplicada a Saude
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Biossensor
Câncer de mama
Diagnóstico
Link de acesso: https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/39526
Resumo: FERREIRA, Danielly Santos Campos, também é conhecida em citações bibliográficas por: CAMPOS-FERREIRA, Danielly Santos
id UFPE_da39e0cc0215d0feb16e8c2fa7511681
oai_identifier_str oai:repositorio.ufpe.br:123456789/39526
network_acronym_str UFPE
network_name_str Repositório Institucional da UFPE
repository_id_str
spelling NEVES, Giselda Bezerra Correiahttp://lattes.cnpq.br/5083434223248365http://lattes.cnpq.br/2834403735297272http://lattes.cnpq.br/3172649866978213LIMA FILHO, José Luiz deFERREIRA, Danielly Santos Campos2021-03-30T03:42:05Z2021-03-30T03:42:05Z2019-12-09NEVES, Giselda Bezerra Correia. Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2. 2019. Tese (Doutorado em Biologia Aplicada à Saúde) - Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2019.https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/39526ark:/64986/0013000014d2wFERREIRA, Danielly Santos Campos, também é conhecida em citações bibliográficas por: CAMPOS-FERREIRA, Danielly SantosCerca de 2.1 milhões de novos casos de câncer de mama (CM), com 630.000 mortes, foram estimadas para 2018 no mundo, sendo 60.000 novos casos com incidência no Brasil. Existem cinco subtipos principais de CM: Luminal A, Luminal B, Fator de Crescimento Epidérmico Humano do receptor-2 (HER2) positivo, triplo negativo não Basaloide e Basaloide. O intervalo ideal entre o diagnóstico e o tratamento deve ser de até 60 dias para melhor prognóstico, entretanto, atualmente no Brasil esse período atinge até 240 dias. O CM é diagnosticado através de rastreio por imagem, como ultrassonografia (USG) e mamografia. Esses meios apresentam algumas limitações. A mamografia tem sua detecção prejudicada em áreas com tecido mamário denso, então, associa-se com a USG para melhor visualização. Identificando uma imagem sugestiva de câncer, faz-se uma biopisa do tecido mamário, seguida de imunohistoquímica (HI) e hibridação in situ de fluorescência (FISH), para estudar o perfil do HER2, uma proteína muito importante para o crescimento, vida e morte programada da celula mámaria. O valor normal do HER2 no soro é de até 15ng/mL. Apesar dos métodos já estabelecidos, HI e FISH, para o diagnóstico, a possibilidade de desenvolvimento de um dispositivo de manuseio simples, rápido e menos invasivo, como os biossensores, será de grande ajuda no diagnóstico precoce do CM. Este trabalho teve como objetivo desenvolver um aptassensor para detectar HER2 em soro humano. Os aptassensores eletroquímicos são biossensores que usam um aptâmero como elemento de biorreconhecimento. Eles analisam por voltametria o sinal resposta para a presença normal ou anormal de um analito em uma amostra biológica. Por sua vez, os aptâmeros são pequenos fragmentos de oligonucleotidios de DNA ou RNA de cadeia simples, produzidos para alvos específicos. O processo de desenvolvimento desse aptasenssor se deu da seguinte forma: um Aptâmero HER2 foi imobilizado por adsorção eletrostática na superfície de um eletrodo impresso em tela, modificado com poli-L-lisina. As medidas foram feitas por voltametria de pulso diferencial (DPV) usando azul de metileno como indicador químico redox da reação. A curva de calibração aprsentou um R2 = 0,9971 utilizando diferentes concentrações de proteína HER2 (10 - 60 ng/mL) diluidas em tampão PBS (pH 7,4), com um limite de detecção de 3,0 ng/mL. Mostrou boa reprodutibilidade, resultando em desvios padrão relativo (RSDs) de 3%. Permaneceu estável por 3 dias, com um RSDs de 2%. Ao realizarmos testes com o soro de uma mulher saudável, foi apresentado um pico de 6,72 μA. E ao testarmos com o soro de uma mulher com câncer de mama HER2 +, obtivemos um sinal de 2,65 μA. Isto denota o mesmo padrão encontrado quando da adição de proteína no soro controle (quando havia uma maior concentração da proteína HER2 foi apresentado um sinal menor). Os testes foram caracterizados por calorimetria de titulação isotérmica (ITC) e mostraram excelente afinidade e interação entre aptâmero e proteína. Os resultados revelaram uma ferramenta promissora e sensível, com potencial no auxílio do diagnóstico molecular do CM.About 2.1 million new cases of breast cancer (BC), with 