Determinação de metabólitos secundários do guaco nas especialidades farmacêuticas xarope e solução oral via CLAE-DAD e CLAE-EM/EM

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2010
Autor(a) principal: Gasparetto, João Cleverson
Orientador(a): Pontarolo, Roberto, 1954-
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Teses
Plantas medicinais
Guaco
Farmácia
Link de acesso: https://hdl.handle.net/1884/23054
Resumo: Orientador : Prof. Dr. Roberto Pontarolo
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spelling Campos, Francinete Ramos, 1972-Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências FarmacêuticasPontarolo, Roberto, 1954-Gasparetto, João Cleverson2022-11-28T15:48:05Z2022-11-28T15:48:05Z2010https://hdl.handle.net/1884/23054Orientador : Prof. Dr. Roberto PontaroloCo-Orientadora : Dra. Francinete Ramos CamposDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 19/03/2010Bibliografia: fls.195-210Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: No Brasil, as especies de Mikania glomerata e M. laevigata (popularmente conhecidas como guaco), sao amplamente utilizadas para o tratamento de diversas condicoes inflamatorias e alergicas, principalmente as do sistema respiratorio. Em virtude das propriedades farmacologicas atribuidas a essas especies, os fitoterapicos a base de guaco tem seu uso amplamente difundido na populacao brasileira, sendo incluidos nos programas de fitoterapia do Sistema Unico de Saude (SUS). Apesar do reconhecimento terapeutico destes medicamentos, apenas tres metodos analiticos foram encontrados na literatura para o controle de qualidade de especialidades farmaceuticas a base de guaco. Alem destes metodos serem bastante laboriosos, pois envolvem diversas etapas de extracao, avaliam somente a 1,2-benzopirona (cumarina), nao sendo determinado nenhum outro metabolito relacionado aos efeitos farmacologicos do guaco. O objetivo do presente trabalho foi o desenvolvimento e validacao de metodos analiticos para quantificacao de cinco metabolitos do guaco (cumarina, acido o-cumarico, dihidrocumarina, siringaldeido e acido caurenoico) atraves de CLAE-DAD e CLAE-EM/EM sem a necessidade de nenhum pre-tratamento das amostras. O metodo atraves de CLAE-DAD foi desenvolvido e validado em uma coluna Zorbax XDB C18 (150 x 4.6 mm, 5 ƒÝm) utilizando como fase movel uma mistura de agua/metanol/acetonitrila/acido formico (65:30:5:1, v/v/v/v), com fluxo de 1.0 mL min-1 em modo isocratico de eluicao. O volume de injecao foi de 20 £gL sendo os analitos monitorados em comprimento de onda unico de 274 nm. Para todos os compostos, o metodo foi linear em um intervalo compreendido de 1.0 a 200 ƒÝg mL-1. O intervalo de recuperacao para o ensaio de exatidao foi de 97.9 a 101.8% com um DPR < 5% para precisao intra-dia e inter-dia. O estudo de robustez indicou que o fluxo e um fator critico. Os metodos atraves de CLAE-EM/EM foram desenvolvidos e validados em uma coluna XBridge C18 (150 x 2,1mm, 5 ƒÝm) utilizando como fase movel um gradiente de eluicao entre agua e acetonitrila contendo 0,05% de acido formico ou 5 mM de formiato de amonio de acordo com as caracteristicas de ionizacao de cada composto. O fluxo foi mantido em 200 £gL min-1 no modo positivo de ionizacao e 220 mL min-1 no modo negativo de ionizacao. Os metodos apresentaram linearidade nas faixas de 1,25 a 400 ng mL-1 para cumarina, 10 a 600 ng mL-1 para dihidrocumarina, 5 a 250 ng mL-1 para o acido caurenoico e 25 a 500 ng mL-1 para siringaldeido e acido o-cumarico. O intervalo de recuperacao para o ensaio de exatidao foi de 95,3 a 103,8% com um DPR < 6,3% para precisao intra-dia e inter-dia. Os novos metodos podem ser aplicados para a quantificacao destes metabolitos nas apresentacoes farmaceuticas xarope e solucao oral, sendo, portanto, uma alternativa para o controle de qualidade deste tipo de produto na industria farmaceutica.Abstract: Mikania glomerata and M. laevigata popularly known as guaco