Efeito da lipoproteína de baixa densidade sobre a qualidade do sêmen canino submetido à criopreservação
Ano de defesa: | 2005 |
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Universidade Federal de Pelotas
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Veterinária
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Faculdade de Veterinária
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Palavras-chave em Português: | |
Área do conhecimento CNPq: | |
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Resumo: | A gema de ovo é um dos crioprotetores externos mais utilizados na preservação seminal, apresentando, como um dos constituintes na sua composição, lipoproteína de baixa densidade (LDL). A ação protetora à baixas temperaturas, exercida pela LDL, é atribuída à incorporação, na membrana celular, de seus fosfolipídios e colesterol, bem como através da associação da LDL com as proteínas do plasma seminal, evitando que estas seqüestrem fosfolipídio e colesterol da membrana espermática, aumentando a sua estabilidade e protegendo o espermatozóide do choque térmico. Entretanto, a gema também contém outras substâncias prejudiciais ao espermatozóide, as quais provocam, principalmente, a diminuição da motilidade e da quantidade de fosfolipídio e colesterol. O objetivo deste trabalho foi de verificar o efeito da adição de LDL, na composição de diluentes utilizados para congelamento e resfriamento a 5 ºC do sêmen canino, sobre algumas características espermáticas.No experimento 1 (Exp.1) foram coletados 5 ejaculados de sêmen de 4 cães da raça Cocker Spaniel. Após a coleta, os ejaculados foram centrifugados e diluídos em: Tris-Glicose adicionado de 20% de gema de ovo (T1), e Tris-Glicose adicionado com 6% (T2), 8% (T3) e 10% (T4) de LDL. Após a diluição o sêmen foi mantido por 1 h a 20°C, sendo que após este período a temperatura foi reduzida gradualmente durante 2 h, até atingir 5°C. Foram avaliados a motilidade (MOT), a integridade de membrana (IM) e a morfologia (MORF) nas 24, 48, 72, e 96 h, bem como o tempo máximo de duração (TMD). No experimento 2 (Exp2) foram coletados ejaculados de 4 cães da raça Cocker Spaniel (3 repetições) e 2 cães da raça Pastor Alemão (4 repetições), executando os mesmos procedimentos realizados no experimento 1, após foi adicionado (v/v), a 5°C, os mesmos tratamentos adicionados de 10% de glicerol (concentração final de 5%) e posteriormente as palhetas foram congeladas a 5 cm do nitrogênio liquido. Após o descongelamento, foram avaliadas a motilidade (MOT), integridade de membrana (IM) e a morfologia espermática (MORF). No Exp.1, o TDM do T1 (152,6 h) foi menor (P < 0,01) que nos tratamentos T2 (204,4 h), T3 (212,1 h) e T4 (200,6h), entretanto, estes não diferiram (P > 0,05) entre si. A MOT e IM, no Exp.1 nas 24, 48, 72, e 96h e no Exp.2 após o descongelamento, nos tratamentos T2, T3 e T4 não diferiram (P > 0,05) entre si, mas foram superiores (P < 0,01) ao T1. Sendo que nas 96 h as MOT foram de 61,5% no T1, 70,5% no T2, 75,5% no T3 e 70% no T4 e as de IM foram 35,5% no T1, 45,3% no T2, 47% no T3 e 45,1% no T4. A MORF. não diferiu (P > 0,05) entre os tratamentos em todos os tempos avaliados em ambos os experimentos. Em conclusão, a substituição da gema de ovo por LDL, foi benéfica para a manutenção da qualidade espermática canina, quando preservado a temperatura de refrigeração a 5°C ou congelado. |
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2023-03-14T00:08:59Z2023-03-14T00:08:59Z2005-01-31VARELA JUNIOR, Antonio Sergio. Efeito da lipoproteína de baixa densidade sobre a qualidade do sêmen canino submetido à criopreservação. Dissertação (Mestrado em Veterinária) - Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2005.http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/9169A gema de ovo é um dos crioprotetores externos mais utilizados na preservação seminal, apresentando, como um dos constituintes na sua composição, lipoproteína de baixa densidade (LDL). A ação protetora à baixas temperaturas, exercida pela LDL, é atribuída à incorporação, na membrana celular, de seus fosfolipídios e colesterol, bem como através da associação da LDL com as proteínas do plasma seminal, evitando que estas seqüestrem fosfolipídio e colesterol da membrana espermática, aumentando a sua estabilidade e protegendo o espermatozóide do choque térmico. Entretanto, a gema também contém outras substâncias prejudiciais ao espermatozóide, as quais provocam, principalmente, a