Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA
Ano de defesa: | 2006 |
---|---|
Autor(a) principal: | |
Orientador(a): | |
Banca de defesa: | |
Tipo de documento: | Tese |
Tipo de acesso: | Acesso aberto |
Idioma: | por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal do Rio Grande do Norte
|
Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde
|
Departamento: |
Ciências da Saúde
|
País: |
BR
|
Palavras-chave em Português: | |
Palavras-chave em Inglês: | |
Área do conhecimento CNPq: | |
Link de acesso: | https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/13112 |
Resumo: | Control of human visceral leishmaniasis in endemic regions is hampered in part by the lack of knowledge with respect of the role reservoirs and vector. In addition, there is not yet an understanding of how non-symptomatic subclinical infection might influence the maintenance of infection in a particular locality. Of worrisome is the limited accessibility to medical care in places with emerging drug resistance. There is still no available protective vaccine either for humans or other reservoirs. Leishmania species are protozoa that express multiple antigens which are recognized by the vertebrate immune system. Since there is not one immunodominant epitope recognized by most hosts, strategies must be developed to optimize selection of antigens for prevention and immunodiagnosis. For this reason, we generated a cDNA library from the intracellular amastigote form of Leishmania chagasi, the causative agent of South American visceral leishmaniasis. We employed a two-step expression screen of the library to systematically identify T and T-dependent B cell antigens. The first step was aimed at identifying the largest possible number of clones producing an epitope-containing polypeptide with a pool of sera from Brazilians with documented visceral leishmaniasis. After removal of clones encoding heat shock proteins, positive clones underwent a second step screen for their ability to cause proliferation and IFN-γ responses of T cells from immune mice. Six unique clones were selected from the second screen for further analysis. The clones encoded part of the coding sequence of glutamine synthetase, transitional endoplasmic reticulum ATPase, elongation factor 1γ, kinesin K-39, repetitive protein A2, and a hypothetical conserved protein. Humans naturally infected with L. chagasi mounted both cellular and antibody responses to these protein Preparations containing multiple antigens may be optimal for immunodiagnosis and protective vaccines against Leishmania |
id |
UFRN_ebf7d732d79d9bf97976394499cf6349 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:https://repositorio.ufrn.br:123456789/13112 |
network_acronym_str |
UFRN |
network_name_str |
Repositório Institucional da UFRN |
repository_id_str |
|
spelling |
Salha, Daniella Regina Arantes Martinshttp://lattes.cnpq.br/3695151190501921http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4785584A3&dataRevisao=nullCarvalho, Lain Ponteshttp://lattes.cnpq.br/6148007775748893Pompeu, Margarida Maria de Limahttp://lattes.cnpq.br/2618502430533433Santos, Elizeu Antunes doshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=nullBraz, Regina de Fátima dos Santoshttp://lattes.cnpq.br/9442000157600332Jerônimo, Selma Maria Bezerra2014-12-17T14:13:20Z2008-04-032014-12-17T14:13:20Z2006-12-05SALHA, Daniella Regina Arantes Martins. Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA. 2006. 92 f. Tese (Doutorado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2006.https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/13112Control of human visceral leishmaniasis in endemic regions is hampered in part by the lack of knowledge with respect of the role reservoirs and vector. In addition, there is not yet an understanding of how non-symptomatic subclinical infection might influence the maintenance of infection in a particular locality. Of worrisome is the limited accessibility to medical care in places with emerging drug resistance. There is still no available protective vaccine either for humans or other reservoirs. Leishmania species are protozoa that express multiple antigens which are recognized by the vertebrate immune system. Since there is not one immunodominant epitope recognized by most hosts, strategies must be developed to optimize selection of antigens for prevention and immunodiagnosis. For this reason, we generated a cDNA library from the intracellular amastigote form of Leishmania chagasi, the causative agent of South American visceral leishmaniasis. We employed a two-step expression screen of the library to systematically identify T and T-dependent B cell antigens. The first step was aimed at identifying the largest possible number of clones producing an epitope-containing polypeptide with a pool of sera from Brazilians with documented visceral leishmaniasis. After removal of clones encoding heat shock proteins, positive clones underwent a second step screen for their ability to cause proliferation and IFN-γ responses of T cells from immune mice. Six unique clones were selected from the second screen for further analysis. The clones encoded part of the coding sequence of glutamine synthetase, transitional endoplasmic reticulum ATPase, elongation factor 1γ, kinesin K-39, repetitive protein A2, and a hypothetical conserved protein. Humans naturally infected with L. chagasi mounted both cellular and antibody responses to these protein Preparations containing multiple antigens may be optimal for immunodiagnosis and protective vaccines against LeishmaniaO controle da Leishmaniose Visceral em regiões endêmicas é em parte dificultado pela falta de conhecimento em relação