Diagnóstico precoce de gestação em vacas zebuínas pela detecção de glicoproteínas associadas à prenhez.

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2012
Autor(a) principal: BRAGANÇA, Gláucia Mota
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: UFRA
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Vacas zebuínas - Reprodução
Bovinos
PAG
ELISA
Prenhez - Glicoproteínas
Vacas - Gestação
Produção Animal
Resumo: Ministério da Educação e Universidade Federal Rural da Amazônia.
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spelling Diagnóstico precoce de gestação em vacas zebuínas pela detecção de glicoproteínas associadas à prenhez.Vacas zebuínas - ReproduçãoBovinosPAGELISAPrenhez - GlicoproteínasVacas - GestaçãoProdução AnimalMinistério da Educação e Universidade Federal Rural da Amazônia.As glicoproteínas associadas à prenhez são substâncias expressas na placenta de mamíferos ungulados. Em ruminantes, essas proteínas são secretadas continuamente desde a implantação embrionária até o parto. Recentemente, estas proteínas tem sido correlacionadas e utilizadas para o diagnostico precoce da gestação em bovinos. Assim, objetivou-se com este estudo avaliar um teste ELISA-PAG que utiliza a detecção de glicoproteínas para o diagnóstico precoce de gestação em vacas zebuínas de corte, determiando a acurácia do método aos 25 e 28 dias após inseminação artificial em tempo fixo, comparando-o com a utilização da ultrassonografia no mesmo período. O estudo foi conduzido em uma fazenda situada na mesorregião do Nordeste Paraense, no qual se utilizou 130 fêmeas mestiças da raça Nelore (Bos taurus indicus), saudáveis e submetidas a um protocolo hormonal para inseminação artificial em tempo fixo. Ao 25° e 28° dia pós-inseminação, foram realizados exames ultrassonográficos e colheitas de sangue para determinação das glicoproteínas associadas à prenhez. As amostras de sangue foram centrifugadas, e os soros sangüíneos foram aliquotados e acondicionados a -20 °C para posterior determinação das glicoproteínas associadas à prenhez, utilizando um ELISA comercial conforme orientações do fabricante. Os testes foram realizados no Laboratório de Virologia da Seção de Meio Ambiente do Instituto Evandro Chagas. Os resultados da densidade óptica de leitura foram usados para validar o teste em que as amostras com resultados > 0.300 foram consideradas positivas (prenhe) e aquelas com resultados < 0.300, negativas (não prenhe). Também foi feita avaliação visual da placa pela cor (poços com solução amarela, positivo; poços com solução translúcida, negativo). Os resultados verificados foram classificados como diagnóstico positivo correto (a), diagnóstico positivo incorreto (b), diagnóstico negativo correto (c), diagnóstico negativo incorreto (d). A partir desses valores foram calculados de cada método a sensibilidade (100 x a/a + d), a especificidade (100 x c/c + b), o valor preditivo positivo (100 x a/a + b) e o valor preditivo negativo (100 x c/c + d). O teste do Qui-quadrado foi utilizado para comparar as sensibilidades e especificidades dos dois métodos de diagnóstico de gestação (ELISA-PAG e ultrassonografia). Diferenças entre vacas prenhes e não prenhes para o ELISA-PAG foram analisadas usando o test-t Studenfs. A acurácia do ELISA-PAG foi igual ao 25° e 28° dia pósinseminação, com sensibilidade de 100%, especificidade 92,86%, valor preditivo positivo 96,70% e valor preditivo negativo 100%. Todavia, a ultrassonografia aos 25° e 28° dias, respectivamente, apresentou sensibilidades de 62,50% e 93,18% (p < 0,05), especificidades de 95,24% e 95,24%, valores preditivos positivos de 96,49% e 97,63%, e valores preditivos negativos de 54,79% e 86,96% (p < 0,05). Houve diferenças significativas entre o ELISAPAG e ultrassonografia em realção as sensibilidades e valores preditivos negativos, porém os exames foram equivalentes em especificidades e valores preditivos positivos. Conclui-se que o teste ELISA-PAG demonstrou-se mais sensível e tão específico quanto à ultrassonografia no período estudado, com alta precisão especialmente na identificação de fêmeas não gestantes, podendo ser utilizado com segurança a partir do 25° dia após a IATF para obtenção precoce do diagnóstico de prenhez em fêmeas zebuínas.Pregnancy-associated glycoproteins (PAG) are substances expressed in the placenta of ungulate