Efeito da dieta enriquecida com ômega-3 ou ômega-6 na morte celular induzida por cininas na lesão por isquemia e reperfusão de fígados de ratos

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Paio, Mayra de Almeida [UNIFESP]
• Orientador(a): Nagaoka, Márcia Regina [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• dARK ID: ark:/48912/001300002v37c
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
• Palavras-chave em Português: Cininas; Fígado; Traumatismo por reperfusão; Ácidos graxos ômega-3; Ácidos graxos ômega-6; Lesão
• Link de acesso: https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/48267; https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2974562

Introdução: O sistema cinina é representado pela bradicinina (BK), agonista do receptor B2 (B2R). Ação da carboxipeptidase N na BK gera a des-Arg9-bradicinina (DABK), que se liga ao receptor B1 (B1R). Recentemente, nós verificamos o envolvimento de B1R e B2R com apoptose e necrose, respectivamente, decorrente da lesão por isquemia e reperfusão (IRI) em fígados de ratos. O papel dos ácidos graxos essenciais (famílias ômega-3 (ômega-3) e ômega-6 (ômega-6)) na IRI ainda é controverso. Objetivo: estudar o efeito do pré-tratamento com dietas ricas com ômega-3 ou ômega-6 na morte celular induzida por cininas decorrente da isquemia a frio de 24 horas e reperfusão hepática morna ex vivo. Métodos: ratos Wistar machos foram alimentados com dieta controle, rica em ômega-3 ou ômega-6 por 8 semanas. Foi realizado o modelo experimental de isquemia e reperfusão: isolamento do fígado, exsanguinação e infusão da solução da Universidade de Wisconsin. Após isquemia, o órgão foi reperfundido com solução de Krebs e NaCl, BK ou DABK foi injetada in bolus. Grupo não isquêmico também foi realizado. Alanina e aspartato aminotransferase foram dosadas no soro, B1R foi detectado por Western Blotting e citocinas e quimiocinas pelo sistema Magpix (Millipore). Para avaliação necrose foi utilizado azul de Tripan, e para apoptose, imunodetecção da caspase-3 clivada, de Bcl-2 e ensaio do TUNEL. Resultados: aumento no peso dos animais após dieta enriquecida com ômega-6. As dietas ricas em ômega-3 e ômega-6 causaram aumento sérico das aminotransferases, mas dentro de uma faixa de normalidade e sem alterações significativas na viabilidade hepática (liberação de glicose, secreção de bile e depuração de bromossulfaleína). A secreção de bile diminuiu após IRI em todos os grupos, ômega-3 apresentou diminuição na liberação de glicose e ômega-6 aumento no tempo de meia-vida de eliminação de bromossulfaleína. A quantidade de B1R estava aumentada em todos os grupos que sofreram IRI, porém sem diferença entre eles. Verificou-se nível maior de morte celular por necrose no grupo ôemga-6/NaCl em relação ao grupo controle. ômega-6/NaCl também apresentou aumento significante de IL-6, IL-1Beta e IL-10, com diminuição na presença de BK e de DABK. Não foram observadas diferenças na quantidade de quimiocinas no homogenato hepático. Houve maior quantidade de caspase-3 clivada em ômega-6/BK, com menor quantidade de Bcl-2 e maior apoptose nos grupos ômega-3/DABK e ômega-6/DABK em relação ao grupo não isquêmico, segundo ensaio do TUNEL. Conclusão: nenhuma das dietas trouxe benefício significativo na proteção do fígado contra a IRI, mas foram capazes de alterar a ação das cininas em relação aos eventos de morte celular decorrente da IRI.