ao papel dos reservatórios e vetores, não havendo ainda vacina disponível. Leishmania s.p são protozoários que expressam múltiplos antígenos reconhecidos pelo sistema imune dos hospedeiros. Devido à ausência de um epítopo imunodominante reconhecido pela maioria dos hospedeiros, estratégias para a identificação e seleção de novos antígenos para a prevenção e imunodiagnóstico. Nossa estratégia foi construir uma biblioteca de cDNA da forma amastigota da L. chagasi, com subseqüente realizadção de dupla varredura da biblioteca para sistematicamente identificar antígenos específicos de células T e B. A primeira etapa teve como objetivo a identificação do maior número de clones produtores de peptídeos através da utilização de um pool de soro de indivíduos com Leishmaniose Visceral. Os clones codificadores de proteínas de choque térmico foram removidos e os clones restantes foram submetidos à segunda etapa da varredura, que consistiu na avalição capacidade destes antígenos em induzir estimulação e proliferaçõa de linfócitos T de camundongos resistentes à infecção por L. chagasi. Seis clones foram selecionados após a segunda varredura. Os clones codificaram parte da seqüência da glutamina sintetase, ATPase do retículo endoplasmático, Fator de alongamento 1 γ, Kinesina K-39 proteína repetitiva A2, e proteína hipotética conservada. Indivíduos naturalmente infectados com L. chagasi desenvolveram respostas imunes celular e humoral frente a essas proteínas. Formulações contendo múltiplos antígenos podem servir como excelentes métodos para imunodiagnóstico e vacinaçãoapplication/pdfporUniversidade Federal do Rio Grande do NortePrograma de Pós-Graduação em Ciências da SaúdeUFRNBRCiências da SaúdeLeishmaniose VisceralLeishmania chagasiAntígeno recombinanteCitocinasVisceral leishmaniasisLeishmania chagasiCNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA::CLINICA MEDICA::DOENCAS INFECCIOSAS E PARASITARIASAntígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNAinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFRNinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)instacron:UFRNTEXTDaniellaRAM.pdf.txtDaniellaRAM.pdf.txtExtracted texttext/plain175722https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/6/DaniellaRAM.pdf.txtd9406476b969d449c463a980cdbab97dMD56AntígenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdf.txtAntígenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdf.txtExtracted texttext/plain175633https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/8/Ant%c3%adgenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdf.txt5ef2d370b434f254b971f00db04c7e56MD58THUMBNAILDaniellaRAM.pdf.jpgDaniellaRAM.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg2513https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/7/DaniellaRAM.pdf.jpg4d18dbdf34a4a2141f33899137a0d2e0MD57AntígenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdf.jpgAntígenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg1229https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/9/Ant%c3%adgenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdf.jpg0f7e82ed30895720ee3035d26da5d94cMD59ORIGINALAntígenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdfapplication/pdf825529https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/1/Ant%c3%adgenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdff26b539b2cb49d4dbd7f0f77cd978d11MD51123456789/131122019-05-26 02:13:16.32oai:https://repositorio.ufrn.br:123456789/13112Repositório de PublicaçõesPUBhttp://repositorio.ufrn.br/oai/opendoar:2019-05-26T05:13:16Repositório Institucional da UFRN - Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN)false |
dc.title.por.fl_str_mv |
Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA |
title |
Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA |
spellingShingle |
Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA Salha, Daniella Regina Arantes Martins Leishmaniose Visceral Leishmania chagasi Antígeno recombinante Citocinas Visceral leishmaniasis Leishmania chagasi CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA::CLINICA MEDICA::DOENCAS INFECCIOSAS E PARASITARIAS |
title_short |
Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA |
title_full |
Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA |
title_fullStr |
Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA |
title_full_unstemmed |
Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA |
title_sort |
Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA |
author |
Salha, Daniella Regina Arantes Martins |
author_facet |
Salha, Daniella Regina Arantes Martins |
author_role |
author |
dc.contributor.authorID.por.fl_str_mv |
|
dc.contributor.authorLattes.por.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/3695151190501921 |
dc.contributor.advisorID.por.fl_str_mv |
|
dc.contributor.advisorLattes.por.fl_str_mv |
http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4785584A3&dataRevisao=null |
dc.contributor.referees1.pt_BR.fl_str_mv |
Carvalho, Lain Pontes |
dc.contributor.referees1ID.por.fl_str_mv |
|
dc.contributor.referees1Lattes.por.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/6148007775748893 |
dc.contributor.referees2.pt_BR.fl_str_mv |
Pompeu, Margarida Maria de Lima |
dc.contributor.referees2ID.por.fl_str_mv |
|
dc.contributor.referees2Lattes.por.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/2618502430533433 |
dc.contributor.referees3.pt_BR.fl_str_mv |
Santos, Elizeu Antunes dos |
dc.contributor.referees3ID.por.fl_str_mv |
|
dc.contributor.referees3Lattes.por.fl_str_mv |
http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=null |
dc.contributor.referees4.pt_BR.fl_str_mv |