diminuição da motilidade e da quantidade de fosfolipídio e colesterol. O objetivo deste trabalho foi de verificar o efeito da adição de LDL, na composição de diluentes utilizados para congelamento e resfriamento a 5 ºC do sêmen canino, sobre algumas características espermáticas.No experimento 1 (Exp.1) foram coletados 5 ejaculados de sêmen de 4 cães da raça Cocker Spaniel. Após a coleta, os ejaculados foram centrifugados e diluídos em: Tris-Glicose adicionado de 20% de gema de ovo (T1), e Tris-Glicose adicionado com 6% (T2), 8% (T3) e 10% (T4) de LDL. Após a diluição o sêmen foi mantido por 1 h a 20°C, sendo que após este período a temperatura foi reduzida gradualmente durante 2 h, até atingir 5°C. Foram avaliados a motilidade (MOT), a integridade de membrana (IM) e a morfologia (MORF) nas 24, 48, 72, e 96 h, bem como o tempo máximo de duração (TMD). No experimento 2 (Exp2) foram coletados ejaculados de 4 cães da raça Cocker Spaniel (3 repetições) e 2 cães da raça Pastor Alemão (4 repetições), executando os mesmos procedimentos realizados no experimento 1, após foi adicionado (v/v), a 5°C, os mesmos tratamentos adicionados de 10% de glicerol (concentração final de 5%) e posteriormente as palhetas foram congeladas a 5 cm do nitrogênio liquido. Após o descongelamento, foram avaliadas a motilidade (MOT), integridade de membrana (IM) e a morfologia espermática (MORF). No Exp.1, o TDM do T1 (152,6 h) foi menor (P < 0,01) que nos tratamentos T2 (204,4 h), T3 (212,1 h) e T4 (200,6h), entretanto, estes não diferiram (P > 0,05) entre si. A MOT e IM, no Exp.1 nas 24, 48, 72, e 96h e no Exp.2 após o descongelamento, nos tratamentos T2, T3 e T4 não diferiram (P > 0,05) entre si, mas foram superiores (P < 0,01) ao T1. Sendo que nas 96 h as MOT foram de 61,5% no T1, 70,5% no T2, 75,5% no T3 e 70% no T4 e as de IM foram 35,5% no T1, 45,3% no T2, 47% no T3 e 45,1% no T4. A MORF. não diferiu (P > 0,05) entre os tratamentos em todos os tempos avaliados em ambos os experimentos. Em conclusão, a substituição da gema de ovo por LDL, foi benéfica para a manutenção da qualidade espermática canina, quando preservado a temperatura de refrigeração a 5°C ou congelado.Egg yolk is one the most used external cryoprotectors for semen preservation. Its composition includes low-density lipoprotein (LDL). The LDL cryoprotecting action is attributed do the incorporation of phospolipids and cholesterol to the cell membrane, as well as to its association with proteins present in seminal plasma, preventing that they could take such substances from the cell membrane, making such membrane more stable and decreasing sperm sensitivity to cold shock. However, egg yolk also contains other substances detrimental to the sperm, which can lead to reduction in motility and in the phospolipids and cholesterol content. The objective of this study was to evaluate the effect of the replacement of egg yolk by LDL in extenders for canine semen frozen and cooled at 5 ºC considering parameters of semen quality. In Experiment 1 (EXP1) 5 ejaculates were collected from 4 Cocker Spanil dogs and, after centrifugation, extended according to 4 treatments: Tris-Glucose plus 20% egg yolk (T1), Tris-Glucose plus 6% LDL (T2), TrisGlucose plus 8% LDL, Tris-Glucose plus 10% LDL. After semen incubation at 20°C during 1 h, the temperature was gradually reduced during 2 h up to 5°C. Sperm motility (MOT), membrane integrity (MI) and morphology (MOR) were evaluated were evaluated at 24, 48, 72 and 96 h, along with the maximum survival time (MST). In Experiment 2 (EXP2), semen samples were collected from 4 Cocker Spanil (3 repetitions) and 2 German shepherd (4 repetitions), following the same procedures of EXP1. Subsequently, the same treatments of EXP1 were applied at 5°C, with the inclusion of glycerol at 10% (final concentration equal to 5%) for freezing. Straws were thawed in liquid Nitrogen at 5 cm. After thawing, the same semen quality parameters were evaluated. In EXP1, MST was lower for T1 than for the other treatments (P < 0,01), but T2, T3 and T4 did not differ (P > 0,05). MOT and MI did not differ among T2, T3 and T4 at 24, 48, 72, and 96 h in EXP1 and after thawing in EXP2 (P > 0,05), but all those 3 treatments present superior results in comparison with T1 (P < 0,01), in both experiments. MORF did not differ among treatments in both EXP1 and EXP2 (P > 0,05). In conclusion, purified LDL can replace egg yolk in extenders for canine semen cooled at 5ºC or