Proteômica global de Campylobacter jejuni NCTC11168 sob diferentes condições de pH

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2022
Autor(a) principal: Ramires, Tassiana
Orientador(a): Silva, Wladimir Padilha da
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Federal de Pelotas
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia de Alimentos
Departamento: Faculdade de Agronomia Eliseu Maciel
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/8984
Resumo: Campylobacter termofílico é um subgrupo dentro do gênero Campylobacter, formado pelas espécies C. jejuni, C. coli, C. lari e C. upsaliensis, sendo assim denominado devido a sua temperatura ótima de multiplicação oscilar entre 42 °C. Campylobacter termofílicos são, atualmente, as principais bactérias causadoras de doenças transmitidas por alimentos em todo o mundo, além de estarem entre as quatro principais causas globais de doenças diarreicas. Dentre as espécies de Campylobacter termofílicos, a mais relacionada à campilobacteriose é C. jejuni, seguida por C. coli. O principal reservatório de C. jejun são as aves, principalmente os frangos, possivelmente pela temperatura corporal desses animais ser similar à temperatura ótima para a sua multiplicação. Apesar da importância desse patógeno para a saúde pública, pouco ainda se sabe sobre os mecanismos de sobrevivência e de infecção de C. jejuni. Com isso, o objetivo desse estudo foi avaliar a proteômica global de C. jejuni NCTC11168 quando submetido a diferentes condições de pH, simulando barreiras encontradas no organismo humano e em cortes cárneos de frango. Para isso, a cepa padrão C. jejuni NCTC 11168 foi submetida a diferentes valores de pH, a fim de tornar o ambiente in vitro semelhante ao pH gástrico (pH 4,0- o mais ácido no qual houve multiplicação microbiana em testes prévios), ao pH médio de cortes cárneos de frango (pH 5,8) e ao pH intestinal humano (pH 8,0). As proteínas foram extraídas pela técnica single spot (SP3) e a separação, identificação e quantificação das proteínas, foi realizada por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas. Observou-se que houve diferença significativa na síntese de proteínas, nas diferentes condições de pH testadas. Foi constatado que o pH 5,8 foi o que mais favoreceu a síntese de proteínas relacionadas aos mecanismos de defesa de C. jejuni, sendo esse um achado interessante visto que é o pH encontrado nos cortes cárneos, podendo ser um fator que beneficie a sobrevivência do patógeno e consequentemente proporcione a disseminação da campilobacteriose. Além disso, foi identificado aumento na abundância de duas proteínas responsáveis pela geração de energia via respiração anaeróbica (NapA e FrdA) quando em pH 8,0, sugerindo que o pH intestinal induz ao aumento da atividade da cadeia transportadora de elétrons, provavelmente a fim de garantir a homeostase citoplasmática de C. jejuni. A partir dos resultados obtidos no presente estudo, foi possível comprovar que de alguma forma as proteínas de resposta ao estresse (térmico e oxidativo) também estão envolvidas na resposta ao estresse ácido de C. jejuni. Além disso, foi possível verificar que dentre os pH avaliados, o pH 5,8 foi o mais expressivo em termos de respostas ao estresse ácido, sendo uma boa condição a se trabalhada em pesquisas futuras, a fim de se ter um melhor conhecimento sobre a interferência do pH na patogênese de C. jejuni.
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O principal reservatório de C. jejun são as aves, principalmente os frangos, possivelmente pela temperatura corporal desses animais ser similar à temperatura ótima para a sua multiplicação. Apesar da importância desse patógeno para a saúde pública, pouco ainda se sabe sobre os mecanismos de sobrevivência e de infecção de C. jejuni. Com isso, o objetivo desse estudo foi avaliar a proteômica global de C. jejuni NCTC11168 quando submetido a diferentes condições de pH, simulando barreiras encontradas no organismo humano e em cortes cárneos de frango. Para isso, a cepa padrão C. jejuni NCTC 11168 foi submetida a diferentes valores de pH, a fim de tornar o ambiente in vitro semelhante ao pH gástrico (pH 4,0- o mais ácido no qual houve multiplicação microbiana em testes prévios), ao pH médio de cortes cárneos de frango (pH 5,8) e ao pH intestinal humano (pH 8,0). As proteínas foram extraídas pela técnica single spot (SP3) e a separação, identificação e quantificação das proteínas, foi realizada por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas. Observou-se que houve diferença significativa na síntese de proteínas, nas diferentes condições de pH testadas. Foi constatado que o pH 5,8 foi o que mais favoreceu a síntese de proteínas relacionadas aos mecanismos de defesa de C. jejuni, sendo esse um achado interessante visto que é o pH encontrado nos cortes cárneos, podendo ser um fator que beneficie a sobrevivência do patógeno e consequentemente proporcione a disseminação da campilobacteriose. Além disso, foi identificado aumento na abundância de duas proteínas responsáveis pela geração de energia via respiração anaeróbica (NapA e FrdA) quando em pH 8,0, sugerindo que o pH intestinal induz ao aumento da atividade