are widely used for the treatment of several inflammatory and alergic conditions, particularly in the respiratory system, probably acting through their bronchodilator and antinflamatory properties. Due to therapeutic proprerties attributed to these species, guaco preparation has a widespread used in brazilian population and it has beem included in the government phyoterapy programs. Despite the widespread use, only three analytical methods were found in the literature for the quality control of guaco pharmaceutical preparations. Furthermore, these methods are very laborious (with several extraction processes required) and assess only 1,2 benzopyrone content (coumarin). Therefore do not quantify any other metabolites related to the pharmacological effects of guaco. The aim of this work is to development and validation of analytical methods to determine five guaco secondary metabolites (coumarin, o-coumaric acid, dihydrocoumarin, kaurenoic acid and syringaldehyde) by HPLC-DAD and HPLC-MS/MS without need any pretreatment of the samples. HPLC-DAD chromatographic separations were carried out on a Zorbax Eclipse XDB C18 150 x 4.6 mm i.d., 5-ƒÝm particle size column. The mobile phase consisted of water/methanol/acetonitrile/formic acid (65:30:5:1, v/v/v/v) at a flow rate of 1.0 mL min-1 in isocratic elution mode. The detection wavelength was set at 274 nm and the injection volume of the sample was 20 ƒÝL. For all compounds, the method was linear, over a range of 1.0 - 200 ƒÝg mL-1. The range of recovery was 97.9 to 101.8% with a RSD < 5% for intra-day and inter-day precision. The robustness study indicated that flow rate is a critical factor. HPLC-MS/MS methods were carried out using Xbridge C18 150 x 2.1 mm i.d, 5 £gm particle size column. The mobile phase consisted in a gradient of water and acetonitrile containig 0.05% formic acid or 5 mM ammonium formate according the ionization characteristics of each analyte. The flow rates were 200 £gL min-1 to the positive ionization mode and 220 £gL min-1 to the negative ionization mode. The volume of injections was maintened 10 £gL in both methods. The methods showed linearity over a range of 1.25 to 400 ng mL-1 for coumarin, 10 to 600 ng mL-1 for dihydrocoumarin, 5 to 250 ng mL-1 kaurenoic acid and 25 to 500 ng mL-1 for syringaldehyde and o-coumaric acid. The range of recovery was 95.3 to 103.8% with a RSD < 6.3% for intra-day and inter-day precision. These methods are presented as an alternative for the quality control of pharmaceutical preparations containing guaco.234f. : il. [algumas color.], tabs., grafs.application/pdfDisponível em formato digitalTesesPlantas medicinaisGuacoFarmáciaDeterminação de metabólitos secundários do guaco nas especialidades farmacêuticas xarope e solução oral via CLAE-DAD e CLAE-EM/EMinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFPRinstname:Universidade Federal do Paraná (UFPR)instacron:UFPRinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINALDissertacao Joao Gasparetto.pdfapplication/pdf3744823https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/23054/1/Dissertacao%20Joao%20Gasparetto.pdf8e5ac74ed326a63ad092496644d60ce8MD51open accessTEXTDissertacao Joao Gasparetto.pdf.txtExtracted Texttext/plain401197https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/23054/2/Dissertacao%20Joao%20Gasparetto.pdf.txt399fe2759cf60c50cf9c24e431d434acMD52open accessTHUMBNAILDissertacao Joao Gasparetto.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1454https://acervodigital.ufpr.br/bitstream/1884/23054/3/Dissertacao%20Joao%20Gasparetto.pdf.jpgc5281db68065e96e5c12eea925c9bc47MD53open access1884/230542022-11-28 12:48:05.265open accessoai:acervodigital.ufpr.br:1884/23054Repositório de PublicaçõesPUBhttp://acervodigital.ufpr.br/oai/requestopendoar:3082022-11-28T15:48:05Repositório Institucional da UFPR - Universidade Federal do Paraná (UFPR)false
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