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Estudo das etapas iniciais da embriogênese somática em Pinus caribaea var. Hondurensis

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2018
Autor(a) principal: Sestrem, Mayte Sampaio Cesário da Silva
Orientador(a): Alcantara, Giovana Bomfim de, 1978-
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Melhoramento genetico
Recursos Florestais e Engenharia Florestal
Pinheiro-do-caribe
Conífera
Link de acesso: https://hdl.handle.net/1884/58099
Resumo: Orientadora: Profa. Dra. Giovana Bomfim de Alcantara
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spelling Goldbach, Juliana DegenhardtUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Engenharia FlorestalAlcantara, Giovana Bomfim de, 1978-Sestrem, Mayte Sampaio Cesário da Silva2024-08-15T19:04:05Z2024-08-15T19:04:05Z2018https://hdl.handle.net/1884/58099Orientadora: Profa. Dra. Giovana Bomfim de AlcantaraCoorientador: Dra. Juliana Degenhardt GoldbachDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Florestal. Defesa : Curitiba, 26/03/2018Inclui referências: p.46-55Área de concentração: SilviculturaResumo: Pinus caribaea var. hondurensis é a espécie de Pinus tropical que melhor se adaptou no Brasil e tem se apresentado como o melhor produtor de madeira para celulose entre as espécies tropicais. A embriogênese somática é um processo em que se obtém novos embriões originados a partir de células somáticas, sem a fusão de gametas. Essa técnica permite a propagação clonal de coníferas devido à sua alta produtividade e homogeneidade do material obtido. O presente trabalho teve como objetivo geral o desenvolvimento de um protocolo de embriogênese somática de Pinus caribaea var. hondurensis. Como objetivos específicos, foram testadas duas composições salinas de meios de cultura na indução da embriogênese somática, sendo eles LOB e QL, com e sem adição de ácido fólico e diferentes explantes, sendo eles, embriões zigóticos maduros e imaturos. Além disso, foi analisada a influência do genótipo e a data de coleta dos embriões zigóticos imaturos para a formação de massas pró-embriogênicas. Análises histológicas foram realizadas para avaliação do potencial embriogênico das culturas. Para as etapas de indução e pré-maturação da embriogênese somática, os meios de cultura foram suplementados com tiamina-HCl, glutamina, caseína hidrolisada, glicina, mio-inositol e sacarose em diferentes concentrações para cada meio de cultura e para cada fase de desenvolvimento, além de reguladores de crescimento (2,4-D, BAP, AIB, ABA e cinetina). A fase de indução durou de 60 a 90 dias e após esse período as massas pró-embriogênicas foram transferidas para meio de cultura de pré-maturação por 45 dias. Em todas as etapas as culturas foram mantidas em BOD, no escuro, com temperatura de 23 ± 2ºC, sendo realizados subcultivos periódicos a cada 21 dias. A cada subcultivo foi retirada uma amostra de três explantes, aleatoriamente, para análise da capacidade embriogênica, utilizando a coloração de carmim acético 2% e azul de Evans. Como resultado, os embriões maduros não apresentaram formação de massas pró-embriogênicas. Já para os embriões zigóticos imaturos foi observada a formação de massas pró-embriogênicas em todas as composições de meios de cultura avaliados. Para a análise estatística foi aplicado o teste de Levene que constatou que as amostras eram homogêneas. Com isso foi realizada a análise de variância (ANOVA) e o teste de Tukey (p<0,05). Não houve diferença estatística para a formação de massas pró-embriogênicas entre os meios de cultura analisados. O Pinus caribaea var. hondurensis apresentou diferença estatística na formação de massas pró-embriogênicas entre as matrizes e entre as datas de coleta. Para a melhor matriz, na melhor data de coleta, foi obtido 40% de formação de massa pró-embriogênica no meio LOB. Avanços na embriogênese somática para essa espécie foram obtidos com o presente estudo, no qual foi observada a formação de embriões somáticos anormais para uma das matrizes analisadas. Palavras-chave: Coníferas; embriões imaturos; embriões maduros; época de coleta; genótipo.Abstract: Pinus caribaea var. hondurensis is the species of tropical Pinus best adapted in Brazil and has been presented as the best producer of wood for cellulose among tropical species. Somatic embryogenesis is a process in which new embryos are obtained originating from somatic cells, without the fusion of gametes. This technique allows the clonal propagation of conifers due to their high productivity and homogeneity of the obtained material. The present work had as general purpose the development of a somatic embryogenesis protocol of Pinus caribaea var. hondurensis. As specific purposes, two saline compositions of culture media were tested in the induction of somatic embryogenesis, being LOB and QL, with and without addition of folic acid and different explants, being mature and immature zygotic embryos. In addition, the influence of the genotype and the date of collection of the immature zygotic embryos for the formation of pro-embryogenic masses were analyzed. Histological analyzes were performed to evaluate the embryogenic potential of the cultures. For the induction and pre-maturation stages of somatic embryogenesis, culture media were supplemented with thiamine-HCl, glutamine, hydrolyzed casein, glycine, myo-inositol and sucrose at different concentrations for each culture medium and for each development phase , as well as growth regulators (2,4-D, BAP, AIB, ABA and kinetin). The induction phase lasted from 60 to 90 days and after that period the pro-embryogenic masses were transferred to pre-maturation culture medium for 45 days. At all stages cultures were maintained in BOD in the dark, with a temperature of 23 ± 2ºC, and periodic subcultures were performed every 21 days. Each subculture was randomly sampled three explants for analysis of embryogenic capacity, using 2% acetic carmine and Evans blue staining. As a result, mature embryos did not exhibit pro-embryogenic mass formation. For immature zygotic embryos, the formation of pro-embryogenic masses was observed in all compositions of culture media evaluated. For the statistical analysis, the Levene test was applied, which verified that the samples were homogeneous. Thus, the analysis of variance (ANOVA) and Tukey's test (p <0.05) were performed. There was no statistical difference for the formation of pro-embryogenic masses between the analyzed culture media. Pinus caribaea var. hondurensis presented a statistical difference in the formation of pro-embryogenic masses between the genotype and between the dates of collection. For the best genotype, at the best collection date, 40% pro-embryogenic mass formation was obtained in the LOB medium. Advances in somatic embryogenesis for this species were obtained with the present study, in which the formation of abnormal somatic embryos was observed for one of the genotypes analyzed. Key words: Conifers; genotype; immature embryos; mature embryos; time of collection;56 p. : il. (algumas color.), tabs.application/pdfMelhoramento geneticoRecursos Florestais e Engenharia FlorestalPinheiro-do-caribeConíferaEstudo das etapas iniciais da embriogênese somática em Pinus caribaea var. Hondurensisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALR - D - MAYTE SAMPAIO CESARIO DA SILVA SESTREM.pdfapplication/pdf944001https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/58099/1/R%20-%20D%20-%20MAYTE%20SAMPAIO%20CESARIO%20DA%20SILVA%20SESTREM.pdfa85d012ce80f3cbf9afd817145fac7c5MD51open access1884/580992024-08-15 16:04:05.968open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/58099Repositório InstitucionalPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestinformacaodigital@ufpr.bropendoar:3082024-08-15T19:04:05Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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