mammals. In ruminants, these proteins are secreted continuously from the embryonic implantation until the delivery. Recently, these proteins have been correlated and used for early pregnancy diagnosis in cattle. Thus, the objective of this study was to evaluate a PAGELISA for early pregnancy diagnosis in zebu beef cows, determining the accuracy of the method on the 25th and 28th days after a fixed time artificial insemination, comparing it with the use of ultrasound in the same period. The study was conducted on a farm located in the Northeast region of Pará State, in which 130 healthy Nelore (Bos taurus indicus) females were used and subjected to a hormonal protocol for fixed time artificial insemination. On the 25th and 28th days post-insemination, ultrasound examinations were performed and blood samples for the determination of PAG were collected. Blood samples were centrifuged, and the serum sample were aliquoted and stored at -20oC for later analysis of pregnancy associated glycoproteins, using a commercial ELISA in accordance with the manufacturer's guidelines. The tests were performed at the Laboratory of Virology of the Environment Section of Instituto Evandro Chagas. The results of the reading optical density were used to validate the test in which the results of samples were considered positive when > 0.300 (pregnant) and were negative when < 0.300 (non pregnant). The visual assessment of the plate is in accordance with the color (yellow solution wells, positive; wells with translucent solution, negative) was also performed. The results of transrectal ultrasonography and PAG-ELISA were arranged as follows: correct positive diagnosis (a), incorrect positive diagnosis (b), correct negative diagnosis (c), and incorrect negative diagnosis (d). From these values the sensitivity (100 x a/a + d), the specificity (100 x c/c + b), the positive predictive value (100 x a/a + b) and the negative predictive value (100 x c/c + d) of each test were calculated. The Chi-square test was used to compare the sensitivities and specificities of the two pregnancy tests (ultrasound x PAG-ELISA). Differences between pregnant and non-pregnant cows in the PAG-ELISA were statistically analyzed by using a Studenfs t-test. The accuracy of PAGELISA was equal on 25th and 28th days post fixed timed artificial insemination with sensitivity 100%, specificity 92,86%, positive predictive value 96,70% and negative predictive value 100%. However, the ultrasound scanning on 25th and 28th days, respectively, showed sensitivity 62,50% and 93,18% (p < 0,05), specificity 95,24% and 95,24%, positive predictive value 96,49% and 97,63%, and negative predictive value 54,79% and 86,96% (p < 0,05). There were significant differences between PAG-ELISA and ultrasound on the sensitivities and negative predictive value. However, the tests were equivalent in specificity and positive predictive values. In conclusion, the PAG-ELISA proved to be more sensitive and as specific as the ultrasound during the study period, with high accuracy on the identification of non pregnant and can be safely used from the 25th day after fixed timed artificial insemination for obtaining early pregnancy diagnosis in Zebu females.UFRAVIANA, Rinaldo B.BRAGANÇA, Gláucia Mota2019-05-07T18:47:14Z2019-05-07T18:47:14Z2012info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfBRAGANÇA, Gláucia Mota. Diagnóstico precoce de gestação em vacas zebuínas pela detecção de glicoproteínas associadas à prenhez. Orientador:Rinaldo B. Viana. 2012. 67 f. Dissertação (Mestrado em Saúde e Produção Animal na Amazônia) - Universidade Federal Rural da Amazônia, Belém, 2012.repositorio.ufra.edu.br/jspui/handle/123456789/704Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 United Stateshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/us/info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UFRAinstname:Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA)instacron:UFRA2019-05-07T18:48:17Zoai:repositorio.ufra.edu.br:123456789/704Repositório Institucionalhttp://repositorio.ufra.edu.br/jspui/PUBhttp://repositorio.ufra.edu.br/oai/requestrepositorio@ufra.edu.br || riufra2018@gmail.comopendoar:2019-05-07T18:48:17Repositório Institucional da UFRA - Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA)false
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