Braz, Regina de Fátima dos Santos |
dc.contributor.referees4ID.por.fl_str_mv |
|
dc.contributor.referees4Lattes.por.fl_str_mv |
http://lattes.cnpq.br/9442000157600332 |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Salha, Daniella Regina Arantes Martins |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Jerônimo, Selma Maria Bezerra |
contributor_str_mv |
Jerônimo, Selma Maria Bezerra |
dc.subject.por.fl_str_mv |
Leishmaniose Visceral Leishmania chagasi Antígeno recombinante Citocinas |
topic |
Leishmaniose Visceral Leishmania chagasi Antígeno recombinante Citocinas Visceral leishmaniasis Leishmania chagasi CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA::CLINICA MEDICA::DOENCAS INFECCIOSAS E PARASITARIAS |
dc.subject.eng.fl_str_mv |
Visceral leishmaniasis Leishmania chagasi |
dc.subject.cnpq.fl_str_mv |
CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA::CLINICA MEDICA::DOENCAS INFECCIOSAS E PARASITARIAS |
description |
Control of human visceral leishmaniasis in endemic regions is hampered in part by the lack of knowledge with respect of the role reservoirs and vector. In addition, there is not yet an understanding of how non-symptomatic subclinical infection might influence the maintenance of infection in a particular locality. Of worrisome is the limited accessibility to medical care in places with emerging drug resistance. There is still no available protective vaccine either for humans or other reservoirs. Leishmania species are protozoa that express multiple antigens which are recognized by the vertebrate immune system. Since there is not one immunodominant epitope recognized by most hosts, strategies must be developed to optimize selection of antigens for prevention and immunodiagnosis. For this reason, we generated a cDNA library from the intracellular amastigote form of Leishmania chagasi, the causative agent of South American visceral leishmaniasis. We employed a two-step expression screen of the library to systematically identify T and T-dependent B cell antigens. The first step was aimed at identifying the largest possible number of clones producing an epitope-containing polypeptide with a pool of sera from Brazilians with documented visceral leishmaniasis. After removal of clones encoding heat shock proteins, positive clones underwent a second step screen for their ability to cause proliferation and IFN-γ responses of T cells from immune mice. Six unique clones were selected from the second screen for further analysis. The clones encoded part of the coding sequence of glutamine synthetase, transitional endoplasmic reticulum ATPase, elongation factor 1γ, kinesin K-39, repetitive protein A2, and a hypothetical conserved protein. Humans naturally infected with L. chagasi mounted both cellular and antibody responses to these protein Preparations containing multiple antigens may be optimal for immunodiagnosis and protective vaccines against Leishmania |
publishDate |
2006 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2006-12-05 |
dc.date.available.fl_str_mv |
2008-04-03 2014-12-17T14:13:20Z |
dc.date.accessioned.fl_str_mv |
2014-12-17T14:13:20Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
format |
doctoralThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.citation.fl_str_mv |
SALHA, Daniella Regina Arantes Martins. Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA. 2006. 92 f. Tese (Doutorado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2006. |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/13112 |
identifier_str_mv |
SALHA, Daniella Regina Arantes Martins. Antígenos da forma amastigota de Leishmania chagasi identificados por dupla varredura da biblioteca de cDNA. 2006. 92 f. Tese (Doutorado em Ciências da Saúde) - Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Natal, 2006. |
url |
https://repositorio.ufrn.br/jspui/handle/123456789/13112 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.format.none.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal do Rio Grande do Norte |
dc.publisher.program.fl_str_mv |
Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde |
dc.publisher.initials.fl_str_mv |
UFRN |
dc.publisher.country.fl_str_mv |
BR |
dc.publisher.department.fl_str_mv |
Ciências da Saúde |
publisher.none.fl_str_mv |
Universidade Federal do Rio Grande do Norte |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Institucional da UFRN instname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN) instacron:UFRN |
instname_str |
Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN) |
instacron_str |
UFRN |
institution |
UFRN |
reponame_str |
Repositório Institucional da UFRN |
collection |
Repositório Institucional da UFRN |
bitstream.url.fl_str_mv |
https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/6/DaniellaRAM.pdf.txt https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/8/Ant%c3%adgenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdf.txt https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/7/DaniellaRAM.pdf.jpg https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/9/Ant%c3%adgenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdf.jpg https://repositorio.ufrn.br/bitstream/123456789/13112/1/Ant%c3%adgenosFormaAmastigota_Salha_2006.pdf |
bitstream.checksum.fl_str_mv |
d9406476b969d449c463a980cdbab97d 5ef2d370b434f254b971f00db04c7e56 4d18dbdf34a4a2141f33899137a0d2e0 0f7e82ed30895720ee3035d26da5d94c f26b539b2cb49d4dbd7f0f77cd978d11 |
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv |
MD5 MD5 MD5 MD5 MD5 |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Institucional da UFRN - Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN) |
repository.mail.fl_str_mv |
|
_version_ |
1797777782397206528 |