630,000 deaths were estimated for 2018 worldwide, of which 60,000 new cases are indicative in Brazil. There are five major subtypes of BC: Luminal A, Luminal B, positive HER2, triple-negative non-Basaloid and Basaloid. The ideal interval between diagnosis and treatment should be up to 60 days for a better prognosis, however, currently in Brazil, this period reaches up to 240 days. BC is diagnosed by imaging, such as ultrasound (USG) and mammography. These means have some limitations, such as mammography, whose detection is impaired in areas with dense breast tissue, so it is associated with the USG. Identifying an image suggestive of cancer, a breast tissue biopsy is performed, followed by immunohistochemistry (HI) and fluorescence in situ hybridization (FISH) to study the profile of HER2, a very important protein for growth, life, and death. of the breast cell. The normal serum HER2 value is up to 15ng/mL. Despite established HI and FISH diagnostic methods, the possibility of developing a simple, rapid and less invasive handling device such as biosensors will be of great help in early diagnosis of BC. Aptamers are small fragments of single-stranded DNA or RNA oligonucleotides produced for specific targets. Electrochemical Aptasensors are biosensors that use an aptamer as a biorecognition element and voltammetry analyzes the response signal for the normal or abnormal presence of an analyte in a biological sample. This work aimed to develop an Aptasensor to detect HER2 in human serum. An HER2 Aptamer was immobilized by electrostatic adsorption on the surface of a poly-L-lysine modified screen-printed electrode. Measurements were made by differential pulse voltammetry (DPV) using methylene blue as the redox chemical reaction indicator. The calibration curve showed R2 = 0.9971 using different concentrations of HER2 protein (10 - 60 ng/mL) diluted in PBS buffer (pH 7.4) with a detection limit of 3.0 ng/mL. It showed good reproducibility, resulting in relative standard deviations (RSDs) of 3%. It remained stable for 3 days with a 2% RSDs. Serum tests were performed on a healthy woman with a peak of 6.72 μA. When testing the serum of a woman with HER2 + breast cancer, we obtained a 2.65 μA signal, denoting the same pattern found when adding protein to the control serum (when there was a higher concentration of HER2 protein showed a lower signal). It was characterized by isothermal titration calorimetry (ITC) and showed excellent affinity and interaction between aptamer and protein. The results revealed a promising and sensitive tool with the potential to aid the molecular diagnosis of BC.porUniversidade Federal de PernambucoPrograma de Pos Graduacao em Biologia Aplicada a SaudeUFPEBrasilAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazilhttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/info:eu-repo/semantics/openAccessBiossensorCâncer de mamaDiagnósticoDesenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisdoutoradoreponame:Repositório Institucional da UFPEinstname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)instacron:UFPEORIGINALTESE Giselda Bezerra Correia Neves.pdfTESE Giselda Bezerra Correia Neves.pdfapplication/pdf569430https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/1/TESE%20Giselda%20Bezerra%20Correia%20Neves.pdf2f4260b09c347042d0adfc7804caa11dMD51TEXTTESE Giselda Bezerra Correia Neves.pdf.txtTESE Giselda Bezerra Correia Neves.pdf.txtExtracted texttext/plain69919https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/4/TESE%20Giselda%20Bezerra%20Correia%20Neves.pdf.txt3ad73a29f121ff1508d6473dbf0ad3b7MD54THUMBNAILTESE Giselda Bezerra Correia Neves.pdf.jpgTESE Giselda Bezerra Correia Neves.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1195https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/5/TESE%20Giselda%20Bezerra%20Correia%20Neves.pdf.jpg718d054873154df0871128937adc76beMD55CC-LICENSElicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-8811https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/2/license_rdfe39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34MD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82310https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/3/license.txtbd573a5ca8288eb7272482765f819534MD53123456789/395262021-03-30 02:15:25.584oai:repositorio.ufpe.br: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ório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufpe.br/oai/requestattena@ufpe.bropendoar:22212021-03-30T05:15:25Repositório Institucional da UFPE - Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2
title Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2
spellingShingle Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2
NEVES, Giselda Bezerra Correia
Biossensor
Câncer de mama
Diagnóstico
title_short Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2
title_full Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2
title_fullStr Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2
title_full_unstemmed Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2
title_sort Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2
author NEVES, Giselda Bezerra Correia
author_facet NEVES, Giselda Bezerra Correia
author_role author
dc.contributor.authorLattes.pt_BR.fl_str_mv http://lattes.cnpq.br/5083434223248365
dc.contributor.advisorLattes.pt_BR.fl_str_mv http://lattes.cnpq.br/2834403735297272
dc.contributor.advisor-coLattes.pt_BR.fl_str_mv http://lattes.cnpq.br/3172649866978213
dc.contributor.author.fl_str_mv NEVES, Giselda Bezerra Correia
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv LIMA FILHO, José Luiz de
dc.contributor.advisor-co1.fl_str_mv FERREIRA, Danielly Santos Campos
contributor_str_mv LIMA FILHO, José Luiz de
FERREIRA, Danielly Santos Campos
dc.subject.por.fl_str_mv Biossensor
Câncer de mama
Diagnóstico
topic Biossensor
Câncer de mama
Diagnóstico
description FERREIRA, Danielly Santos Campos, também é conhecida em citações bibliográficas por: CAMPOS-FERREIRA, Danielly Santos
publishDate 2019
dc.date.issued.fl_str_mv 2019-12-09
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2021-03-30T03:42:05Z
dc.date.available.fl_str_mv 2021-03-30T03:42:05Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.citation.fl_str_mv NEVES, Giselda Bezerra Correia. Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2. 2019. Tese (Doutorado em Biologia Aplicada à Saúde) - Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2019.
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/39526
dc.identifier.dark.fl_str_mv ark:/64986/0013000014d2w
identifier_str_mv NEVES, Giselda Bezerra Correia. Desenvolvimento de aptassensor eletroquímico para diagnóstico do câncer de mama tipo HER2. 2019. Tese (Doutorado em Biologia Aplicada à Saúde) - Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2019.
ark:/64986/0013000014d2w
url https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/39526
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil
http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/
eu_rights_str_mv openAccess
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Pernambuco
dc.publisher.program.fl_str_mv Programa de Pos Graduacao em Biologia Aplicada a Saude
dc.publisher.initials.fl_str_mv UFPE
dc.publisher.country.fl_str_mv Brasil
publisher.none.fl_str_mv Universidade Federal de Pernambuco
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UFPE
instname:Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)
instacron:UFPE
instname_str Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)
instacron_str UFPE
institution UFPE
reponame_str Repositório Institucional da UFPE
collection Repositório Institucional da UFPE
bitstream.url.fl_str_mv https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/1/TESE%20Giselda%20Bezerra%20Correia%20Neves.pdf
https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/4/TESE%20Giselda%20Bezerra%20Correia%20Neves.pdf.txt
https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/5/TESE%20Giselda%20Bezerra%20Correia%20Neves.pdf.jpg
https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/2/license_rdf
https://repositorio.ufpe.br/bitstream/123456789/39526/3/license.txt
bitstream.checksum.fl_str_mv 2f4260b09c347042d0adfc7804caa11d
3ad73a29f121ff1508d6473dbf0ad3b7
718d054873154df0871128937adc76be
e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34
bd573a5ca8288eb7272482765f819534
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
MD5
MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UFPE - Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)
repository.mail.fl_str_mv attena@ufpe.br
_version_ 1866186673974411264

Registros relacionados