Desenvolvimento de um teste colorimétrico para triagem da atividade leishmanicida de compostos utilizando Leishmania amazonensis expressando a enzima beta-galactosidase
| Ano de defesa: | 2013 |
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Resumo: | Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-graduação em Biotecnologia e Biociências, Florianópolis, 2013 |
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Universidade Federal de Santa CatarinaTonini, Maiko LuisSteindel, Mario2013-12-05T23:10:02Z2013-12-05T23:10:02Z2013318382https://repositorio.ufsc.br/handle/123456789/107082Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Programa de Pós-graduação em Biotecnologia e Biociências, Florianópolis, 2013No presente trabalho transfectamos uma cepa de Leishmania amazonensis com um plasmídeo contendo o gene da ?-galactosidase, visando estabelecer um ensaio colorimétrico para triagem de compostos ativos contra amastigotas intracelulares de leishmania. A transfecção não alterou o crescimento de promastigotas em cultura, a infectividade de células THP-1 e de camundongos Balb/c. A atividade da enzima foi diretamente proporcional ao número de parasitos. A inibição do crescimento dos parasitos intracelulares pelo fármaco de referência Anfotericina B, determinada tanto pelo método colorimétrico quanto por contagem microscópica dos parasitos, produziu resultados semelhantes, validando o ensaio. O teste colorimétrico também foi aplicado com sucesso para avaliar a atividade de uma classe de moléculas análogas e derivadas do ácido gálico. O estudo da correlação estrutura atividade mostrou que estas moléculas possuem uma atividade leishmanicida pouco seletiva. Algumas melhorias como a transfecção integrativa e estável, bem como padronização deste método com outras espécies de Leishmania ainda são desejáveis. Contudo, o ensaio com L. amazonensis expressando ?-galactosidase foi robusto, sensível, reprodutível e rápido na avaliação da atividade leishmanicida de compostos <br>1 v.| tabs., ils., grafs.porBiotecnologiaLeishmanioseBeta-galactosidaseQuimioterapiaDesenvolvimento de um teste colorimétrico para triagem da atividade leishmanicida de compostos utilizando Leishmania amazonensis expressando a enzima beta-galactosidaseinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisreponame:Repositório Institucional da UFSCinstname:Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)instacron:UFSCinfo:eu-repo/semantics/openAccessORIGINAL318382.pdfapplication/pdf1686846https://repositorio.ufsc.br/bitstream/123456789/107082/1/318382.pdf51ac5e51f122726f40392a9cb814daf3MD51TEXT318382.pdf.txt318382.pdf.txtExtracted texttext/plain177986https://repositorio.ufsc.br/bitstream/123456789/107082/2/318382.pdf.txt193abb9a633eddf479e07176ba7021ccMD52123456789/1070822014-01-19 00:29:22.062oai:repositorio.ufsc.br:123456789/107082Repositório InstitucionalPUBhttp://150.162.242.35/oai/requestsandra.sobrera@ufsc.bropendoar:23732014-01-19T02:29:22Repositório Institucional da UFSC - Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC)false |
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