da cadeia transportadora de elétrons, provavelmente a fim de garantir a homeostase citoplasmática de C. jejuni. A partir dos resultados obtidos no presente estudo, foi possível comprovar que de alguma forma as proteínas de resposta ao estresse (térmico e oxidativo) também estão envolvidas na resposta ao estresse ácido de C. jejuni. Além disso, foi possível verificar que dentre os pH avaliados, o pH 5,8 foi o mais expressivo em termos de respostas ao estresse ácido, sendo uma boa condição a se trabalhada em pesquisas futuras, a fim de se ter um melhor conhecimento sobre a interferência do pH na patogênese de C. jejuni.Thermophilic Campylobacter is a subgroup within the genus Campylobacter,formed by the species C. jejuni, C. coli, C. lari and C. upsaliensis, being so namedbecause of its optimal multiplication temperature oscillating between 42 °C. Thermophilic Campylobacter are currently the leading foodborne disease215 causing bacteria worldwide, as well as being among the top four global causes of diarrheal disease. Among the thermophilic Campylobacter species, the most related to campylobacteriosis is C. jejuni, followed by C. coli. The main reservoir of C. jejuni are birds, mainly poultry, possibly because the body temperature of these animals is similar to the optimal temperature for their multiplication. Despite the importance of this pathogen for public health, little is known about the survival and infection mechanisms of C. jejuni. Thus, the objective of this study was to evaluate the global proteomics of C. jejuni NCTC11168 when subjected to different pH conditions, simulating the barriers found in the human organism and in chicken meat cuts. For this, the standard strain C. jejuni NCTC 11168 was submitted to different pH values, in order to make the in vitro environment similar to gastric pH (pH 4.0 - the most acidic in which there was microbial multiplication in previous tests), to the average pH of chicken meat cuts (pH 5.8) and to the human intestinal pH (pH 8.0). Proteins were extracted by the single spot technique (SP3) and the separation, identification and quantification of proteins was performed by liquid chromatography coupled to mass spectrometry. It was observed that there was a significant difference in the synthesis of proteins, in the different pH conditions tested. It was found that pH 5.8 was the one that most favored the synthesis of proteins related to the defense mechanisms of C. jejuni, which is an interesting finding since it is the pH found in chicken meat cuts, wh may be a factor that benefits the pathogen survival and consequently provide the campylobacteriosis spread. In addition, increase in the abundance of two proteins responsible for energy generation via anaerobic respiration (NapA and FrdA) was identified when at pH 8.0, suggesting that intestinal pH induces an increase in the activity of the electron transport chain, probably in order to to guarantee the cytoplasmic homeostasis of C. jejuni. From the results obtained in the present study, it was possible to prove that somehow the stress response proteins (thermal and oxidative) are also involved in the C. jejuni acid stress response. In addition, it was possible to verify that among the evaluated pH, pH 5.8 was the most expressive in terms of responses to acid stress, being a good condition to be worked on in future research, in order to have a better knowledge about of the interference of pH in the C. jejuni pathogenesis.porUniversidade Federal de PelotasPrograma de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia de AlimentosUFPelBrasilFaculdade de Agronomia Eliseu MacielCIÊNCIA E TECNOLOGIA DE ALIMENTOSCampylobacter termofílicosEstresse ácidopH intestinalCampilobacterioseCortes cárneos de frangoAcid stressIntestinal pHCampylobacteriosisChicken meat cutsProteômica global de Campylobacter jejuni NCTC11168 sob diferentes condições de pHGlobal proteomics of Campylobacter jejuni NCTC11168 206 under different pH conditionsinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesishttp://lattes.cnpq.br/5231261744494804Fiorentini, Ângela Mariahttp://lattes.cnpq.br/5481998000769057Silva, Wladimir Padilha daRamires, Tassianainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFPel - Guaiacainstname:Universidade Federal de Pelotas (UFPEL)instacron:UFPELTEXTTese_Tassiana_Ramires.pdf.txtTese_Tassiana_Ramires.pdf.txtExtracted texttext/plain160145http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8984/6/Tese_Tassiana_Ramires.pdf.txt000bee8dcc3bc7a00437381153d08befMD56open accessTHUMBNAILTese_Tassiana_Ramires.pdf.jpgTese_Tassiana_Ramires.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1286http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8984/7/Tese_Tassiana_Ramires.pdf.jpg2d530976d9eb4b34e1db453b0d6b26a9MD57open accessORIGINALTese_Tassiana_Ramires.pdfTese_Tassiana_Ramires.pdfapplication/pdf1098036http://guaiaca.ufpel.edu.br/xmlui/bitstream/prefix/8984/1/Tese_Tassiana_Ramires.pdf8473f3d83a1cbf872f44801a8370cc43MD51open accessCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; 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Ramires, Tassiana
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