Avaliação de variantes no gene HULC como modificadoras de fenótipo em pacientes com fenilcetonúria

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Fontana, Juliana Cristine
• Orientador(a): Sperb, Fernanda
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Erros inatos do metabolismo; Fenótipo; Fenilcetonuria
• Palavras-chave em Inglês: Inborn errors of metabolism; Phenylalanine hydroxylase; Phenylketonuria; HULC gene; Phenotype modifiers
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/300367

Fenilcetonúria (PKU) é a doença genética em que o metabolismo da fenilalanina está defeituoso e leva ao acúmulo plasmático de fenilalanina, bem como a quadros neurológicos. Entre as causas, estão as alterações no gene PAH, que codifica a enzima fenilalanina hidroxilase, responsável pela conversão da fenilalanina em tirosina. Em um estudo com roedores, foi demonstrado que o RNA longo não codificante (lncRNA) HULC, transcrito pelo gene HULC, é superexpresso em carcinoma hepatocelular, e possui associação com a enzima PAH, já que o lncRNA auxiliou a regular a atividade enzimática e a elevar a atividade residual da enzima de algumas variantes específicas do gene PAH. O objetivo da presente dissertação consistiu em avaliar as variantes na região codificante do gene HULC presentes em pacientes com PKU que participaram de estudo prévio de diagnóstico molecular e o potencial destas variantes como modificadoras de fenótipo para casos em que a correlação genótipo-fenótipo era discordante. Para isso, foram avaliados 40 pacientes que participaram do estudo prévio no diagnóstico molecular de PKU e a análise das variantes do gene HULC foi realizada através de amplificação por PCR e sequenciamento de Sanger. Dados clínicos foram correlacionados com os achados moleculares e foi realizada análise de interação para as moléculas de lncRNAs mutantes para avaliação nos casos discordantes entre o fenótipo predito e o observado. Três variantes foram identificadas, g.8652345C>T (rs1328868) e g.8652258A>T (rs536349545) em frequência alélica de 37% e 1,25%, respectivamente, similar à reportada nas bases de dados gnomAD e AbraOM. A variante g.8653784_8653831del, não descrita na literatura, foi identificada em todos os indivíduos. Nove pacientes apresentaram discordância entre fenótipo predito e fenótipo clínico em relação ao genótipo. Foi possível identificar a estrutura secundária do lncRNA HULC selvagem e dos pacientes estudados, com alterações relevantes da conformação tridimensional. Este foi o primeiro estudo que investigou variantes genéticas do lncRNA HULC em pacientes com PKU e sua ação como modificadoras de fenótipo, em diferentes genótipos de PAH. O baixo tamanho amostral e a alta diversidade de genótipos apresentados limitou a análise. Foi possível identificar uma variante não descrita na literatura, e analisar a possível influência do gene HULC e do seu transcrito na expressão do fenótipo de pacientes com PKU.