Adjuvanticidade de Bacillus toyonensis e Saccharomyces boulardii em vacinas avaliadas em murinos e ovinos

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Santos, Francisco Denis Souza
• Orientador(a): Leite, Fabio Pereira Leivas
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Pelotas
• Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia
• Departamento: Centro de Desenvolvimento Tecnológico
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Probióticos; Esporos; Adjuvante; Imunomodulação; Vacinas; Probiotics; Spores; Adjuvant; Immunomodulation; Vaccines
• Área do conhecimento CNPq: CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
• Link de acesso: http://guaiaca.ufpel.edu.br/handle/prefix/8865

Os probióticos modulam a resposta imune do hospedeiro, podendo aumentar a eficácia de vacinas. O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito de Bacillus toyonensis e Saccharomyces boulardii na resposta imune de murinos e ovinos vacinados com vacinas recombinantes e convencionais. Foram realizados três experimentos em murinos e dois em ovinos. No primeiro experimento, camundongos foram suplementados pela via oral com 1 × 106 esporos viáveis de B. toyonensis por grama de ração durante todo o período experimental e outro grupo nos 7 dias que antecederam a primeira vacinação. No segundo experimento, um grupo de camundongos foi suplementado com B. toyonensis na mesma concentração, via e período e o outro grupo recebeu a inoculação de 1 × 106 esporos de B. toyonensis, como componente da vacina, pela via subcutânea (s.c.) nos dias 0 e 21. Em ambos os experimentos os camundongos foram vacinados pela via s.c. com a glicoproteína D recombinante do herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5). No terceiro experimento com camundongos, os animais foram suplementados com B. toyonensis pela via oral como descrito para os experimentos anteriores, mas vacinados com o fragmento C da toxina tetânica (TTFC) adsorvida aos esporos de B. subtilis pela via de mucosa (intranasal). No primeiro experimento com ovelhas, 3 × 108 esporos viáveis de B. toyonensis foram administrados pela via oral durante 5 dias e as ovelhas posteriormente vacinadas com a toxina épsilon recombinante (rETX) de Clostridium perfringens. No segundo experimento, ovelhas foram suplementados pela via oral com 3 × 108 esporos viáveis de B. toyonensis ou S. boulardii, durante 5 dias antes das vacinações contra Clostridium chauvoei. A resposta imune humoral e celular foi avaliada por ELISA indireto, por ensaios de soroneutralização e pela detecção da expressão de citocinas em esplenócitos e células mononucleares do sangue periférico (PBMCs). Todos os camundongos suplementados com B. toyonensis, independentemente do regime, apresentaram elevados níveis séricos de anticorpos (IgG total, IgG1 e IgG2a) com propriedades neutralizantes e níveis esplênicos de transcrição de mRNA de IL-4, IL-12 e IFN-γ superiores quando comparados aos controles. A suplementação com B. toyonensis nos camundongos vacinados com a TTFC adsorvida aos esporos de B. subtilis modulou a resposta humoral, estimulando níveis superiores de IgA fecal, IgG total e IgG2c quando comparado aos controles, e a resposta celular através da produção de níveis superiores de IL-6, IL-10 e IFN-γ pelos esplenócitos dos animais suplementados. As ovelhas suplementadas com B. toyonensis e vacinadas com a rETX, assim como as ovelhas suplementadas com B. toyonensis ou S. boulardii vacinadas contra C. chauvoei apresentaram níveis mais elevados de IgG total, IgG1 e IgG2 quando comparadas com as não suplementadas. PBMCs de todas as ovelhas suplementadas com os probióticos apresentaram níveis de transcrição de mRNA de IL-2, IFN-γ e Bcl6 superiores. A suplementação com B. toyonensis e S. boulardii durante um período reduzido foi suficiente para modular a resposta imune. Os resultados indicam que probióticos utilizados neste estudo foram capazes de estimular a imunidade e melhorar a resposta às vacinas em murinos e ovinos.