Caracterização diferencial da senescência celular induzida por doxorrubicina em células de câncer de mama cultivadas em monocamada e esferoides

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Bitencourt, Thais Cardoso
• Orientador(a): Chiela, Eduardo Cremonese Filippi
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Doxorrubicina; Câncer de mama; Senescência celular
• Palavras-chave em Inglês: Doxorubicin; Cellular senescence; Breast cancer
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/308378

A senescência celular, caracterizada pela parada permanente do ciclo celular, pode ocorrer por erosão telomérica ou induzida precocemente. As células senescentes apresentam diversas alterações morfofuncionais como aumento do tamanho celular e nuclear, disfunção do fluxo autofágico e no funcionamento lisossomal, perturbações de citoesqueleto e alterações na membrana plasmática. Estas características são acompanhadas de mudanças metabólicas e moleculares, incluindo aumento de expressão de inibidores de CDKs, redução de Lamina B1 e aumento da atividade da enzima beta-galactosidase lisossomal (SA-β-gal). A doxorrubicina (Doxo) é uma droga antineoplásica que promove dano ao DNA e, subsequentemente, parada no ciclo celular seguida de apoptose ou senescência. A caracterização destes desfechos induzidos pela Doxo em células de câncer de mama tem sido realizada em modelos de cultura celular bidimensional (2D). Porém, estes modelos apresentam limitações que dificultam a compreensão de respostas e desfechos celulares. Compreender o fenótipo das células senescentes em modelos in vitro mais complexos é relevante pois a senescência tem sido associada a um prognóstico ruim, possivelmente devido à secreção de fatores solúveis e vesículas com efeitos pró-tumorais. Neste estudo investigamos os efeitos in vitro a longo prazo da exposição à Doxo em duas linhagens celulares de câncer de mama humano, MCF7 e MDA-MB-231, cultivadas em 2D e em esferoides obtidos pela metodologia do hanging drop. Em monocamada, Doxo induziu um aumento transitório nos marcadores canônicos de senescência, com heterogeneidade pronunciada entre as células tratadas. A longo prazo, porém, as células tumorais resistentes à Doxo passaram a predominar, levando ao recrescimento populacional. Considerando a comparação entre culturas 2D e 3D, a Doxo reduziu a área dos esferoides de modo dose-dependente, com sensibilidade relativa semelhante entre os modelos. Além disso, as células dos esferoides apresentaram aumento do tamanho nuclear e complexidade intracelular, o que pode servir como indicadores de senescência celular em modelos 3D. Por outro lado, não observamos aumento da atividade de SA-β-gal nas culturas 3D. Esses achados ressaltam a necessidade de aprimorar estudos usando culturas 3D, oferecendo evidências mais precisas e incrementando a translacionalidade de modelos in vitro.