frozen.porUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em VeterináriaUFPelBrasilFaculdade de VeterináriaCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA::REPRODUCAO ANIMAL::INSEMINACAO ARTIFICIAL ANIMALVeterináriaCãesReprodução animalCriopreservaçãoEfeito da lipoproteína de baixa densidade sobre a qualidade do sêmen canino submetido à criopreservaçãoEffect of low-density lipoprotein on the quality of cryopreserved canine semeninfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://lattes.cnpq.br/8041711996066835http://lattes.cnpq.br/9414264173219924Deschamps, João CarlosVarela Júnior, Antonio Sergioinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTdissertacao_antonio_varela_junior.pdf.txtdissertacao_antonio_varela_junior.pdf.txtExtracted texttext/plain47687http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/9169/6/dissertacao_antonio_varela_junior.pdf.txtc39f8bca441f5398253b901e303484f4MD56open accessTHUMBNAILdissertacao_antonio_varela_junior.pdf.jpgdissertacao_antonio_varela_junior.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1339http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/9169/7/dissertacao_antonio_varela_junior.pdf.jpg9108061ed09d557d68280264f0692112MD57open accessORIGINALdissertacao_antonio_varela_junior.pdfdissertacao_antonio_varela_junior.pdfapplication/pdf183112http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/9169/1/dissertacao_antonio_varela_junior.pdf17197d6c3d88bb118995dd7924b83777MD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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A gema de ovo é um dos crioprotetores externos mais utilizados na preservação seminal, apresentando, como um dos constituintes na sua composição, lipoproteína de baixa densidade (LDL). A ação protetora à baixas temperaturas, exercida pela LDL, é atribuída à incorporação, na membrana celular, de seus fosfolipídios e colesterol, bem como através da associação da LDL com as proteínas do plasma seminal, evitando que estas seqüestrem fosfolipídio e colesterol da membrana espermática, aumentando a sua estabilidade e protegendo o espermatozóide do choque térmico. Entretanto, a gema também contém outras substâncias prejudiciais ao espermatozóide, as quais provocam, principalmente, a diminuição da motilidade e da quantidade de fosfolipídio e colesterol. O objetivo deste trabalho foi de verificar o efeito da adição de LDL, na composição de diluentes utilizados para congelamento e resfriamento a 5 ºC do sêmen canino, sobre algumas características espermáticas.No experimento 1 (Exp.1) foram coletados 5 ejaculados de sêmen de 4 cães da raça Cocker Spaniel. Após a coleta, os ejaculados foram centrifugados e diluídos em: Tris-Glicose adicionado de 20% de gema de ovo (T1), e Tris-Glicose adicionado com 6% (T2), 8% (T3) e 10% (T4) de LDL. Após a diluição o sêmen foi mantido por 1 h a 20°C, sendo que após este período a temperatura foi reduzida gradualmente durante 2 h, até atingir 5°C. Foram avaliados a motilidade (MOT), a integridade de membrana (IM) e a morfologia (MORF) nas 24, 48, 72, e 96 h, bem como o tempo máximo de duração (TMD). No experimento 2 (Exp2) foram coletados ejaculados de 4 cães da raça Cocker Spaniel (3 repetições) e 2 cães da raça Pastor Alemão (4 repetições), executando os mesmos procedimentos realizados no experimento 1, após foi adicionado (v/v), a 5°C, os mesmos tratamentos adicionados de 10% de glicerol (concentração final de 5%) e posteriormente as palhetas foram congeladas a 5 cm do nitrogênio liquido. Após o descongelamento, foram avaliadas a motilidade (MOT), integridade de membrana (IM) e a morfologia espermática (MORF). No Exp.1, o TDM do T1 (152,6 h) foi menor (P < 0,01) que nos tratamentos T2 (204,4 h), T3 (212,1 h) e T4 (200,6h), entretanto, estes não diferiram (P > 0,05) entre si. A MOT e IM, no Exp.1 nas 24, 48, 72, e 96h e no Exp.2 após o descongelamento, nos tratamentos T2, T3 e T4 não diferiram (P > 0,05) entre si, mas foram superiores (P < 0,01) ao T1. Sendo que nas 96 h as MOT foram de 61,5% no T1, 70,5% no T2, 75,5% no T3 e 70% no T4 e as de IM foram 35,5% no T1, 45,3% no T2, 47% no T3 e 45,1% no T4. A MORF. não diferiu (P > 0,05) entre os tratamentos em todos os tempos avaliados em ambos os experimentos. Em conclusão, a substituição da gema de ovo por LDL, foi benéfica para a manutenção da qualidade espermática canina, quando preservado a temperatura de refrigeração a 5°C ou congelado. |
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